BAB III METODE PENELITIAN. 1. Tempat: Penelitian dilakukan di Green House Kebun Biologi, Fakultas. 2. Waktu: Bulan Desember Februari 2017.

Transkripsi

1 BAB III METODE PENELITIAN A. Tempat dan Waktu Penelitian 1. Tempat: Penelitian dilakukan di Green House Kebun Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Yogyakarta. 2. Waktu: Bulan Desember Februari B. Bahan dan Alat 1. Bahan - Daun mara tunggal - Hama Spodoptera litura - Air kran - Biji sawi - Pupuk Kandang - Tanah - Alkohol 90 % - Pestisida Sintetik nama dagang Dusband 2. Alat - Blender - Gelas ukur - Saringan - Kuas kecil - Toples 31

2 - Handsprayer - Pollybag - Pipet tetes - Kain kasa - Ember - Kelambu - Erlenmeyer C. Variabel Penelitian 1. Uji Pendahuluan a. Variabel bebas: Dosis ekstrak daun mara tunggal konsentrasi 0 %, 5 %, 10 %, 15 %, dan 20 %. Berdasarkan perlakuan pemberian ekstrak daun mara tunggal pada larva Spodoptera litura diperoleh hasil uji pendahuluan mortalitas larva sebagai berikut. Tabel 1. Mortalitas Hama Spodoptera litura Setelah Penyemprotan Ekstrak Daun Mara Tunggal dengan Berbagai Konsentrasi. Konsentrasi Pengamatan Ulangan Jumlah % H H % H H % H H % H H % H H Keterangan: H2: Hari ke dua setelah penyemprotan bioinsektida pertama H4: Hari ke dua setelah penyemprotan bioinsektisida ke dua 32

3 Berdasarkan hasil pengamatan uji pendahuluan, diketahui bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun mara tunggal, maka semakin tinggi tingkat mortalitas larva. Mortalitas larva tertinggi terdapat pada perlakuan dosis 20 %, yaitu mematikan 23 ekor larva. Berdasarkan hasil tersebut, maka dosis 20 % dijadikan acuan untuk dosis uji sesungguhnya, yaitu dosis di bawah 20 % dan di atas 20 %. 2. Uji Sesungguhnya a. Variabel bebas: Dosis ekstrak daun mara tunggal konsentrasi 0 %, 17,5 %, 20 %, 22,5 %, dan Pestisida Sintetik. b. Variabel terikat: 1. Mortalitas hama Spodoptera litura. 2. Jumlah larva instar III Spodoptera litura yang menjadi pupa. 3. Tingkat kerusakan tanaman sawi (Brassica juncea L). 4. Berat basah tanaman sawi (Brassica juncea L). 3. Variabel kontrol: metode pengekstrakan daun, media tanam, jenis sawi, umur pembibitan sawi, umur hama Spodoptera litura. D. Rancangan Penelitian Rancangan penelitian ini disusun menurut Rancangan Penelitian Eksperimen yang terdiri dari empat perlakuan dosis dengan lima pengulangan pada setiap perlakuan dengan menggunakan ekstrak daun mara 33

4 tunggal sebagai bioinsektisida pada masing-masing hama uji, yaitu hama Spodoptera litura. Pembuatan ekstrak daun mara tunggal sebanyak 100 gr dihaluskan lalu dilarutkan dengan 100 ml air, ditambah 1 ml alkohol 90 % lalu diperas kemudian didiamkan selama 24 jam. Dengan perlakuan: M0 = perlakuan kontrol M1 = ekstrak 17,5 % ( 17,5 ml ekstrak starter + 82,5 ml air) M2 = ekstrak 20 % ( 20 ml ekstrak starter + 80 ml air) M3 = ekstrak 22,5 % ( 22,5 ml ekstrak starter + 77,5 ml air) M4 = Pestisida sintetik 0,0025 % ( 0,5 ml Pestisida sintetik Dursband ml air) Berikut adalah layout peletakkan pot tanaman sawi pada penelitian. Keterangan : = Dosis Ekstrak daun mara tunggal 17,5 % = Dosis Ekstrak daun mara tunggal 20 % = Dosis Ekstrak daun mara tunggal 22,5% = Kontrol = Pestisida kimia sintetik 34

5 E. Prosedur Kerja 1. Penyemaian Bibit Sawi Bibit sawi yang akan ditanam sebelumnya direndam selama 24 jam. Bibit sawi yang digunakan adalah bibit yang tenggelam. Persemaian bibit sawi menggunakan media berupa pasir halus dengan ketebalan 3-4 cm. Biji sawi yang telah terpilih ditaburkan di atas media. Selanjutnya ditutupi kembali dengan media tipis-tipis sekitar 0,5 cm. Jarak penaburan agak renggang. Dilakukan penyiraman setiap hari hingga media terbasahi. Penyiraman dilakukan satu kali yaitu pukul WIB. Penyemaian dilakukan selama 14 hari. 2. Persiapan Media Tanam Dalam penelitian ini, media tanam yang digunakan adalah media tanam tanah dan pupuk kompos yang berasal dari pupuk kandang. Perbandingan tanah dengan pupuk kompos adalah 2:1. Media tanah digunakan untuk menjadikan kondisi yang memenuhi pertumbuhan tanaman sawi. Kompos pupuk kandang memiliki kandungan unsur hara seperti natrium, kalium, phosphor, dan juga mikroorganisme yang mampu memecah bahan organik. 3. Penanaman dan Pemeliharaan Tanaman Sawi Benih yang telah disemai yang berumur 10 hari atau yang memiliki 3-4 helai daun dipilih. Tanaman sawi harus sehat, tidak terinfeksi hama/penyakit memiliki daun yang berwarna hijau, segar. Kemudian dipindahkan ke dalam polybag yang berjumlah 36 buah. Masing-masing 35

6 polybag berisi satu tanaman sawi. Sementara untuk penyiraman air dilakukan 1 kali sehari. Penyiangan dari gulma/ hama dilakukan secara manual. 4. Pengumpulan Hama Spodoptera litura Larva Spodoptera litura diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman Pemanis dan Serat Malang. Hama Spodoptera litura yang diperoleh adalah hama instar I yang menetas kemudian diaklimatisasi dan dipelihara selama 5 hari agar menjadi larva instar III yang memiliki ciri warna hijau kehitaman pada bagian abdomen, pada abdomen terdapat garis hitam melintang. Hama tersebut diberi makan caisim segar dan daun cabai segar dan ditutup dengan kasa. 5. Pelepasan Hama Spodoptera litura Pelepasan hama dilakukan pada saat sawi berumur 21 HST. Setiap tanaman sawi diinfeksikan 5 ekor hama Spodoptera litura. Penginfeksian hama dilakukan pada sore hari. 6. Pembuatan Ekstrak Daun Mara Tunggal (Clausena excavate Burm F.) Daun mara tunggal segar ditimbang sebanyak 100 gram kemudian dihaluskan/diblender dengan 100 ml air kran ditambah 1 ml alcohol 90 %. Campuran tersebut kemudian didiamkan selama 24 jam untuk menghasilkan produk ekstrak, lalu disaring dengan saringan yang dilapisi dengan kain kasa berlapis. Campuran tersebut dijadikan sebagai starter ekstrak daun mara tunggal. 36

7 Untuk mendapatkan ekstraksi yang menyeluruh dan mendapatkan senyawa-senyawa yang mempunyai aktivitas farmakologi maka pemilihan pelarut yang digunakan untuk mengekstraksi merupakan faktor yang penting. Pelarut ideal yang sering digunakan adalah alkohol atau campurannya dengan air karena merupakan pelarut pengekstraksi yang terbaik untuk hampir semua senyawa dengan berat molekul rendah seperti saponin dan flavonoid (Wijesekera, 1991; Arifianti, 2014). Daun mara tunggal yang sudah diblender kemudian direndam selama 24 jam. Pada perendaman sampel tumbuhan akan terjadi pemecahan dinding dan membran sel akibat perbedaan tekanan antara di dalam dan di luar sel, sehingga metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut. Pelarut yang mengalir ke dalam sel dapat menyebabkan protoplasma membengkak dan bahan kandungan sel akan larut sesuai dengan kelarutannya. Lamanya waktu ekstraksi menyebabkan terjadinya kontak antara sampel dan pelarut lebih intensif sehingga hasilnya juga bertambah sampai titik jenuh larutan. Kontak antara sampel dan pelarut dapat ditingkatkan apabila didukung dengan adanya pengocokan agar kontak antara sampel dan pelarut semakin sering terjadi, sehingga proses ekstraksi lebih sempurna (Kristiani, 2014). Perhitungan pembuatan dosis ekstrak insektisida nabati menggunakan rumus: V1 M1 = V2 M2 keterangan: V1 = Volume ekstrak daun mara tunggal konsentrasi 100 % 37

8 Pembuatan ekstrak 20 %, maka: V1 = V2 M1 M2 VI = % 100 % V1 = 100 x 20 % 100 % V1 = 20 ml V2 = Volume air M1= Konsentrasi ekstrak daun mara tunggal yang akan dibuat M2 = Konsentrasi ekstrak daun mara tunggal 100 % Pembuatan dosis ekstrak daun mara tunggal konsentrasi 20 % adalah campuran 20 ml ekstrak + 80 ml air. Pembuatan variasi konsentrasi ekstrak Ekstrak daun mara tunggal (Clausena excavata Burm F.) dengan tiga dosis yaitu: a. Ekstrak daun mara tunggal (Clausena excavata Burm F.) 17,5 % (17,5 ml ekstrak starter daun mara tunggal dicampur dengan 87,5 ml air). b. Ekstrak daun mara tunggal (Clausena excavata Burm F.) 20 % (20 ml ekstrak starter daun mara tunggal dicampur dengan 80 ml air). c. Ekstrak daun mara tunggal (Clausena excavata Burm F.) 22,5 % (22,5 ml ekstrak starter daun mara tunggal dicampur dengan 77,5 ml air). 38

9 7. Aplikasi perlakuan Aplikasi dilakukan setelah satu hari hama diinfeksikan. Aplikasi penyemprotan menggunakan handsprayer dengan volume 40 ml setiap tanaman dan waktu penyemrotan dilakukan pada sore hari pukul WIB. Penyemprotan diaplikasikan pada daun, batang, tanah dan dilakukan pada waktu sore hari karena larva Spodoptera litura aktif makan pada saat malam hari. Penyemprotan dilakukan setiap 2 hari sekali. Selain itu, peneliti menggunakan insekisida kima untuk mengetahui perbandingan dengan insektisida nabati dengan dosis sesuai anjuran pakai yakni 0,0025 %. 8. Pengamatan a. Persentase Mortalitas Larva Spodoptera litura Larva yang mati adalah larva yang tidak bergerak lagi. Pengamatan dilakukan 1 hari setelah penyemprotan. Penyemprotan dilakukan sebanyak 2 hari sekali. Persentase mortalitas dihitung dengan rumus: M = a x 100 N Keterangan: M = Prosentase Mortalitas a = Jumlah hama yang mati N = Jumlah hama yang diinfeksikan b. Persentase Larva instar III Spodoptera litura yang Menjadi Pupa Persentase larva yang menjadi pupa dihitung dengan menggunakan rumus: P = p x 100 % N 39

10 Keterangan: P = Presentase Pupa p = Jumlah larva Instar III yang menjadi pupa N = Jumlah hama yang diinfeksikan. F. Analisis Data Analisis data menggunakan analisis Homogenitas dan Normalitas lalu dilanjutkan Uji One Way Anova (Analysis of Variance) untuk mengetahui pengaruh perlakuan. Apabila hasil uji ANOVA menunjukkan hasil signifikan atau beda nyata maka akan dilanjutkan dengan uji DMRT (Duncan Multiple Range Test) dengan taraf 5 % untuk mengetahui perbedaan antar masingmasing perlakuan (Suhandoyo, 2010:6). 40