BAB III METODE PENELITIAN

Transkripsi

1 BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Rancangan Penelitian Rancangan penelitian ini adalah single-blind randomized controlled trial dengan membandingkan efek suplementasi vitamin D antara 2 kelompok, dimana kelompok I diberi OAT dan vitamin D dengan dosis 2,5 mg, dan kelompok ke II diberikan OAT dan plasebo Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilakukan di beberapa puskesmas dan rumah sakit wilayah Medan. Penelitian direncanakan selama 7 bulan dan untuk pengumpulan data dilakukan selama 4 bulan Populasi, Sampel dan Besar Sampel Populasi Populasi penelitian adalah penderita TB paru adalah penderita TB paru yang berobat ke puskesmas dan rumah sakit wilayah Medan Sampel Sampel penelitian adalah sebagian populasi yang memenuhi kriteria inklusi dan kriteria eksklusi sebagai berikut: Kriteria inklusi: 1. Penderita TB paru kasus baru yang belum diobati, dengan kuman BTA positif dalam dahak dengan cara pemeriksaan hapusan langsung. 2. Usia > 18 tahun. 3. Bersedia untuk mengikuti penelitian yang dinyatakan secara tertulis setelah mendapatkan penjelasan mengenai penelitian ini (informed consent). 37

2 Kriteria eksklusi 1. Menderita HIV, Diabetes Melitus, penyakit ginjal dan penyakit hati serta penyakit berat lainnya. 2. Sedang mengkonsumsi suplemen vitamin D, obat imunosupresif seperti kortikosteroid dan kemoterapi kanker Besar sampel n1 =n2 = ((Zα P(1-P) + Zβ p1(1-p1)+p2(1-p2)) 2 (p1-p2) 2 dimana: n = Besar sampel Zα = Deviat baku α (α = 0,05, Zα = 1,960) Zβ = Deviat baku β (β = 10%, Zβ = 0,842) P = p1+p2/2 p1 = Nilai proporsi kelompok perlakuan = 0,63 (Siswanto dkk. (2009)) p2 = Nilai proporsi kelompok kontrol =0,33 (Siswanto dkk. (2009)) Maka di dapatkan besar sampel satu kelompok (n) sebesar 34 orang. Dengan perhitungan drop out 10% maka jumlah total sampel keseluruhan adalah 75 sampel, untuk memudahkan pembagian kelompok dibuat menjadi 76 sampel Metode pengambilan sampel Pemilihan sampel penelitian ini dilakukan dengan menggunakan prinsip non probability sampling dengan tehnik consecutive sampling, sampel yang sesuai dengan kriteria inklusi dipilih dan dilakukan secara acak. TB aktif yang memenuhi kriteria inklusi akan digunakan sebagai sampel dan dibagi menjadi 2 kelompok. Kelompok I diberikan vitamin D dan kelompok 2 diberikan plasebo. Masing-masing kelompok diikuti sampai 2 bulan untuk dilihat konversi sputum dan perbaikan foto toraks setelah pengobatan Oral Anti Tuberculosis (OAT). 38

3 3.5. Kerangka Operasional Meminta persetujuan Majelis Komite Etik Penelitian (Ethical Clearance) Menentukan sampel penelitian n=76 Pasien TB Paru BTA (+) Mengumpulkan data sampel penelitian Mencatat data sampel penelitian dari rekam mendik hasil anamnesis, hasil Pemeriksaan fisik, hasil pemeriksaan BTA Pengambilan sputum sebelum perlakuan Foto RO toraks sebelum perlakuan Mengambil sampel darah OAT + Plasebo (0,2,4,6) OAT + Vitamin D (0,2,4,6) Sentrifugasi Pemeriksaan sputum dilakukan pada minggu ke 2, 4, 6, dan 8 Foto toraks setelah 2 bulan perlakuan Pemeriksaan kadar vitamin D dengan tehnik ELISA sebelum perlakuan Kadar vitamin D setelah 2 bulan perlakuan Analisa Data Gambar 3.1. Kerangka Operasional 39

4 1. Variabel tergantung (dependen) : - Konversi sputum - Perbaikan radiologis 2. Variabel bebas (independen) : Pengobatan supportive suplemen vitamin D 3.6. Definisi Operasional Tabel 3.1. Definisi Operasional No Variabel Definisi Cara dan alat ukur Kategori Skala ukur 1. Konversi Perubahan Pemeriksaan dahak Terjadi dahak/sputum BTA (konversi) hasil Sewaktu-Pagi-Sewaktu (SPS): perubahan (konversi) Nominal hapusan sputum BTA penderita TB Paru BTA positif menjadi BTA negative setelah menjalani masa intensif. S(sewaktu): Dahak dikumpulkan pada saat suspek TB datang berkunjung pertama kali. Pada saat pulang, Suspek membawa sebuah pot dahak untuk mengumpulkan dahak pagi pada hari kedua. P(Pagi): Dahak dikumpulkan di Cara dan Alat Ukur Tidak terjadi perubahan (konversi) 40

5 No Variabel Definisi Kategori Skala Ukur rumah pada pagi 2. Radiologis Perubahan hasil toraks foto setelah 2 bulan pemberian vitamin D. Dilihat berapa zona paru yang mengalami kerusakan dan Definisi hari kedua, segera setelah tidur. dan sendiri bangun Pot dibawa diserahkan kepada petugas di UPK. S(sewaktu): Dahak dikumpulkan di UPK pada hari kedua, menyerahkan dahak pagi. saat Foto Rontgen dengan melakukan foto toraks posisi PA Melihat berapa zona paru yang terlibat/mengalami kerusakan, dengan hasil: 0=Tidak ada yang terlibat/bersih 1= Ada 1 zona yang terlibat 2= Ada 2 zona yang terlibat 3= Ada 3 zona yang terlibat 4= Ada 4 zona Kategori Nominal 41

6 No Variabel Cara dan Alat Ukur Skala Ukur 3. Kadar Vitamin D perbaikan setelah pemberian vitamin atau perlakuan D yang dinilai oleh dokter spesialis paru spesialis radiologi. Kadar 25(OH) vitamin dalam serum dan D ELISA kit dengan melakukan pemeriksaan vitamin D yang terlibat 5=Ada 5 zona Kategori yang terlibat 6= Ada 6 zona yang terlibat Insufisiensi Defisiensi Nilai kadar Vitamin D dalam (ng/ml) Optimal (>30) Sufisiensi (20-30) Insufisiensi (10-20) Defisiensi (<10) Kategorik Dan Nominal 42

7 3.7 Prosedur Pengumpulan Data 1. Sebelum penelitian dimulai, peneliti meminta keterangan lolos kaji etik (ethical clearance) kepada Panitia Tetap Penilai Etik Penelitian Fakultas Kedokteran USU. 2. Setiap penderita yang diikutsertakan dalam penelitian harus dibuat surat informed consent, yang harus ditandatangani oleh penderita dan peneliti 3. Penderita TB paru yang ditegakkan berdasarkan anamnesis, pemeriksaan klinis, pemeriksaan foto toraks dan pemeriksaan dahak kuman Basil Tahan Asam (BTA) positif melalui hapusan langsung serta memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi diikut sertakan dalam penelitian. 4. Dilakukan pemeriksaan test HIV dan kadar gula darah. Pasien yang menderita HIV dan Diabetes Melitus tidak diikut-sertakan dalam penelitian. 5. Kemudian diambil darah penderita TB (kasus) dari vena mediana kubiti untuk pemeriksaan kadar vitamin D. 6. Hasil data yang didapat dicatat dan dimasukkan ke dalam tabel untuk dianalisa Prosedur pemeriksaan sediaan hapus langsung kuman bakteri tahan asam dari sputum a. Persiapan pasien 1) Pasien dianjurkan untuk mengosok gigi dan berkumur sebanyak 3 kali dengan menganti air hangat setiap kali berkumur. 2) Jika pasien belum dapat mengeluarkan sputum dapat diberikan tablet gliseril guaicolat 200 mg. 3) Jika dahak kental dan sulit dikeluarkan dapat diberikan obat mukolitik atau ekspektoransia. b. Waktu pengumpulan dahak 1) Sewaktu hari 1 pada saat pasien dating kunjungan pertama 2) Pada hari ke 2 penderita mengumpulkan dahak setelah hari kedua pada saat bangun tidur. 43

8 3) Sewaktu ke 3 pada saat mengumpulkan dahak dihari kedua. 4) Sputum di periksa pada minggu ke 2, 4, 6 dan 8. c. Pengecatan sputum dengan pewarnaan Ziehl Neelsen 1) Ambil sputum kental dengan lidi 2) Hapuskan specimen pada kaca objek dengan ukuran 2x3cm 3) Keringkan pada suhu kamar 4) Difiksasi 3x 5) Lumuri dengan karbol fucsin 6) Lalu fiksasi preparat 7) Biarkan selama 5 menit Cuci dengan air mengalir 8) Tuangkan preparat dengan asam alcohol 3 % selama 2 menit 9) Bilas dengan air lalu tuangkan methylen blue 0,3 % selama dtk 10) Cuci dengan air mengalir sampai bersih lalu keringkan. 11) Preparat siap dibaca Prosedur pembacaan foto toraks Peneliti mencatat hasil foto toraks sampel yang dibacakan oleh dokter spesialis radiologi dan spesialis paru. Pasien akan di foto toraks sebelum perlakuan dan pada akhir minggu kedelapan Prosedur pemberian vitamin D dan plasebo Peneliti memberi vitamin D 2,5 mg ( IU) secara oral sebanyak 4 kali pemberian yaitu pertama pada saat sampel di diagnosis TB, selanjutnya pada minggu ke-2, ke-4, dan ke-6. Kelompok kontrol akan diberi plasebo. Masingmasing kelompok perlakuan dan kontrol akan dibedakan berdasarkan dijumpainya kavitas pada foto toraks Pemeriksaan vitamin D (25-OH vitamin D ELISA assay kit) Untuk pemeriksaan vitamin D, diambil darah 2cc sebelum dilakukan perlakuan. Pada akhir minggu ke delapan, sampel akan diambil lagi darahnya sebanyak 2cc untuk diperiksa kadar vitamin D setelah perlakuan. Hitung jumlah 44

9 cawan ELISA pada setiap individu yang diperlukan untuk pengujian tersebut. Biarkan semua reagen yang disediakan, termasuk jumlah yang tepat dari strip paket untuk mencapai suhu kamar (setidaknya 30 menit), hapus sejumlah strip wadah yang diperlukan dan sesuaikan dengan tepat dan kencang ke dalam bingkai yang disediakan. Kontrol harus selalu dilakukan dalam setiap uji coba berlangsung. 1) Pipet masing-masing 200 μl dengan standar pengenceran 1-6, pengenceran pada kontrol 1 dan kontrol 2 ke cawan yang sesuai. 2) Pipet masing-masing 200 μl sampel pasien yang diencerkan dalam biotin / sampel penyangga ke masing-masing wadah untuk digunakan dalam pengujian tersebut. 3) Inkubasi pada suhu kamar (18 C hingga +25 C) selama 2 jam. 4) Setelah 2 jam inkubasi, aspirasi atau buang sampel dari wadah, tambahkan 300 ml Wash Buffer dan aspirasi atau buang lagi. Ulangi cuci dengan masing-masing 300 ml Wash Buffer dua kali lebih banyak untuk total tiga kali pencucian. Tekan wadah terbalik dengan lembut pada permukaan dengan penyerap yang bersih dan kering untuk menghilangkan tetesan Wash Buffer. 5) Pipet 100 ml enzim konjugasi ke masing-masing wadah dan inkubasi selama 30 menit pada suhu kamar (18 C hingga +25 C). 6) Setelah 30 menit inkubasi, aspirasi atau buang reagen dari wadah, tambahkan 300 μl Wash Buffer dan aspirasi atau buang lagi. Ulangi cuci dengan masing-masing 300 μl Wash Buffer dua kali lebih banyak untuk total tiga kali pencucian. Tekan sumur terbalik dengan lembut pada permukaan dengan penyerap yang bersih dan kering untuk menghilangkan tetesan Wash Buffer. 7) Pipet 100 ml larutan chromogen / substrat ke masing-masing wadah dan inkubasi selama 15 menit pada suhu kamar tanpa dikocok (melindungi dari sinar matahari langsung). 45

10 8) Hentikan reaksi substrat dengan penambahan 100 μl Stop Solution ke masing-masing wadah (ini akan menyebabkan warna biru menjadi kuning). 9) Pengukuran Photometric dari intensitas warna harus dilakukan pada panjang gelombang 450 nm dan referensi panjang gelombang antara 620 nm dan 650 nm dalam waktu 30 menit dari penambahan Stop Solution. Sebelum mengukur, sedikit goyangkan lempeng untuk memastikan distribusi homogen dari larutan Pengolahan Data Pengolahan data hasil penelitian ini diformasikan dengan menggunakan langkah-langkah berikut: - Editing : untuk melengkapi kelengkapan, konsistensi dan kesesuaian antara kriteria yang diperlukan untuk menjawab tujuan penelitian. - Coding : untuk mengkuatifikasi data kualitatif atau membedakan aneka karakter. Pemberian kode ini sangat diperlukan terutama dalam rangka pengolahan data, baik secara manual maupun dengan menggunakan komputer. - Cleaning : pemeriksaan data yang sudah dimasukkan ke dalam program komputer guna menghindari terjadinya kesalahan pada pemasukan data 3.9. Analisa data Data yang berhasil dikumpulkan diolah dan dianalisis dengan mempergunakan program komputer dengan menggunakan perangkat lunak statistik. Data akan dianalisa secara deskriptif untuk melihat distribusi frekuensi variabel serta karakteristik. Kemudian dilanjutkan dengan uji tidak berpasangan untuk melihat perbedaan masing-masing variabel pada kedua kelompok. 46

11 3.10. Jadwal Penelitian Tabel 3.2. Jadwal Penelitian Jadwal Bulan Uraian I II III IV V VI VII VIII IX X XI Persiapan Pengumpulan Data Penulisan Laporan Seminar Perkiaraan Biaya Penelitian a. Pengumpulan kepustakaan Rp ,- b. Pembuatan proposal Rp ,- c. Seminar proposal Rp ,- d. Radiologi Rp ,- e. Pemeriksaan kadar vitamin D Rp ,- f. Pembuatan dan penggandaan laporan Rp ,- g. Biaya tim penelitian Rp ,- h. Seminar hasil penelitian Rp ,- Jumlah Rp

12 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil Deskripsi Hasil Penelitian Penelitian analitik dengan desain single blind randomized controlled trial telah dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian vitamin D terhadap konversi sputum dan foto toraks terhadap pasien TB Paru. Penelitian ini telah mendapat persetujuan dari Komite Etik Penelitian Bidang Kesehatan USU. Penelitian ini dilakukan bulan Mei 2016 sampai dengan Oktober Subyek penelitian ini adalah pasien TB paru dewasa kasus baru BTA + yang datang berobat ke Puskesmas dipilih secara purposive sampling dan terdapat 76 orang sebagai subjek penelitian yang diikuti selama 2 (dua) bulan Karakteristik Subyek Penelitian Subyek Penelitian yang telah memenuhi syarat inklusi tersebut dikelompokkan menjadi 2 (dua) kelompok. Kelompok pertama mendapat intervensi vitamin D sebanyak 36 orang dan kelompok kedua pembanding mendapat plasebo sebanyak 36 orang. Berdasarkan karakteristik pasien distribusi subyek penelitian dikelompokkan menjadi kelompok usia, jenis kelamin, indeks massa tubuh, diagnose BTA awal, gambaran foto toraks awal, dan kadar vitamin 25(OH)D, seperti pada tabel 4.1. Tabel 4.1 Distribusi subyek penelitian berdasarkan karakteristik pasien Vitamin D Plasebo n= 38 n= 38 Umur (Tahun) Mean±SD 35,8 tahun ± 15,47 38,07 tahun ± 13,4 Jenis Kelamin: Laki-laki 29 (76,3%) 25 (65,7%) BB (kg) Mean ± SD 51 kg ± 8,14 52,1 kg ± 8,3 IMT Mean ± SD 18,9 ± 2,3 19,7 ± 2,15 Foto Toraks minimal 2 ( 5,2%) 4 (10,5%) moderate 12 (31,6%) 14 (36,8%) far advanced 24 (63,2%) 20 (52,6%) 48

13 Sambungan Tabel 4.1. Vitamin D Plasebo Zona yang terlibat Mean ±SD 4,63 ± 1,51 4,28 ± 1,75 Hapusan dahak (68,4%) 25 (65,8%) secara Mikroskopi 2+ 8 (21,05%) 10 (26,3%) 3+ 4 (10,55%) 3 (7,89%) Kadar 25(OH)D Defisiensi 0(0%) 0(0%) Insufisiensi 2(5,3%) 2(5,3%) Sufisien 13(34,2%) 10(26,3%) Optimal 23(60,5%) 26(68,4%) Berdasarkan hasil tabel diatas tidak ada perbedaan yang bermakna antara kelompok vitamin D dan plasebo terhadap umur (35,8 tahun vs 38,07 tahun), berat badan (51 kg ±8,14 vs 52,1 kg ±8,3 ), index masa tubuh (18,9 ±2,3 vs 19,7±2,15). Untuk jenis kelamin, pada dua kelompok didapati lebih banyak lakilaki dibanding wanita (71,05%). Kadar vitamin D awal pada kedua kelompok menunjukkan lebih banyak dengan nilai sufisien (20-30 ng/ml pada 23/76 orang) dan hampir sebagian besar dengan nilai optimal (>30 ng/ml pada 49/76 orang). Terdapat 51 orang (67,1%) memiliki hasil BTA +1 pada pemeriksaan dahak secara mikroskopi. Penilaian awal foto toraks pada kedua kelompok, sebagian besar menunjukkan lesi far arvanced (44/76 orang, 57,89%) Kadar vitamin D sebelum dan sesudah pemberian vitamin D Rerata kadar vitamin 25(OH)D sebelum dan sesudah pengobatan OAT selama 2 bulan kelompok tanpa vitamin D berurutan 30,03± 6,36(ng/ml) dan 42,08±22,8 (ng/ml) dengan p value 0,822. Rerata kadar vitamin 25(OH)D sebelum dan sesudah pengobatan OAT selama 2 bulan kelompok dengan vitamin D berurutan 33,51± 7,98(ng/ml) dan 68,19±23,7 (ng/ml) dengan p value 0,001. Pada grup vitamin D menunjukkan hasil yang bermakna kadar 25(OH)D. Hal ini dapat dilihat pada tabel 4.2 dan tabel

14 Tabel 4.2 Status vitamin D sebelum dan sesudah intervensi Kelompok Kadar Sebelum Sesudah Vit. D n % n % Defisiensi Plasebo Insufisiensi Sufisien Optimal Defisiensi Vitamin D Insufisiensi Sufisien Optimal p - value * *) Terdapat perbedaan signifikan status vitamin D antara pre dan post intervensi pada kelompok yang mendapat vitamin D dengan uji Wilcoxon Tabel 4.3 Kadar vitamin D sebelum dan sesudah intervensi Kelompok Sebelum Sesudah Mean SD Mean SD mean Plasebo Vitamin D p-value 0.000* *) Terdapat perbedaan signifikan kadar vitamin D antara pre-post intervensi pada kelompok plasebo dibandingkan kelopok vitamin D dgn uji Mann Whitney Perbandingan kecepatan waktu konversi sputum kelompok intervensi dan pembanding Hasil penelitian menunjukkan hubungan yang bermakna atara pemberian vitamin D dengan waktu konversi sputum pada bulan pertama pengobatan OAT. Pada kelompok vitamin D, rerata waktu konversi sputum pada 3,3 minggu dan 4,6 minggu pada kelompok kontrol. Proporsi pasien dengan konversi sputum negative solid pada minggu ke 4 untuk kedua kelompok. Untuk menganalisa perbandingan kecepatan konversi sputum antara kelompok intervensi dan placebo digunakan uji Mann Whitney Hal ini dapat dilihar pada tabel 4.4. dan gambar 4.1. Tabel 4.4 Waktu konversi sputum pada kelompok intervensi dan pembanding Vitamin D plasebo p-value Waktu konversi 3,3 weeks (± 1,7) 4,6 weeks (± 1,5) 0,001* 50

15 120% 100% 100% Smear Positif (%) 80% 60% 40% 86.80% 44.70% 44.70% Vit D Placebo 20% 21.05% 15.70% 7.89% 0% 0% Minggu 0 Minggu 2 Minggu 4 Minggu 6 Minggu 8 Waktu Konversi (Minggu) Gambar 4.1 Perbandingan waktu konversi sputum Perbandingan foto toraks pada kelompok intervensi dan pembanding Secara foto radiologis toraks, rerata zona paru yang terlibat pada kelompok vitamin D lebih banyak (0,76±0,63) mengalami pengurangan dibanding dengan kelompok tanpa vitamin D (0,55±0,82). Pada lesi kelainan, kelompok vitamin D lebih banyak (39,4%) mengalami perbaikan dibanding kelompok tanpa vitamin D (26,31%). Namun secara statistik, perbandingan antara kedua kelompok tidak memiliki nilai yg signifikan antara keterlibatan zona paru (p value 0,057) dan perbaikan lesi paru (p value 0,222). Untuk menalisanya digunakan dengan uji Chi Square. Hasil ini dapat dilihat pada tabel 4.5 Tabel 4.5 Pengurangan zona dan perbaikan luas lesi pada toraks pada kelompok intervensi dan pembanding Vitamin D Plasebo p-value Pengurangan Zona 0,76 ± 0,8 0,55 ± 0,6 0,057 Perbaikan luas lesi 15 (39.4%) 10 (26,31%) 0,222 51

16 4.2 Pembahasan Karakteristik subyek penelitian Berdasarkan karakteristik penelitian untuk usia subyek penelitian tidak berbeda antara dua kelompok dengan nilai median kelompok intervensi 35,8 tahun dan 38,07 tahun. Dari data ini menunjukkan pasien TB paru rata-rata pada orang dewasa. Hal ini sejalan dengan data WHO tahun 2012 yang melaporkan bahwa di Indonesia untuk presentase kelompok umur penderita TB paru BTA positif terbanyak adalah usia tahun sebesar 58,45%, diikuti kelompok umur tahun sebesar 34,06%, 65 tahun sebesar 6,6 %, dan sisanya umur 0-14 tahun. (WHO,2012). Jumlah pasien TB lebih tinggi pada kelompok usia tertentu kemungkinan disebabkan proses fisiologis tubuh yang berbeda pada setiap tingkatan usia, seperti peranan interaksi hormon terhadap infeksi TB. Penelitian Donald dkk, 2010 menyatakan adanya interaksi antara dehydroepiandrosterone (DHEA) dan glukokortikoid yang mempengaruhi beberapa fungsi limfosit. Hormon ini mulai diproduksi pada usia 7 tahun dan akan meningkatkan setelah masa pubertas. Konsentrasi DHEA berkorelasi dengan kadar interferon gamma. Penyakit TB aktif ditandai dengan peningkatan kadar kortisol dan penurunan kadar DHEA. Gangguan rasio kortisol terhadap DHEA mengakibatkan perubahan konsentrasi sitokin kunci pada TB yaitu interferon gamma. Berdasarkan jenis kelamin pasien TB yang menjadi subyek penelitian pada kelompok intervensi dan pembading dimana jenis kelamin laki-laki lebih banyak dibandingkan perempuan. Hal ini sejalan dengan penelitian Selvaraj (2008) dan Haddad (2014) menyatakan TB pada jenis laki-laki lebih rentan dibandingkan perempuan. Hal ini disebabkan oleh faktor resiko seperti merokok, konsumsi alkohol, pekerjaan, polusi udara, serta paparan industry. Allotey dkk (2008) membuktikan faktor-faktor tersebut dapat meningkatkan teradinya TB paru Kadar Vitamin D Kadar vitamin D sebelum dan sesudah perlakuan pada kelompok yang diberi vitamin D mengalami peningkatan. Rerata kadar vitamin D sebelum dan 52

17 sesudah perlakuan pada kelompok yang diberikan vitamin D adalah 33,51 ± 6,36 dan 68,19±31,75, rerata perbedaan setelah diberikan vitamin D adalah 31,75 ng/ml. Kadar vitamin D sebelum dan sesudah perlakuan pada kelompok yang diberikan plasebo juga mengalami peningkatan. Rerata kadar vitamin D sebelum dan sesudah perlakuan pada kelompok vitamin D adalah 30,03±6,36 dan 42,08±228. Rerata perbedaan vitamin D 7,46 ng/dl. Analisa data dengan uji statistik kadar vitamin D sebelum dan sesudah perlakuan terdapat perbedaan bermakna sebelum dan sesudah 2 bulan pemberian vitamin D dengan jumlah pasien 38 orang nilai p=0,001 (p<0,05). Kelompok perlakuan yang diberikan placebo dengan subyek peneltian berjumlah 38 orang nilai p=0,822. Peningkatan kadar vitamin D pada kedua kelompok terjadi dari asupan makanan sehari-hari dan paparan sinar matahari yang cukup. Perbedaan kenaikan kadar vitamin D antara kelompok intervensi dan pembanding disebabkan kelompok intervensi diberi perlakuan konsumsi vitamin D dosis IU per 2 (dua) minggu selama 2 bulan. Sedangkan pada kelompok pembanding tidak. Vitamin D2 dan D3 mengikuti jalur metabolism yang sama, sedangkan paparan sinat matahari dianggap sama karena berada dalam demografi dan iklim yang sama. Penelitian ini sejalan dengan penelitian diluar negeri (Gao dkk, 2010 dan Kelfie dkk, 2015), Pakistan (Junaid dkk, 2015) dan Inggris (Martineau, 2011) dimana kadar vitamin D kelompok yang diberi perlakuan vitamin D lebih tinggi dibandingkan placebo. Perbedaan kadar vitamin D terjadi akibat perbedaan paparan sinar matahari dan faktor asupan makanan yang berbeda. Penelitian lain di Indonesia yang dilakukan oleh Nursiyam dkk (2001) dan Siswanto dkk (2009), sejalan dengan penelitian ini dimana terdapat perbedaan bermakna kadar vitamin D pada kelompok intervensi dan placebo, dimana kelompok intervensi lebih tinggi. Vitamin D memiliki peranan penting dalam peningkatan produksi cathelicidine dan aktivitas makrofag dalam menghambat pertumbuhan kuman M. 53

18 tuberculosis. Kadar vitamin D pada setiap pasien TB paru akan berkurang karena digunakan untuk aktivitas sistem imun ini. Dari hasil penelitian ini status vitamin D sebelum dan sesudah pemberian sangat berbeda antara kelompok intervensi dan kelompok pembanding. Hal ini dapat dilihat pada tabel 4.2 dan tabel 4.3. Hal ini sejalan dengan penelitian yang sebelumnya melaporkan bahwa secara independen defisiensi vitamin D memiliki hubungan dengan kerentanan terhadap TB. Penelitian Junaid dkk, (2016) pada pasien TB di Pakistan melaporkan bahwa defisiensi vitamin D pada pasien TB terjadi karena aktivitas dalam melawan kuman TB dan secara independen berhubungan dengan kerentanan terhadap TB aktif Konversi sputum pasien TB paru Hasil penelitian ini diperoleh nilai rata-rata waktu konversi sputum subyek penelitian pada kelompok intervensi adalah (3,3 ± 1,7 minggu) sedangkan kelompok pembanding 4,6±1,5 minggu). Konversi sputum kelompok intervensi lebih cepat secara bermakna dibandingkan kelompok pembanding (p value 0,001) Hasil penelitian ini tidak berbeda jauh dengan penelitian yang dilakukan Coosens dkk (2012) di inggris dimana waktu konversi sputum pada kelompok intervensi 23 hari dan kelompok placebo 36 hari. Penelitian lain oleh Martineau dkk (2011) yang juga dilakukan di Inggris, ditemukan bahwa nilai tengah konversi sputum 36 hari pada kelompok intervensi dan 43,5 hari pada kelompok plasebo. Perbedaan waktu konversi pada kedua kelompok penelitian ini membuktikan vitamin D mempengaruhi kecepatan konversi sputum Zona pada Foto Toraks Pada penelitian ini ditemukan adanya perbaikan jika dilihat dari jumlah pengurangan zona yang sesuai dengan tabel 4.5. Pada penelitian Salahuddin (2012) dijumpai perbedaan zona yang terlibat setelah pengobatan 12 minggu, dimana rerata kelompok vitamin D yaitu 1,35±1,13, sedangkan kelompok placebo 1,82±1,35 dengan p value 0,004. Pada penelitian Martineau (2011) dari 126 pasien TB paru, dijumpai rerata zona yang terlibat sesudah pengobatan pada 54

19 kelompok vitamin D 2,3±1.29, dan kelompok placebo 2,28±1,18, p 0,062. Dibandingkan pada penelitian ini dengan penelitian sebelumnya, memang terdapat pengurangan zona sedikit lebih banyak pada grup intervensi disbanding grup placebo. Namun secara statistic tidak bermakna. Hal ini mungkin dapat menjadi alasan bahwa proses penyembuhan penderita tuberkulosis dapat dipengaruhi banyak faktor selain vitamin D, diantaranya faktor imunitas tubuh, virulensi kuman dan pada pola hidup atau kebiasaan (merokok dan alkohol) Perbaikan luas lesi pada foto toraks Berdasarkan luas lesi foto toraks, sesuai dengan tabel 4.5, terjadi pengurangan lesi dibanding saat awal. Setelah 2 bulan, kelompok vitamin D mengalami total perbaikan sebanyak 15 orang (39,4%) dan kelompok placebo 10 orang (26,31%). Secara statistik perbaikan luas lesi pada kedua grup tidak terlalu bermakna (p 0,222). Sesuai dengan penelitian yang dilakukan Martineau dkk (2011), berdasarkan pengurangan zona yang terlibat antara kedua kelompok, sesuai dengan keterangan sebelumnya tidak memiliki perbedaan yang bermakna (p0,062). Pada penelitian Siswanto dkk (2009), dari 43 pasien TB paru dijumpai perbedaan bermakna untuk perbaikan radiologis pada bulan pertama dimana kelompok vitamin D sebanyak 67% dan kelompok placebo 18%, p 0,02. Namun pada 2 bulan pengobatan, perbedaan perbaikan antara ke dua grup tidak bermakna. Dimana kelompok vitamin D 76% dan kelompok placebo 45%, p 0,06. Bila dibandingkan hasil perbaikan luas lesi foto toraks pada bulan kedua, maka penelitian ini sejalan dengan penelitian Siswanto dimana secara statistik hasil 2 bulan pengobatan tidak terlalu bermakna. Jika dilihat dengan seksama, hasil penelitian Siswanto sejalan dengan waktu konversi sputum pada penelitian yang ini dimana terjadi percepatan konversi dibawah 1 bulan, namun setelah 2 bulan tidak ada perbedaan antara grup vitamin D dan placebo. Seandainya pada penelitian ini juga melakukan pemeriksaan foto toraks pada bulan pertama, mungkin hasilnya tidak jauh berbeda. Namun jika dibandingkan dengan penelitian Salahuddin, hal ini mungkin terjadi karena perbedan pemberian dosis. Karena penelitian Salahuddin memberikan sebanyak IU dan penelitian ini hanya 55

20 IU. Sehingga dosis pada penelitian ini belum cukup memperbaiki keadaan radiologis pasien. Secara keseluruhan pada penelitian ini dianggap, pemberian vitamin D tidak mempengaruhi perbaikan foto toraks ada subjek penelitian dan secara tunggal foto toraks tidak bisa diajukan sebagai tanda kemajuan pengobatan pada pasien tuberkulosis paru. 56

21 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan 1. Kadar vitamin D pasien TB paru pada sebelum dan sesudah intervensi berbeda bermakna pada kelompok intervensi dengan rerata kenaikan 31,75 ng/dl. 2. Kadar vitamin D pasien TB paru pada sebelum dan sesudah intervensi berbeda bermakna pada kelompok pembanding dengan rerata kenaikan 7,46 ng/dl. 3. Kecepatan konversi sputum pasien TB lebih cepat secara bermakna (p=0,001) pada kelompok intervensi dengan rerata waktu 3,3±1,7 minggu dibandingkan dengan kelompok pembanding dengan rerata waktu 4,6±1,5 minggu. 4. Perbaikan secara radiologis dari pengurangan zona tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna antara kelompok intervensi (0,76±0,8) dan kelompok pembanding (0,55±0,6), dengan p value 0, Perbaikan secara radiologis dari luas lesi juga tidak menunjukkan perbedaan makna antara kelompok intervensi (39,4%) dan kelompok pembanding 26,31%, dengan p value 0, Saran Perlu penyusunan program untuk memberikan penyuluhan kemsyarakatan untuk meningkatkan konsumsi vitamin D pada pasien. 57