VALIDASI PENETAPAN KADAR BETAMETASON DAN DEKSKLORFENIRAMIN MALEAT MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGISERTA APLIKASINYA DALAM BEBERAPA SEDIAAN SIRUP SKRIPSI Oleh : Septi Ayu Dianti 125010788 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS WAHID HASYIM SEMARANG 2017
SKRIPSI VALIDASI PENETAPAN KADAR BETAMETASON DAN DEKSKLORFENIRAMIN MALEAT MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI SERTA APLIKASINYA DALAM BEBERAPA SEDIAAN SIRUP Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam mencapai Derajat Sarjana Farmasi Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang Oleh: Septi Ayu Dianti 125010788 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS WAHID HASYIM SEMARANG 2017 i
ii
SURAT PERNYATAAN Yang bertanda tangan di bawah ini : Nama : Septi Ayu Dianti NIM : 125010788 Judul Skripsi : Validasi Metode Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Menggunkan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi serta Aplikasinya dalam Beberapa Sediaan Sirup. Menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis digunakan sebagai acuan dalam naskah dan disebutkan dalam pustaka. Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk dapat digunakan sebagaimana mestinya. Semarang, Januari 2017 Septi Ayu Dianti iii
KATA PENGANTAR Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, karena berkat rahmat, hidayah dan karunia-nya maka penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan judul: Validasi Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Serta Aplikasinya dalam Beberapa Sediaan Sirup. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam menempuh ujian Sarjana Farmasi Universitas Wahid Hasyim, sholawat serta salam semoga tercurahkan kepada junjungan kita Rosulullah Muhammad bin Abdullah hingga akhir zaman. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih banyak terdapat kekurangan dan masih jauh dari kesempurnaan, hal ini dikarenakan keterbatasan kemampuan yang penulis miliki. Selama menyelesaikan penyusunan skripsi penulis telah banyak bantuan dari berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung. Untuk itu, dengan segala kerendahan hati, penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada semua pihak yang turut membantu, khususnya : 1. Ibu Aqnes Budiarti, S.F., M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi dan pembimbing yang telah sabar bersedia membimbing, mengarahkan, meluangkan waktu, tenaga dan pikiran untuk memberikan bimbingan dan pengarahan dalam penyusunan skripsi ini 2. Bapak Dr. Sumantri M.Sc., Apt. dan Ibu Maria Ulfah, S.Farm., M.Sc., Apt selaku penguji skripsi atas saran, masukan dan koreksi terhadap skripsi ini. 3. Dosen-dosen Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang yang telah memberikan bekal ilmu pengetahuan sebagai dasar penulisan skripsi ini. iv
4. Pimpinan dan staf Laboratorium Kimia Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang yang telah membantu pelaksanaan penelitian ini. 5. PT. Phapros yang telah memberikan bantuan bahan untuk penelitian ini. 6. Bapak dan Ibu serta saudaraku atas limpahan doa, kasih sayang, doa serta dorongan moril maupun materil yang tak terhingga. 7. Teman-teman seperjuangan dalam mengeban skripsi ini Nur Aini, Ira afifah dan Tri Wahyuni Lestari, terimakasih atas cinta kasih kesabaran dalam menyusun skripsi. 8. Kakak-kakakku dan adikku tercinta Anik Mulyani, Rustanto, Arun Tri Ariyanto dan semua keponakanku yang lucu terima kasih atas doa dan dukungannya. 9. Sahabatku Nurul, vivi, Nettu, Devvianty, Nilam terimakasih atas doa dan dukungannya. 10. Keluarga besar terkasih Risma JT Nurotus sobikhah, Dira, Riva, Hidayah, Minaa, Mujahidin, Ali Imron, Shopi megawati, Adip, ikhsan, mas Aniez, mbak maya, mas Yekti, mas Didik, mbak Safira, Mas lambang, Nanang, Irul, dias, nurul, Uti, mak vera dan teman teman. Terimakasih memberikan kehangatan, semangat, support, doa, waktu, tenaga, pikiran, dan kasih sayang kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. 11. Dan semua teman-teman atau pihak-pihak yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu. Terima kasih atas semuanya. Atas segala kekurangan dan ketidaksempurnaan skripsi ini, penulis sangat mengharapkan masukan, kritik dan saran yang bersifat membangun kearah perbaikan dan penyempurnaan skripsi ini. Cukup banyak kesulitan yang penulis temui dalam penulisan skripsi ini, tetapi Alhamdullilah dapat penulis atasi dan selesaikan dengan baik. v
Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak. Semarang, Januari 2017 Penulis vi
HALAMAN PERSEMBAHAN MOTTO Kesempatan datang kepada setiap orang yang siap menyambutnya -Anty- Skripsi ini saya persembahkan untuk : Ayah dan Ibu saya tercinta yang telah mendoakan, memotivasi dan mensupport. Almamater sebagai wujud terima kasihku, Sahabat sahabat ku yang selalu mensupport dan memotivasi. vii
Validasi Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Serta Aplikasinya dalam Beberapa Sediaan Sirup INTISARI Campuran Betametason (Bm) dan Deksklorfeniramin Maleat (Dk) sering digunakan dalam bentuk sediaan sirup untuk berbagai penyakit alergi. Dosis penggunaan Bm dan Dk dalam sediaan sirup sangat kecil, sehingga perlu dilakukan kontrol kualitas untuk memastikan kadar obat tersebut. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk memvalidasi dan mengaplikasikan metode penetapan kadar Bm dan Dk dalam sediaan sirup yang beredar di pasaran. Penelitian menggunakan alat KCKT (Jasco Corporation, Japan) dengan detektor UV-Visibel. Fase diam yang digunakan adalah C18 (Lichrospher) dan fase gerak berupa campuran metanol:air (90:10, v/v) dengan laju alir 1,0 ml/menit pada panjang gelombang 254 nm. Uji validasi berdasarkan parameter akurasi, presisi, selektivitas, linieritas, sensitivitas dan diaplikasikan dalam 3 merk sirup yang berbeda. Hasil penelitian menunjukkan bahwa uji validasi yang dilakukan memenuhi persyaratan yaitu: %RSD uji presisi Bm adalah 0.13% dan Dk 0.14%. Uji akurasi menghasilkan perolehan kembali untuk Bm sirup A 99.28-99.53%, sirup B 99.24-99.68%, sirup C 100.72-100.82%. Perolehan kembali Dk untuk sirup A 99.55-100.74%, sirup B 99.12-99.74%, sirup C 99.72-100.244%, selektivitas baik, linieritas dengan nilai korelasinya Bm (r) 0.998 dan Dk (r) 0.999. LOD dan LOQ Bm sebesar 5.70 µg/ml dan 19.00 µg/ml. LOD dan LOQ Dk 2.89 µg/ml dan 9.623 µg/ml. Kadar rata-rata Bm dan Dk dalam sediaan sirup A, B dan C adalah 99.19-99.75%, 99.77-100.02%, 99.09-99.32% and 99.48-99.86%, 99.98-100.06%, 98.19-99.42%. Hasil penetapan kadar dalam ketiga sirup memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh Farmakope Indonesia IV. Kata kunci : validasi, betametason, deksklorfeniramin maleat, KCKT, sirup viii
Validation of Methods Betametason and Dexclorfeniramin Maleate Usig High Performance Liquid Chromatography and Application in Some Syrups Preparation ABSTRACT The admixture of Betametason (Bm) and Deksklorfeniramin Maleat (Dk) are often used in syrup for various of allergy disease. Usage dosage of Bm and Dk are very low, so it needs control the quality to make sure medicine s quality. The purpose of this research is to validated and apply the decree method of Bm and Dk to some syrup dosage form. The research used HPLC tool (Jasco Corporation, Japan) with UV Visible detector. The stationary phase used was C18 and the mobile phase used was a mixture methanol:water (90:10, v/v) with a flow rate of 1.0 ml/minute at 254 nm wavelength. Validation test was conducted on precision, accuracy, selectivity, linearity, sensitivity, and applied in 3 types of different syrup. The results showed that the test meets the requirements validation are performed as follows: % RSD precision test Bm were 0.13% and Dk were 0.14%. Accuracy test resulted in the recovery for Bm in A syrup 99.28-99.53%, syrup B 99.24-99.68%, syrup C 100.72-100.82% and Dk for syrup A 99.55-100.74%, syrup B 99.12 99.74%, syrup C 99.72-100.24%; good selectivity; linearity with correlation coefficient Bm (r) 0.998 and Dk (r) 0.999. LOD and LOQ for Bm were 5.70% and 19.00 µg/ml LOD and LOQ for Dk were 2.89 and 9.623 µg/ml. Average levels of Bm and Dk syrup A, B dan C were 99.19-99.75%, 99.77-100.02%, 99.09-99.32% and 99.48-99.86%, 99.98-100.06%, 98.19-99.42%. The result obtained concentration levels meet the requirements by the Indonesia Pharmacopoeia Edition V. Keyword : validation, betametason, deksklorfeniramin maleat, HPLC, syrup ix
DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL... PENGESAHAN SKRIPSI... SURAT PERNYATAAN... KATA PENGANTAR... HALALMAN PERSEMBAHAN... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... INTISARI... i ii iii iv vii viii xi xii xiii xiv ABSTRACT... xv... BAB I. PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang... 1 B. Perumusan Masalah... 3 C. Tujuan Penelitian... 3 D. Manfaat Penelitiaan... 3 E. Tinjauan Pustaka... 4 1. Betametason... 4 2. Deksklorfeniramin Maleat... 4 3. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi... 5 x
4. Validasi... 9 5. Sirup... 13 F. Landasan Teori... 15 G. Hipotesis... 15 BAB II. METODOLOGI PENELITIAN... 17 A. Design dan Tempat Penelitian... 17 B. Bahan dan Alat Penelitian... 17 1. Bahan... 17 2. Alat... 17 C. Jalannya Penelitian... 18 1. Pembuatan Larutan Baku Betametason... 18 2. Pembuatan Larutan Baku Deksklorfeniramin Maleat... 18 3. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum... 18 4. Optimasi Komposisi Fase Gerak... 18 5. Pembuatan Kurva Baku... 18 6. Uji Validasi... 19 7. Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat dalam Sediaan Sirup... 21 D. Skema Jalannya Penelitian... 23 BAB III. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN... 24 A. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal... 24 B. Optimasi Fase Gerak... 25 C. Pembuatan Kurva Baku... 26 xi
D. Validasi Metode Analisis... 27 E. Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Sediaan Sirup... 34 BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN 36... A. Kesimpulan... 36 B. Saran... 37 DAFTAR PUSTAKA... 38 LAMPIRAN-LAMPIRAN... 40 xii
DAFTAR TABEL Tabel I. Parameter Validasi untuk Masing-Masing Tipe Metode Analisis.. 9 Tabel II. Nilai Perolehan Kembali Berdasarkan Besarnya Konsentrasi Analit... 11 Tabel III. Nilai SD dan RSD Uji Presisi Betametason... 27 Tabel IV. Nilai SD dan RSD Uji Presisi Deksklorfeniramin Maleat... 28 Tabel V. Hasil Uji Akurasi Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Sirup A dengan Metode Penambahan Baku... 28 Tabel VI. Hasil Uji Akurasi Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Sirup B dengan Metode Penambahan Baku... 29 Tabel VII. Hasil Uji Akurasi Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Sirup C dengan Metode Penambahan Baku... 30 Tabel VIII. Hasil Uji Linieritas Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat...... 32 Tabel IX. Hasil Uji Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Sediaan Sirup..... 34 xiii
DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Struktur Kimia Betametason... 4 Gambar 2. Struktur Kimia Deksklorfeniramin Maleat... 5 Gambar 3. Skema Komponen KCKT... 6 Gambar 4. Tipe Injector Katup Putaran pada KCKT... 8 Gambar 5. Skema Jalannya Penelitian... 23 Gambar 6. Hasil Scanning Penentuan Panjang Gelombang... 24 Gambar 7. Kromatogram Hasil Optimasi Komposisi Fase Gerak Pada Panjang Gelombang 254 nm dengan Laju Alir 1 ml/menit 25 Gambar 8. Hasil Kurva Baku Betametason... 26 Gambar 9. Hasil Kurva Baku Deksklorfeniramin Maleat... 27 Gambar 10. Contoh Kromatogram Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat dalam Sediaan Sirup... 31 xiv
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Hasil Scaning Panjang Gelombang Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat... 40 Lampiran 2. Kurva Baku Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat... 40 Lampiran 3. Contoh Kromatogram Akurasi Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat... 43 Lampiran 4. Kromatogram Sampel Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat... 44 Lampiran 5. Contoh Perhitungan Perolehan Kembali Betametason dengan Metode Standard Addition Method Sirup A... 45 Lampiran 6. Perhitungan LOD dan LOQ Betametason... 46 Lampiran 7. Selektivitas Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat... 49 Lampiran 8. Contoh Perhitungan Betametason... 49 Lampiran 9. Certificate of Analysis Betametason... 50 Lampiran 10. Certificate of Analysis Deksklorfeniramin Maleat... 51 Lampiran11. Surat Keterangan Laboratorium... 52 Lampiran 12. Gambar Alat-Alat yang Digunakan Penelitian... 53 Lampiran 13. Gambar Sampel Sirup-Sirup A, B dan C... 54 xv