UJI BIOAKTIVITAS EKSTRAK KLOROFORM RHIZOPHORA APICULATA (MANGROVE) TERHADAP SPODOPTERA LITTURA FABR. SEBAGAI INSEKTISIDA NABATI

Transkripsi

1 UJI BIOAKTIVITAS EKSTRAK KLOROFORM RHIZOPHORA APICULATA (MANGROVE) TERHADAP SPODOPTERA LITTURA FABR. SEBAGAI INSEKTISIDA NABATI Ika Fatchur Rochmah dan Tukiran Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Surabaya, Jln. Ketintang, Surabaya, ABSTRAK Telah dilakukan penelitian untuk mengetahui bioaktivitas dari ekstrak kloroform kulit batang tumbuhan Rhizophora apiculata (EKRA) terhadap ulat grayak (Spodoptera Littura Fabr.) meliputi mortalitas, LC50. Pengujian bioaktivitas insektisida terhadap pertumbuhan ulat grayak menggunakan metode semprot dan celup agar diyakini terjadinya racun kontak atau racun perut. Konsentrasi ekstrak EKRA yang diujikan adalah K0= kontrol, K1= 200 mg/l, K2= 400 mg/l, K3= 800 mg/l, K4= 1600 mg/l, K5= 3200 mg/l, K6= 6400 mg/l dengan perlakuan diulang sebanyak 4 kali. Hasil dari persentase mortalitas ekstrak kloroform tersebut adalah 0%, 25 %, 26,7 %, 33,3 %, 36,7 %, 45 %, dan 55 %. Hasil analisis probit dari data tersebut diperoleh nilai LC 50 sebesar 4759,487 mg/l. Dengan demikian, ekstrak kulit batang tumbuhan Rhizophora apiculata (EKRA) dapat dijadikan alternatif bioinsektisida. Kata kunci: Bioaktivitas, Ekstrak kloroform, Rhizophora apiculata, Spodoptera littura Fabr. PENDAHULUAN Dalam upaya meningkatkan mutu dan produktivitas hasil pertanian, penggunaan pestisida untuk membasmi hama tanaman sering tak terhindarkan. Pestisida yang digunakan diharapkan dapat membantu petani dalam mendapatkan keuntungan yang maksimal. Namun, penggunaan pestisida dengan dosis besar dan dilakukan secara terus menerus akan menimbulkan beberapa kerugian, antara lain residu pestisida akan terakumulasi pada produk-produk pertanian, pencemaran pada lingkungan pertanian, penurunan produktivitas, keracunan pada hewan, dan keracunan pada manusia yang berdampak buruk terhadap C kesehatan. Dampak negatif lain dari penggunaan pestisida diantaranya adalah peningkatan daya tahan hama terhadap pestisida, pembengkakan biaya perawatan akibat tingginya harga pestisida dan penggunaan yang salah dapat mengakibatkan racun bagi lingkungan, manusia serta ternak (Maulana, 2010). Tingginya dampak negatif yang ditimbulkan oleh pestisida sintetis maka mendorong berbagai usaha untuk mengembangkan jenis pestisida nabati. Salah satunya yaitu jenis bioinsektisida baru. Bioinsektisida tersebut dapat diperoleh dari berbagai tumbuhan penghasil senyawa metabolit sekunder yang berfungsi sebagai penghasil racun. Jenis tumbuhan yang diketahui berpotensi sebagai sumber

2 bioinsektisida antara lain famili Meliaceae, Annonaceae, Piperaceae, Asteraceae, Zingiberaceae, Rutaceae dan Leguminosae (Hamdani, 2008). Adapun famili lain yang diduga sebagai penghasil racun bagi insektisida adalah jenis famili Rhizophoraceae. Bahan aktif senyawa metabolit sekunder yang telah ditemukan dalam studi fitokimia pada beberapa spesies mangrove di antaranya ditemukan senyawa seperti alkaloid, flavonoid, fenol, terpenoid, steroid, dan saponin. Golongan senyawa ini merupakan bahan obat-obatan modern (Eryanti et al., 1999). Kulit kayu mengandung tannin terutama pada famili Rhizophoraceae. Tumbuhan ini merupakan jenis bakau sejati yang tumbuh di hutan pasang surut, serta tampak sepanjang pantai. Tumbuhan mangrove famili ini kaya akan senyawa steroid, saponin, dan flavonoid (Anonim, 2009). Pada penelitian sebelumnya telah dilakukan penelitian tentang potensi berbagai tumbuhan penghasil racun bagi insektisida di antaranya adalah telah diisolasi 5 alkohol alifatik berantai panjang, 11 asam karboksilat jenuh alifatik berantai panjang, dan 3 steroid yaitu 2,6- dimethoxy-p-benzoquinone, syringaldehid, dan sitosteryl 3- glukosida dari bagian tengah kayu Rhizophora apiculata (Kokpol, U. et.al., 1993). Selanjutnya diuji bioaktivitasnya untuk antifeedant terhadap kumbang tumbuhan kapas, anti jamur, dan anti mikroba. Sementara itu, Senyawa 2,6- dimethoxy-p-benzoquinone adalah satu-satunya senyawa yang memperlihatkan aktivitasnya. Hal ini menunjukkan bahwa senyawa ini C aktif melawan jamur, bakteri, dan kumbang tumbuhan kapas. Golongan senyawa steroid pertama telah diidentifikasi sebagai 2,6-dimethoxy-p-benzoquinone dengan membandingkan data spektra dan sifat kimianya terhadap literatur. Senyawa ini juga menunjukkan aktivitas anti bakteri melawan X. campestris sebesar 64% dan aktivitas antifeedant terhadap kumbang tumbuhan kapas sebesar 89% pada dosis 6 mg (Kokpol, U. et.al., 1993). Golongan senyawa steroid kedua telah diidentifikasi sebagai syringaldehyde dengan membandingkan data spektra dan sifat kimia terhadap literature. Senyawa syringaldehyde ini menunjukkan aktivitas anti jamur melawan H. teres sebesar 80%. Sedangkan, senyawa steroid terakhir yaitu, sitosteryl 3-O-βglucopyranoside telah diidentifikasi dengan co-tlc dan dicampur dengan penanda asli dan perbandingan dari spektra 1 H dan 13 C NMR juga data fisik lainnya yang sesuai dengan literatur (Kokpol, U. et.al., 1993). Beberapa tumbuhan bakau genus Rhizophoraceae telah dilakukan uji terhadap daya toksisitas terhadap larva suatu serangga diantaranya adalah Brugueira cylindrica, Ceriops decandra, Rhizophora apiculata, Rhizophora lamarckii, dan Rhizophora mucronata. Dari tanaman-tanaman tersebut, ekstrak petroleum ether dari tanaman Rhizophora apiculata yang paling efektif terhadap larva nyamuk Culex quinquefasciatus dengan nilai LC 50 sebesar 25,7 mg/l (Thangam & Kathiresan, 1997). Berdasarkan hasil penelitian tentang senyawa metabolit sekunder

3 yang terkandung di dalam tumbuhan Rhizophora apiculata sebagai sumber bioinsektisida maka akan dilakukan uji bioaktivitas ekstrak untuk mengetahui efektivitas dari ekstrak Rhizophora apiculata terhadap Spodoptera littura Fabr. sebagai sumber bioinsektisida baru. METODE PENELITIAN Alat: Alat-alat yang digunakan dalam proses ekstraksi adalah seperangkat alat ekstraksi secara maserasi meliputi, vacuum rotary evaporator, water bath. Sementara itu, peralatan yang digunakan pada pengujian bioinsektisida meliputi: toples plastik (berdiameter 15 cm, tinggi 15 cm) sebanyak 28 buah, kain kasa 20 x 20 cm, tutup toples, menara semprot potter, gelas ukur, labu ukur, cawan petri, pipet, kuas halus, timbangan analitik, kertas tissue, botol, spatula dan lain-lain. Bahan: Bahan penelitian yang digunakan adalah kulit batang tumbuhan Rhizophora apiculata dan untuk ekstraksi pelarut yang digunakan adalah pelarut kloroform p.a. Sementara bahan-bahan yang digunakan untuk pengujian bioinsektisida meliputi daun jarak kepyar yang segar, bahan bioaktif (ekstrak kloroform) sebanyak 1,6 g dari kulit batang tumbuhan Rhizophora apiculata, bahan pengemulsi (tween 80), aquades, larutan uji EKPK (0, 200, 400, 800, 1600, 3200 dan 6400) mg/l dan serangga uji sebanyak 420 ekor yang berasal dari perbanyakan di laboratorium hama dan penyakit tanaman BALITTAS Karang Ploso Malang, Jawa Timur. Untuk keperluan pengujian digunakan larva instar II. Metode: Sampel tumbuhan bakau minyak (Rhizophora apiculata) diperoleh dari daerah Osowilangun, Gresik, Jawa Timur. Sebelum diteliti, terlebih dahulu diidentifikasi ke LIPI UPT Balai Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Purwodadi, Pasuruan, Jawa Timur. Tumbuhan tersebut selanjutnya dibersihkan dari kotoran yang melekat, lalu dikeringkan tanpa penyinaran matahari secara langsung dengan cara diangin-anginkan untuk mengurangi penguapan yang mengikutkan senyawa yang terkandung didalamnya, sehingga diperoleh ±5 kg sampel tumbuhan bakau minyak (Rhizophora apiculata) kering, kemudian digiling hingga berbentuk serbuk kering kulit batang tumbuhan bakau minyak (Rhizophora apiculata) seberat 10 Kg. Serangga uji yang digunakan pada penelitian ini berasal dari hasil perbanyakan di Laboratorium Hama dan penyakit tanaman di Balai Penelitian Tanaman Tembakau dan Serat (BALITTAS) Karang Ploso Malang, Jawa Timur. Untuk keperluan pengujian digunakan larva instar II karena praktis dan lebih mudah ditangani serta aktivitas makannya jelas terlihat. Jarak kepyar yang digunakan berasal dari BALITTAS Karang Ploso Malang, untuk keperluan uji yang bertujuan untuk menstabilkan hidup dari ulat grayak yang diamati. C - 116

4 Pembuatan ekstrak EKRA dimulai dengan melakukan maserasi terhadap serbuk kering kulit batang tumbuhan Rhizophora apiculata yang ditimbang seberat 3 Kg dengan pelarut kloroform ± 1 cm diatas sampel selama 24 jam. Filtrat hasil tiap maserasi kemudian diuapkan dengan vacuum rotary evaporator untuk memperoleh ekstrak dan hasilnya ditimbang untuk mengetahui berat ekstrak EKRA. Selanjutnya residu dikeringkan kembali dengan cara dianginanginkan untuk dimaserasi kembali dengan kloroform p.a ± 1 cm diatas sampel selama 24 jam dan diulang sebanyak 3 kali hingga diperoleh berat ekstrak EKRA seberat 1,6 g untuk keperluan uji bioaktivitas ekstrak. Pembuatan larutan uji ekstrak EKRA dengan cara membuat larutan induk terlebih dahulu dengan konsentrasi larutan induk sebesar 6400 mg/l, yaitu dengan cara 1,6 g EKRA dituang ke dalam gelas kimia, lalu ditambahkan beberapa tetes tween 80 sebagai emulsifier (bahan pengemulsi, karena ekstrak tidak dapat larut dalam air), kemudian ditambah dengan aquades sedikit demi sedikit (sebagai bahan pembawa pada water based formulation) dan diaduk hingga homogen. Kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 250 ml. Membuat larutan uji ekstrak EKRA dengan metode deret ukur pada variasi konsentrasi 0; 200; 400; 800; 1600; 3200; dan 6400 mg/l. Untuk mendapatkan variasi konsentrasi larutan uji EKRA: 0; 200; 400; 800; 1600; 3200; dan 6400 mg/l, dilakukan dengan cara mengambil 0; 3,13; 6,25; 12,50; 25,00; dan 50,00 ml dari larutan induk 6400 mg/l kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, ditambahkan sedikit aquades, larutan dikocok hingga menjadi homogen dan ditambahkan dengan aquades hingga tanda batas. Disisi lain, menyiapkan 1 lembar daun jarak kepyar dengan ukuran yang telah disesuaikan dengan wadah uji, disemprot dengan menggunakan menara potter pada masing-masing larutan uji hingga membasahi seluruh permukaan daun. Mengangin-anginkan di udara terbuka daun jarak kepyar yang sudah disemprot hingga seluruh permukaannya kering. Memasukkan daun jarak kepyar yang sudah diangin-anginkan ke dalam toples plastik. Kemudian memasukkan 15 ekor ulat grayak instar II ke dalam cawan petri dan disemprot dengan menara potter untuk setiap konsentrasi uji. Memasukkan ulat grayak ke dalam toples plastik yang telah berisi daun jarak kepyar. Menutup toples plastik dengan menggunakan kain kasa dan tutup toples yang telah di lubangi tengahnya. Melakukan pengamatan pada selang waktu 24 jam selama 3 hari setelah pemberian perlakuan daun jarak kepyar dengan variasi konsentrasi larutan uji untuk menghitung jumlah ulat grayak yang mati. Melakukan pengulangan sebanyak 4 kali dan banyaknya ulangan mengikuti kaidah sebagai berikut: (p-1) (u-1) > 15, dengan u > 4 p = Jumlah perlakuan u = Jumlah ulangan C - 117

5 Menghitung tingkat mortalitas dapat dinyatakan dengan presentase mortalitas sebagai berikut: Mortalitas median (LC 50 ) pada uji bioaktivitas, dihitung dengan analisis Probit menggunakan Program Minitab for Windows Version 13. Hasil analisis ini akan diperoleh nilai LC 50 untuk masingmasing bahan bioaktif insektisida yang paling efektif atau kuat pengaruhnya terhadap serangga uji ulat grayak (Herminto, et al., 2004). HASIL DAN PEMBAHASAN P = Presentase mortalitas X = Jumlah larva yang mati Y = Jumlah larva yang diamati Pengamatan uji bioaktivitas ekstrak dilakukan setelah selang waktu 24 jam selama 3 hsp. Data pengamatan hasil uji bioaktivitas yang diperoleh menunjukkan jumlah kematian larva seperti yang terlihat pada tabel 1. Larva tersebut dikatakan mati apabila disentuh tidak memberikan respon berupa gerakan atau tanda kehidupan. Tabel 1. Pengaruh Konsentrasi EKRA terhadap Jumlah Ulat Mati Hingga 3 hsp Konsentrasi Jumlah Total Jumlah Ulat Mati (mg/l) Ulat (N) 24 jam 48 jam 72 jam EKRA dengan konsentrasi yang berbeda menyebabkan mortalitas ulat grayak yang bervariasi. Pengaruh konsentrasi C EKRA terhadap persentase mortalitas ulat grayak ditunjukkan pada tabel 2 berikut. Tabel 2. Pengaruh Konsentrasi EKRA terhadap % Mortalitas Ulat Grayak Hingga 3 hsp Konsentrasi Jumlah Total % Mortalitas (mg/l) Ulat (N) 24 jam 48 jam 72 jam ,00 0,00 0, ,00 18,33 25, ,66 21,67 26, ,00 25,00 33, ,67 25,00 36, ,33 28,33 45, ,00 36,66 55,00

6 Pada tabel 2 di atas terlihat bahwa peningkatan konsentrasi EKRA dapat menyebabkan peningkatan mortalitas pada larva ulat grayak. Data pengamatan yang dihasilkan pada tabel 2 selanjutnya digunakan untuk menganalisis pengaruh konsentrasi EKRA terhadap mortalitas ulat grayak pada 3 hsp seperti tampak pada Gambar 2 berikut. Gambar 2. Hubungan Antara Konsentrasi EKRA dengan Mortalitas Ulat Grayak Gambar 2 diatas memperlihatkan hubungan antara pengaruh konsentrasi EKRA terhadap mortalitas ulat grayak. Pada Gambar 2 terlihat bahwa pola hubungan antara konsentrasi dan mortalitas ulat grayak adalah nyata, yang menyatakan bahwa konsentrasi EKRA yang semakin tinggi menyebabkan terjadinya mortalitas ulat grayak yang semakin tinggi secara nyata. Hal ini dapat dilihat dari nilai koefisien determinasi (R 2 = 0,6741). Data pengamatan yang dihasilkan pada tabel 1 selanjutnya digunakan untuk menghitung nilai mortalitas median (LC 50 ) dari EKRA untuk 1-3 hsp, dimana hasil grafik analisis probit terlihat seperti Gambar 3, 4, dan 5 berikut. C - 119

7 Gambar 3. Model Regresi Linier Probit Uji Bioaktivitas EKRA 1 hsp Gambar 4. Model Regresi Linier Probit Uji Bioaktivitas EKRA 2 hsp Gambar 5. Model Regresi Linier Probit Uji Bioaktivitas EKRA 3 hsp Berdasarkan ketiga standar deviasi. Berdasarkan gambar grafik di atas, dapat grafik analisis probit dari larutan dijelaskan bahwa pemilihan uji EKRA untuk 1-3 hsp konsentrasi untuk mematikan ulat grayak sudah benar karena tanda titik yang berada dalam diperoleh persamaan linearitas dan nilai LC 50 seperti tampak pada tabel 3 berikut. gambar tidak melewati garis Tabel 3. Persamaan Linearitas dan Nilai LC 50 Hsp Persamaan Linear LC 50 (mg/l) 1 y = 3, , x y = 3, , x y = 4, , x C - 120

8 Nilai y merupakan nilai tetapan transformasi dari persentase menjadi probit, dan x merupakan konsentrasi yang dibutuhkan untuk mematikan ulat grayak pada persentase tertentu. Persamaan tersebut diperoleh dari tabel regresi pada hasil analisis (Lampiran 1), dimana persamaan dasar probit yaitu y = (a+5) + bx, nilai a diperoleh dari koefisien konstanta probit dan nilai b diperoleh dari koefisien konsentrasi larutan. Analisis data dilakukan dengan menggunakan analisis probit dengan menggunakan program Minitab 13 for windows. Analisis probit digunakan dalam pengujian biologis untuk mengetahui respon subyek yang diteliti oleh adanya stimulasi dalam hal ini insektisida dengan mengetahui respon berupa mortalitas (Umniyati, 1990). Pendugaan nilai toksisitas insektisida terhadap serangga hama diukur dengan nilai LC 50, yaitu suatu konsentrasi atau dosis yang dapat menyebabkan kematian 50% serangga hama yang diuji (Moekasan, 1993). Dari hasil analisis probit, nilai LC 50 pada tabel 1 dapat dilihat bahwa dengan lama pemaparan yang berbeda akan menghasilkan nilai LC 50 yang berbeda pula. Lama pemaparan yang paling efektif digunakan adalah 3 hsp dengan nilai LC 50 yang kecil sebesar 4759,478 mg/l dan persentase mortalitas yang besar yaitu 55,00 %. Menurut Mumford dan Norton (1984 dalam Laba dan Soekarno), suatu insektisida dikatakan efektif apabila mampu mematikan minimal 80% serangga uji (untuk insektisida sintetik). EKRA merupakan insektisida nabati yang daya kerjanya lebih lambat dibandingkan insektisida sintetik sehingga walaupun tingkat kematian populasi hewan uji belum mencapai 80% pada 3 hsp, namun EKRA dapat dikatakan efektif pada tingkat mortalitas 50%. Jadi, EKRA dapat dikatakan efektif karena pada konsentrasi 4759,487 mg/l dapat mematikan ulat grayak sebesar 50%. Pada pengamatan secara visual terhadap perilaku makan dan gerak ulat grayak nampak berbeda dengan kontrol. Pada masing-masing perlakuan EKRA terhadap ulat grayak mengalami gejala keracunan yang ditandai dengan kehilangan kegesitan, aktivitas makan menurun (antifeedant), warna tubuh menjadi coklat kehitaman, dan akhirnya ulat grayak mati dengan tubuh mengering seperti yang terlihat pada Gambar 6. C - 121

9 Gambar 6. Larva yang Mati Akibat Perlakuan EKRA Gejala keracunan diduga karena terganggunya sistem syaraf dan sistem metabolisme yang disebabkan adanya senyawa-senyawa kimia pada EKRA. Hasil penelitian ini juga diperkuat oleh Hoesain (1995), yang menyebutkan bahwa sifat serangga yang menolak makan dapat disebabkan senyawa penganggu proses fisiologi yang terjadi pada sel reseptor kimiawi. Weinzierl (1991), menambahkan bahwa salah satu Tabel 4. Nilai LC 50 untuk EKRA Lama Pengamatan LC 50 (mg/l) (jam) Hubungan antara LC 50 dengan klasifikasi toksisitas relatif suatu zat kimia dinyatakan dalam kategori toksisitas, sebagaimana tercantum pada Tabel 5. Berdasarkan Tabel 5 di atas, maka dapat dikatakan bahwa EKRA bersifat toksik sedang karena keuntungan insektisida nabati adalah cara kerjanya yang cepat dalam menghentikan proses makan serangga walaupun tidak menyebabkan kematian dalam beberapa jam atau hari. Namun dengan segera menyebabkan kelumpuhan atau penghentian aktivitas makan. Nilai LC 50 yang diperoleh dari analisis probit untuk uji bioaktivitas insektisida pada EKRA dapat dilihat pada Tabel 4. Tabel 5. Hubungan antara LC 50 dengan kategori toksisitas Kategori LC 50 Supertoksik 5 mg/kg Sangat toksik 5-50 mg/kg Toksik mg/kg Toksik sedang 0,5-5 g/kg Toksik ringan 5-15 g/kg Praktis tidak > 15 g/kg toksik (Sumber: Lu, Frank (1995)) mempunyai nilai LC 50 sebesar 4759,487 mg/l. SIMPULAN Berdasarkan data dan analisis diatas dapat disimpulkan beberapa hal, sebagai berikut: C - 122

10 1. Pada Konsentrasi K0= 0 mg/l, K1= 200 mg/l, K2= 400 mg/l, K3= 800 mg/l, K4= 1600 mg/l, K5= 3200 mg/l, K6= 6400 mg/l diperoleh presentase mortalitas berturut-turut adalah 0,00; 25,00 ;26,67 ;33,33 ;36,66 ;45,00 ;55,00 % (R 2 = 0,6741) 2. Berdasarkan hasil analisis probit minitab 13, uji bioaktivitas insektisida EKRA memberikan nilai LC 50 sebesar 4759,487 mg/l 3. Berdasarkan tabel dan diagram hubungan konsentrasi zat bioaktif dengan mortalitas ulat grayak di atas tersebut, diketahui bahwa insektisida EKRA semakin efektif untuk waktu pemaparan yang lebih lama. DAFTAR PUSTAKA Anonim. 2009a. Kandungan Senyawa Kimia Mangrove Berpotensi Sebagai Obat (Online),( rita.com/sains/kandungan_s enyawa_kimia_mangrove_b erpotensi_sebagai_obat, diakses pada tanggal 4 Maret 2011). Dwi, Septina Rahayu dan Tukiran Formulasi Bioinsektisida dan Uji Efikasi Semi Lapang untuk Pengelolaan Hama Tanaman Sawi dalam upaya Mengurangi Penggunaan Sintetik. Makalah yang Disampaikan pada Seminar Nasional Kimia Unesa Surabaya 20 Februari Eryanti Identifikasi dan isolasi senyawa kimia dari Mangrove (hutan Bakau). Laporan Hasil Penelitian Pusat Penelitian Kawasan Pantai dan Perairan Universitas Riau. 18 hal. C Fessenden, Ralp J, & Joan S. Fessenden Organic Chemistry. California: Wadsworth, Inc., Belmont. Hamdani, Selamatkan Tanaman dengan Insektisida Nabati. Lampung Post. t.com/cetak/cetak.php?id= (diakses pada tanggal 25 Desember 2011). Khopkar, S. M Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: UI- Press. Kusmana, cecep, onrizal & sudarmadji Jenis-Jenis Pohon Mangrove di Teluk Bintuni, Papua. (Online), ( dpress.com /2008/10/mangrovebintuni.pd f, diakses pada tanggal 18 Juli 2011) Kokpol, U. et.al., Long Chain Aliphatic Alcohols and Saturated Carboxylic Acids from Heartwood of Rhizophora apiculata. Phytochemistry, Vol. 33, No. 5, pp Lu, Frank. C., 1995, Toksikologi Dasar (Asas, Organ sasaran dan Penilaian risiko), Jakarta: Universitas Indonesia. Marliana, S. D., Suryanti, V., dan Suyono, Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (Sechium edule Jacq. Swartz.) dalam Ekstrak Etanol. Surakarta: Jurusan Kimia FMIPA Universitas Sebelas Maret. Maulana, Awal (Online), Pertanian Organik (Pestisida

11 Nabati). m/journal/item/24/pertanian_ Organik_Pestis-ida_Nabati, diakses pada tanggal 1 April Suyani, H Kimia dan Sumber Daya Alam. Padang: Pusat Penelitian Universitas Andalas. Utami, Maya Pengembangan Formula Insektisida Nabati Dari Bahan Aktif Ekstrak Metanol Kulit Batang Tumbuhan Pacar Cina (Aglalia odorata Lour.). Skripsi yang tidak dipublikasikan. Surabaya: FMIPA UNESA. C - 124