Mutu Benih Dalam konsepsi Steinbauer-Sadjad (Sadjad, 1993), periode dari saat antesis sampai dengan benih mati disebut

Transkripsi

1 TINJAUAN PUSTAKA Mutu Benih Dalam konsepsi Steinbauer-Sadjad (Sadjad, 1993), periode dari saat antesis sampai dengan benih mati disebut periode viabilitas benih. Periode viabilitas benih ter- diri atas tiga fragmen, masing-masing disebut Periode I (periode pembangunan benih atau genesis benih), Periode I1 (periode simpan) dan Periode I11 ( periode kritikal). Mutu benih pada Periode I ditentukan oleh faktor innate atau genetik, dan faktor induce yaitu faktor lingkungan sewaktu benih masih berada di tanaman induk. Pemupukan, naungan, musim, irigasi, jarak tanam dan tingkat stress (kekeringan, serangan hama atau penyakit, saingan gulma), merupakan contoh-contoh faktor induce. Pada Periode I1 mutu benih dipengaruhi oleh faktor enforce yaitu kondisi fisik dan biosfer lingkungan simpan, serta kadar air benih. Beberapa penulis mengemukakan berbagai faktor yang menentukan mutu benih, antara lain : a. Faktor lingkungan setelah tanam sampai sebelum panen meliputi : suhu, air, oksigen, cahaya, curah hujan, tipe dan kelembaban tanah, jenis mikroorganisme, dan nutrisi mineral dalam tanah (Pollock, 1972; Austin, 1972). b. Faktor lingkungan simpan meliputi : kelembaban nisbi

2 dan suhu udara simpan, oksigen, mikroorganisme penyebab penyakit dan serangga hama (Roberts, 1972). Sadjad (1980) mengemukakan berbagai faktor yang mempengaruhi mutu benih selama proses produksinya sebagai berikut : (a) Proses perkembangan dan pemasakan benih yang meliputi: fase penyerbukan dan pembuahan, fase pertumbuhan benih, fase penghimpunan cadangan makanan dalam benih dan fase pemasakan benih; (b) Proses pemanenan dan perontokan meliputi : ketepatan waktu panen, kondisi cuaca, cara panen baik secara manual maupun dengan mesin, dan ketrampilan pelaksanaan; (c) Proses pengeringan meliputi : cara pengeringan, kadar air benih, kelembaban nisbi udara dan pengaturan suhu ; (d) Proses pembersihan dan pengolahan lainnya meliputi : cara pembersihan' baik manual maupun mekanis, seed treatment, dan seed pelletting; (e) Proses penyimpanan benih meliputi faktor-faktor : genetik, kondisi lingkungan simpan, sifat higroskopis benih dan sifat difusibilitas termal benih. Menurut Delouche (dalam Sadjad, 1972), mutu benih mencakup mutu genetik, mutu fisik dan mutu fisiologi. Mutu genetik benih ditentukan oleh tingkat kemurnian varietas, sedangkan mutu fisik oleh tingkat kebersihan fisik.

3 Mutu fisiologi benih mencakup tingkat kemunduran benih, viabilitas benih, dan tingkat daya simpannya. Sadjad (1990) membagi viabilitas dalam tiga macam parameter : (a) ~iabilitas ~otensial adalah kemampuan viabilitas lot benih yang menunjukkan kemampuan benih menumbuhkan tanaman normal yang berproduksi normal pada kondisi lapang produksi yang optimum; (b) Vigor Kekuatan Tumbuh adalah parameter vigor lot benih yang menunjukkan kemampuan benih tumbuh normal pada kondisi lapang yang suboptimum; (c) Vigor Daya Simpan adalah parameter via- bilitas lot benih yang menunjukkan vigor benih pada kurun waktu Periode I1 atau Periode Simpan. Tiap parameter tersebut memiliki tolok ukur masing-masing, misal untuk parameter Viabilitas Potensial tolok ukurnya adalah Daya Berkecambah dan Berat Kering Kecambah Normal. Vigor Daya Simpan dengan tolok ukurnya Keserempakan Tumbuh Kecambah dan Valk. Sedang Vigor Kekuatan Tumbuh tolok ukurnya Ke- cepatan Tumbuh Kbcambah atau Kecepatan Tumbuh Bibit. Kemunduran Viabilitas Benih Menurut Sadjad (1972), kemunduran benih adalah mundurnya mutu fisiologi benih yang dapat menimbulkan perubahan menyeluruh di dalam benih baik fisik, fisiologis maupun kimiawi yang dapat mengakibatkan menurunnya viabilitas benih. Selanjutnya Sadjad (1979) menjelaskan bahwa sebelum benih menunjukkan gejala tumbuh, viabilitas

4 benih sudah dapat diketahui mundur dengan melihat struktur anatomi selnya, baik dengan melihat inti sel maupun organel di luar inti. Abdul Baki dan Anderson(l972) berpendapat bahwa kemunduran viabilitas benih adalah menurunnya kualitas benih yang tidak dapat balik dan terjadi setelah benih mencapai viabilitas maksimum. Menurut Gove (dalam Abdul Baki dan Anderson, 1972), kemunduran viabilitas benih didefinisikan sebagai jatuhnya kualitas, karakter atau vitalitas dari tingkat yang tinggi ke tingkat yang lebih rendah, dan secara tidak langsung ha1 tersebut melemahkan vigor. Roberts (1973) menyebutkan bahwa kemunduran viabilitas benih merupakan gabungan dari ketidaknormalan fisiologi dan ultrastruktur benih yang meliputi perubahan-perubahan di dalam protoplast, inti sel, mitokondria, plastid, ribosom dan lisosom. Harrington (1973) sangat percaya bahwa penyebab utama kemunduran viabilitas benih adalah adanya denaturasi protein. Hal ini dapat disebabkan oleh ikatan silang di dalam individu molekul protein atau oleh polimerisasi protein. Denaturasi protein histon pada kromosom dapat menghambat aktivitas DNA; denaturasi protein ensim dapat menghambat seluruh proses, dan denaturasi protein membran dapat meningkatkan permeabilitas membran. Menurut Roberts (dalam Roberts, 1972) hilangnya viabilitas benih juga disebabkan adanya denaturasi protein yang meliputi denaturasi lipoprotein sel membran yang menyebabkan hilangnya

5 integritas membran sel. Teori ini berkaitan dengan membran lemak yang memiliki komponen asam lemak tidak jenuh sebagai subyek dalam proses peroksidasi pada kondisi aerob. Selain itu juga terjadi denaturasi asam nukleat yaitu meningkatnya depurinasi (lepasnya adenin dan guanin) dari DNA. Meningkatnya suhu dan kadar air menyebabkan meningkatnya depurinasi dari DNA. Depurinasi oleh panas menyebabkan mutasi spontan dan berhentinya kegiatan selsel. Abdul Baki dan Anderson (1972) melaporkan bahwa selama proses penuaan terjadi degradasi enzim-enzim alkohol dehidrogenase, amilase, katalase, selulase, sitokrom oksidase, glutamat dekarboksilase, malat dehidrogenase, peroksidase dan fenolase. Ching (1973) juga melaporkan bahwa menurunnya viabilitas berhubungan erat dengan berkurangnya aktivitas enzim fosfatase. Menurut Roberts dan Osborne (1973), hilangnya viabilitas ditandai dengan adanya depurinasi molekul DNA. Teori ini didukung oleh beberapa peneliti karena sesuai untuk menerangkan mekanisme kemunduran viabilitas benih. Menurut Delouche (dalam Heydecker, 1972), kemunduran benih dapat ditunjukkan dengan adanya indikasi-indikasi sebagai berikut : (1) degradasi pada membran seluler dan selanjutnya kehilangan fungsi kontrol permeabilitasnya;

6 (2) lemahnya energi yang dihasilkan dan konsekuensinya adalah lemahnya mekanisme biosintesis; (3) menurunnya respirasi dan biosintesis; (4) lambatnya perkecambahan dan pertumbuhan kecambah; (5) meningkatnya persentase kecambah abnormal; (6) hilangnya daya berkecambah; (7) daya simpannya menurun; (8) lambatnya pertumbuhan dan perkembangan tanaman; (9) pertumbuhan dan perkembangan diantara tanaman dalam suatu populasi tidak seragam; (10) meningkatnya kepekaan terhadap keadaan lingkungan yang menekan (termasuk mikroorganisme); (11) menurunnya potensi produksi tanaman; Abdul Baki dan Anderson (1972) berpendapat bahwa indikasi untuk mengukur kemunduran viabilitas benih sering berubah-ubah dan jauh dari yang distandarisasikan. Kesulitan pokok adalah masih langkanya literatur yang mantap untuk tiap spesies atau varietas tanaman yang dapat memberi penilaian suatu lot benih pada saat yang diinginkan. Namun akhir-akhir ini penelitian lebih ditekankan pada perubahan-perubahan biokimiawi atau fisiologis seperti perubahan kualitatif dan kuantitatif pada enzim yang spesifik, respirasi, sintesis protein dan karbohidrat, kebocoran bahan organik dan anorganik serta degradasi pada cadangan makanan.

7 A. Perwjudan Fisiologis Kemunduran Viabilitas Benih Menurut Toole, Toole dan Gorman (dalam Abdul Baki dan Anderson, 1972), perwujudan fisiologis kemunduran viabilitas benih meliputi beberapa ha1 yaitu perubahan warna benih, tertundanya perkecambahan, menurunnya toleransi terhadap kondisi lingkungan suboptimum selama perkecambahan, rendahnya toleransi terhadap kondisi simpan yang kurang sesuai, sangat peka terhadap perlakuan radiasi, pertumbuhan kecambah menurun, daya berkecambah menurun, dan meningkatnya jumlah kecambah abnormal. Terhadap respon tersebut menurunnya daya berkecambah diterima secara luas sebagai kriteria untuk menentukan kemunduran viabilitas benih. Dari indikasi-indikasi tersebut mungkin pada suatu saat akan muncul indikasi tertentu yang dapat mencerminkan kemunduran viabilitas contoh benih pada spesies tanaman yang memiliki sifat-sifat yang khas. Untuk menilai suatu kemunduran viabilitas benih, pada umumnya penelisian selalu mengikutkan uji daya berkecambah dan vigor sebagai kriteria kemunduran viabilitas benih (Justice dan Bass, 1978). Delouche (dalam Justice dan Bass, 1978) mengatakan bahwa laju perkembangan dan pertumbuhan kecambah jagung merupakan pengukur perkembangan kemunduran yang paling konsisten dan paling peka. Menurut Delouche dan Baskin (dalam Copeland, 1976) benih yang telah mundur menunjukkan kecambah yang tidak sera- gam. Perubahan warna kulit benih menjadi coklat pada

8 kebanyakan spesies sering diikuti perubahan warna coklat pada bagian embrio, ha1 ini merupakan salah satu indikasi untuk mengetahui kemunduran benih (Harrington, 1973). Demikian pula kerusakan mekanis selama panen sampai prosesing menyebabkan banyak benih yang tumbuh abnormal. Borthwick (dalam Abdul Baki dan Anderson, 1972) mencatat beberapa abnormalitas benih sebagai akibat panen dengan menggunakan mesin, yaitu kerusakan pada kulit, patahnya hipokotil dan kotiledon. Moore (1972) mengatakan bahwa dalam pengadaan benih secara mekanis kerusakan fisik merupakan penyebab utama penurunan viabilitas benih. Kerusakan fisik terjadi antara lain oleh perusakan selama proses panen, penjatuhan dari elevator, dan sarana angkutan. Effmann (dalam Moore, 1972) mengevaluasi adanya kecambah abnormal benih lupin (Lupinus luteus) dari banyak contoh, dan tercatat bahwa contoh dengan kerusakan fisik yang makin besar akan menghasilkan kecambah abnormal makin banyak. Kerusakan fisik sangat erat hubungannya dengan kadar air dalam benih. Pada umumnya benih yang kadar airnya rendah lebih berat kerusakannya dibanding benih yang kadar airnya tinggi (Moore, 1972; Herath dan Don, 1981). Benih-benih leguminosa seperti buncis, ka- cang panjang dan kedelai diketahui mempunyai kepekaan yang tinggi terhadap kerusakan fisik, terutama pada kadar air yang rendah (Green g& aj., Delouche dan Moore dalam Heradth dan Don, 1981). Hasil penelitian pada

9 benih kedelai menunjukkan bahwa ada interaksi antara benturan mekanis dengan kadar air benih. Makin besar benturan mekanis dan makin rendah kadar airnya maka makin menurun vigor dan daya simpan benih (Herlina, Pranoto, dan Suhartanto, 1990). B. Perwujudan Biokimiawi Kemunduran ~iabilitas Benih ~ejala kemunduran benih yang dicerminkan dengan adanya perubahan-perubahan fisiologis dan biokimiawi dapat dideteksi dengan teknik pengukuran yang teliti, misal dengan uji pertumbuhan dan analisa biokimia (Copeland, 1976). Pemahaman faktor-faktor mendasar pada gejala pengusangan benih adalah sangat penting dalam mempelajari kemunduran benih. Copeland (1976) mengajukan beberapa teori mengenai terjadinya kemunduran benih yang merupakan kombinasi dari beberapa penyebab yang terdiri atas: (1) habisnya cadangan makanan; (2) matinya jaringan sel; (3) terkumpulnya senyawa beracun; (4) menurunnya mekanisme yang mendor'ong perkecambahan; (5) kemampuan ribosom untuk memisah tidak ada ; (6) degradasi dan tidak aktifnya enzim; (7) otoksidasi lemak; (8) menurunnya pembentukan dan aktifitas enzim ; (9) degradasi struktur fungsional; dan (10) degradasi genetik. Abdul Baki dan Anderson (1972) mengemukakan bahwa terdapat banyak perubahan biokimiawi yang terdeteksi dalam benih yang mengalami kemunduran. Tetapi perubahan tersebut lebih bersifat akibat dan penyebabnya sendiri belum diketahui.

10 Banyak usaha telah dilakukan untuk menghubungkan pe- rubahan biokimiawi dengan indikasi langsung kemunduran benih seperti menurunnya perkecambahan, pertumbuhan ke- cambah dan hasil. Dari metabolisme respirasi dalam oksi- dasi cadangan makanan dihasilkan sejumlah besar inter- mediat-intermediat sebagai bahan baku untuk pembentukan senyawa-senyawa protoplasma ( asam nukleat, protein, le- mak ), dan energi kimia dalam bentuk adenosin trifosfat (ATP) yang digunakan dalam reaksi tersebut (Abdul Baki dan Anderson, 1972). Abdul Baki dan Anderson (1972) me- nunjukkan bahwa benih yang mengalami kerusakan fisik mem- punyai laju respirasi tinggi dibanding dengan benih yang tidak rusak. Dalam beberapa kasus, uji daya berkecambah dan per- tumbuhan dilakukan pada lot benih yang sama sebagai usaha menghubungkan proses respirasi dengan perubahan fisiolo- gis. Pada umumnya hubungan antara oksigen yang diambil oleh benih yang berkecambah dan pertumbuhan kecambah ada- lah positif dan nyata. Nilai Kosien Respirasi (KR) se- ring diamati dalam kemunduran viabilitas benih (Woodstock dan Grabe, 1967; Anderson, 1970). Perubahan-perubahan enzim merupakan indikasi dalam proses kemunduran benih, dan menurunnya aktivitas enzim mempunyai hubungan dengan menurunnya viabilitas benih (Abdul Baki dan Anderson, 1972). Peranan bermacam-macam enzim pada berbagai benih tanaman telah diselidiki oleh

11 banyak peneliti terdahulu. ~nzim-enzim oksidase seperti katalase, peroksidase, dan fenolase merupakan enzim-enzim pertama yang diteliti dengan tujuan untuk menentukan hubungan antara aktivitas enzim dengan viabilitas benih. Hasil penelitian Zheng Guang-Hua (1984) pada benih Populus spp menunjukkan bahwa penurunan aktivitas enzim dehidrogenase diikuti dengan menurunnya viabilitas (diukur atas dasar persentase Daya Berkecambah). Benih safflower (Carthamus tinctorius L.) yang mengalami pengusangan cepat selama 14 hari menunjukkan penurunan aktivitas enzim amilase, lipase, protease, dan dehidrogenase. Tingkat penurunan aktivitas bervariasl dan ternyata enzim amilase dan lipase lebih peka terhadap perlakuan pengusangan (Kole dan Gupta, 1982). Menurut Barton dan Harrington (dalam Abdul Baki dan Anderson, 1972) menurunnya viabilitas benih yang dikaitkan dengan habisnya cadangan makanan masih perlu dipertanyakan, sebab dalgm benih yang kehilangan kemampuannya untuk berkecambah ternyata di dalam jaringan masih terdapat cadangan makanan dalam jumlah cukup banyak. Pendapat ini sama dengan hasil penelitian Ching dan Schoolcraft (1968) dengan memperlakukan benih semanggi (Trifolium incarnatum L.) dan rumput Lolium perenne L. yang disimpan selama 10 tahun pada suhu yang berbeda-beda, yaitu bahwa hilangnya viabilitas dan vigor bukan karena kehilangan makanan, tetapi berkorelasi dengan aktivitas enzim-enzim

12 protease, fitase dan fosfatase. Dalam penelitian tersebut pati sebagai bahan utama cadangan makanan tidak mengalami penurunan pada benih yang mengalami kemunduran. Pada kasus benih yang mengandung lemak tinggi, selama berlangsungnya proses perkecambahan terjadi penurunan lemak, tetapi diikuti pula dengan munculnya karbohidrat. Hal ini terjadi pada benih jarak (Ricinus communis L.), lemak menghilang pada periode perkecambahan. Sementara terjadi akumulasi zat tepung di endosperma pada hari keempat. Sesudah itu zat tepung dalam endosperma menghilang lagi, tetapi berpindah ke - bagian lain seperti hipokotil. Hal ini menunjukkan bahwa lemak dirombak menjadi gula di dalam endosperma dan karbohidrat yang terbentuk ditransfer ke embrio (Mayer dan Poljakoff, 1989). Zeleny dan Coleman (dalam Abdul Baki dan Anderson, 1972) mengatakan bahwa salah satu perubahan yang umumnya berhubungan dengan kemunduran benih, khususnya pada benih yang berlemak adajah meningkatnya keasaman. Zeleny dan Coleman menunjukkan asam-asam tersebut terdiri atas: (a) asam lemak bebas, yang dihasilkan oleh aktivitas enzim lipase pada lemak; (b) asam fosfat, sebagai hasil dari hidrolisis fitin oleh enzim fitase; dan (c) asam-asam amino yang dihasilkan oleh hidrolisis protein oleh enzim protease. Di antara tiga kelompok tersebut yang paling banyak dan mudah bertambah adalah asam lemak bebas.

13 Stewart dan Bewley (1979) dalam pengusangan cepat benih kedelai pada suhu dan kelembaban nisbi tinggi memperoleh hasil bahwa poros embrio dari benih yang diusangkan mengandung malondialdehid (MDA) tinggi (MDA adalah produk dari proses peroksidasi pada asam lemak tidak jenuh); kadar asam linoleat dan linolenat dalam lemak polar (fosfolipida) berkurang selama pengusangan berakhir. Da- lam penelitiannya Stewart dan Bewley menggunakan poros embrio dan tidak menggunakan kotiledon atau benih utuh, karena kotiledon merupakan sumber atau lokasi penyimpanan lemak, sehingga dianggap tidak wajar bila digunakan untuk mempelajari perubahan lemak polar dan peroksidasi lemak. Penelitian Harman dan Mattick (dalam Stewart dan Bewley, 1979) menunjukkan ada perubahan asam lemak poros embrio maupun dalam benih utuh. Peroksidasi lemak atau otoksidasi adalah penyebab awal dari kemunduran benih. Beberapa asam lemak tidak jenuh terdapat &lam benih dan sangat peka terhadap de- gradasi peroksidatif. Sebagai hasilnya tidak hanya le- mak itu sendiri yang rusak tetapi juga secara kompleks pada rangkaian reaksi sehingga menimbulkan beberapa racun yang potensial (Priestley, 1986). Disebutkan pula bahwa di dalam penyimpanan, peroksidasi dapat muncul baik sebagai otoksiasi atmosferik atau secara langsung oleh enzim lipoksigenase, suatu enzim yang banyak terdapat dalam benih yang kering.

14 Enzim lipoksigenase (linoleat: Oksigen oksidoreduk- tase, EC ), pertama kali ditemukan sebagai en- zim perusak karoten yang disebut karoten oksidase pada biji kedelai. Lebih lanjut pada biji kedelai menunjukkan adanya kandungan enzim yang dikenal sebagai lipoksidase yang mengoksidasi asam lemak tidak jenuh. Karoten oksi- dase, lipoksidase dan lipoksigenase merupakan enzim yang sama (Scott, 1975). Enzim lipoksigenase berfungsi seba- gai katalisator proses pembentukan hidroperoksida dari asam lemak tidak jenuh atau esternya yang mengandung ikatan cis, cis pentadiena dengan menggunakan mo- lekul oksigen. Asam lemak tidak jenuh yang dimaksud ada- lah asam linoleat, asam linolenat, dan asam arachidonat, semuanya merupakan asam-asam lemak esensial ( Scott, 1975; Leoni g& a., 1976). Otoksidasi adalah proses peroksidasi asam lemak ti- dak jenuh dengan molekul oksigen. Mekanisme otoksidasi terdiri atas tiga tahapan reaksi yaitu inisiasi, propaga- si dan terminasi. Sasaran utama otoksidasi adalah ikatan rangkap (rantai methilen) yang sangat peka terhadap per- oksidasi. Secara skematis rangkaian reaksi otoksidasi adalah sebagai berikut (Patterson, 1989):

15 - Reaksi inisiasi RH R' + H' Reaksi propagasi R' + O2 ROO' - ROO' + RH ROOH + R' Reaksi terminasi semua radikal molekulsaling membe- molekul baskan tidak aktif Tingkatan degradasi asam lemak tidak jenuh dipengaruhi oleh derajat ketidakjenuhannya. Asam linoleat (C18. 2) akan terdegradasi kali lebih cepat dibanding asam oleat (C18. karena jumlah ikatan rangkap asam linole- at ada dua sedangkan asam oleat hanya satu. Asam linole- nat (CI8 : 3) akan terdegradasi kali lebih cepat dibanding asam oleat karena jumlah ikatan rangkap asam linolenat ada tiga (Schaich, dalam Priestley, 1986). Pada reaksi otoksidasi ini, energi yang diperlukan dapat berasal dari panas, cahaya atau pengaruh radiasi. Pada reaksi pertama (inisiasi): terjadi proses pemindahan molekul hidrogen dari lemak (RH) dengan katalisator metal akan menghasilkan radikal bebas organik yang reaktif (R') dan radikal bebas hidrogen (He). Pada tahap reaksi beri- kutnya (propagasi) : radikal bebas organik (Re) akan be- reaksi dengan oksigen (02) dari atmosfer dan menghasilkan radikal bebas peroksida lemak (ROO'). Selanjutnya ROO' bereaksi dengan molekul lemak lain (RH) dan akan mengha- silkan hidroperoksida (ROOH) yang stabil dan R' lainnya,

16 sebagai hasil akhir dari proses otoksidasi. ~eaksi berikutnya adalah R' yang kedua akan bereaksi dengan oksigen lagi dan menghasilkan peroksida lebih lanjut. ~khirnya pada reaksi yang terakhir (terminasi): reaksi akan berhenti apabila radikal bebas saling membebaskan satu sama lain dan terbentuk molekul-molekul yang tidak aktif. Menurut Priestley (1986) peningkatan suhu dan kadar air benih dalam penyimpanan menyebabkan meningkatnya kadar asam lemak, tetapi masih banyak dipersoalkan apakah hidrolisis terjadi dari aktivitas benih ataukah aktivitas enzim lipase dari jamur. Flood dan Sinclair (1981) me- nyebutkan bahwa benih yang kulitnya permeabel menunjukkan secara nyata menurunnya asam linoleat dan asam linolenat dibanding dengan benih yang kulitnya impermeabel. Hasil ini tidak menolak hipotesa bahwa kulit benih yang imper- meabel menolak masuknya oksigen dan memperbaiki viabili- tas dengan menghalangi terjadinya proses otoksidasi dari asam lemak tidak jenuh. Koostra dan Harrington; Pammen- ter; Adamson dan Berjak; Harman dan Mattick (dalam Flood dan Sinclair, 1981) menyebutkan bahwa adanya otoksidasi asam lemak tak jenuh di dalam benih dapat menyebabkan hi- langnya viabilitas secara gradual dan suatu saat akan ma- ti. ~asil penelitian Sangwan, Gupta, dan Dhindsa (1986), menyebutkan bahwa kandungan asam oleat menurun, sedangkan asam linolenat meningkat pada saat kemasakan benih kede- lai. Menurunnya asam palmitat dan stearat diimbangi -

17 dengan meningkatnya asam linoleat pada benih masak sesuai dengan hasil peneliti lainnya. Menurunnya integritas membran merupakan perwujudan langsung dari rusaknya sel-sel semi permeabel yang dimiliki. Parrish, Leopold dan Hanna (1982), mendapatkan bahwa benih kedelai yang diperlakukan dengan pengusangan pada suhu 41 C dan kelembaban nisbi jenuh, mengalami perubahan integritas membran yang jelas hanya dalam dua hari sebelum viabilitas dan vigor menurun secara nyata. Priestley (1986) berpendapat bahwa hubungan antara cairan kebocoran dengan pengusangan tidak berlaku bagi semua spesies benih atau pada semua tipe pengusangan. Dasar biokimia pelukaan membran dalam benih usang yang diteliti dengan cermat, seperti defisiensi membran tidak hanya mengancam integritas sel-sel secara langsung, tetapi juga diperhitungkan terhadap penurunan aktivitas hubungan antara membran dengan metabolik seperti halnya respirasi.