BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat Penelitian ini dilaksanakan di Kebun Percobaan Cikabayan, Departemen Agronomi dan Hortikultura, Institut Pertanian Bogor mulai bulan Februari 2009 sampai Juni 2009. Bahan dan Alat Bahan yang akan dipergunakan dalam penelitian adalah benih rosela merah, polibag, tanah, pupuk kandang, pupuk urea, pupuk SP-18, pupuk KCl, Decis, dan Dithane 45. Alat yang digunakan adalah cangkul, kored, ember, gembor, gunting pangkas, penggaris, hand tally counter, timbangan, spektrofotometer serta alat tulis. Metode Penelitian ini dilakukan menggunakan faktor tunggal dengan susunan rancangan acak lengkap (RAL). Perlakuan yang digunakan yaitu dosis pupuk fosfor yang terdiri atas lima taraf yaitu 0 g SP-18/polibag (0 kg SP-18/ha), 10 g SP-18/polibag (66 kg SP-18/ha), 20 g SP-18/polibag (133 kg SP-18/ha), 30 g SP- 18/polibag (198 kg SP-18/ha), dan 40 g SP-18/polibag (266 kg SP-18/ha) atau setara dengan 0 kg P 2 O 5 /ha, 12 kg P 2 O 5 /ha, 24 kg P 2 O 5 /ha, 36 kg P 2 O 5 /ha, dan 48 kg P 2 O 5 /ha. Lima perlakuan tersebut diulang sebanyak tiga kali, sehingga terdapat 15 satuan percobaan. Data yang diperoleh akan diuji dengan uji F, bila berbeda nyata maka akan dilakukan uji lanjut DMRT (Duncan Multiple Range Test) pada taraf 5%. Model linier percobaan ini adalah: Yij = µ + αi + εij (i = 1, 2, 3, 4, 5 ; j = 1, 2, 3) Keterangan : Yij = respon pengamatan perlakuan ke-i, ulangan ke-j µ = nilai tengah umum αi = pengaruh perlakuan ke- i εij = pengaruh galat perlakuan ke-i, ulangan ke-j
11 Pelaksanaan Kegiatan penelitian dimulai dengan persiapan alat dan bahan. Sebelum benih ditanam, terlebih dahulu dilakukan persiapan media tanam. Persiapan media tanam dimulai dengan mencampur tanah dan pupuk dasar berupa pupuk kandang dengan perbandingan 5:1 lalu memasukkan media tanam tersebut pada polibag ukuran 10 kg. Polibag diisi media tanam sebanyak ¾ bagian dari volume polibag dengan jarak tanam yang digunakan ialah 1 m x 1,5 m. Benih yang akan ditanam direndam terlebih dahulu selama 24 jam kemudian dipilih benih yang tenggelam dengan butiran yang baik. Benih rosela kemudian ditanam pada media tanam yang telah disediakan. Setiap polibag diisi 5 benih rosela. Pada 3 MST dilakukan penjarangan terhadap bibit rosela sehingga setiap polibag hanya disisakan 1 bibit rosela dengan pertumbuhan terbaik dan seragam. Pemupukan P dan K dilakukan satu kali pada 4 MST, sedangkan pupuk N diaplikasikan dua kali saat tanaman berusia 4 MST dan 10 MST dengan cara dibenamkan disekeliling tanaman yaitu 10 cm dari tanaman. Dosis P yang digunakan sesuai perlakuan yaitu 0 g SP-18/polibag, 10 g SP-18/polibag, 20 g SP- 18/polibag, 30 g SP-18/polibag dan 40 g SP-18/polibag. Untuk dosis N dan K masing-masing sebanyak 30 g urea/polibag dan 15 g KCl/polibag. Pemeliharaan tanaman dilakukan secara teratur hingga panen. Penyiraman dilakukan 1 kali sehari atau sesuai kondisi cuaca di lapang. Pengendalian gulma dilakukan secara manual dengan mencabut gulma disekitar tanaman. Pengendalian hama dan penyakit dilakukan dengan penyemprotan pestisida. Pengajiran dilakukan pada 12 MST. Pemanenan dilakukan 4 minggu setelah mekarnya bunga menggunakan gunting pangkas. Panen dilakukan secara berkala setiap 10 hari selama empat kali berturut-turut. Hasil panen dipisahkan antara kaliks dan buah kemudian masingmasing ditimbang berat basah dan berat keringnya. Selain itu, diamati pula kadar antosianin yang terkandung dalam kaliks rosela dengan bantuan spektrofotometer.
12 Pengamatan Pengamatan dilakukan saat fase vegetatif dan fase generatif. Pertumbuhan tanaman fase vegetatif diamati setiap minggu mulai dari 3 MST. Peubah pertumbuhan yang diamati yaitu: 1. Tinggi tanaman. Tinggi tanaman diukur mulai dari pangkal batang utama yang menyentuh permukaan tanah sampai titik tumbuh batang utama tanaman. 2. Diameter tajuk. Diameter tajuk diukur dari diameter tajuk terlebar pada setiap tanaman dari setiap perlakuan. 3. Jumlah daun. Jumlah daun yang telah membuka sempurna dari keseluruhan daun pada tiap tanaman dari setiap perlakuan. Jumlah daun dihitung menggunakan hand tally counter. 4. Jumlah cabang primer. Jumlah cabang primer dihitung dari cabang yang muncul dari batang utama. 5. Jumlah cabang sekunder. Jumlah cabang sekunder dihitung dari cabang yang muncul dari cabang primer. 6. Bobot basah dan bobot kering tajuk serta akar. Bobot basah dan bobot kering tajuk serta akar dihitung setiap tanaman setelah panen terakhir. Bobot kering diukur setelah tajuk maupun akar tanaman dikeringkan menggunakan oven bersuhu 105 C selama 2 hari. 7. Rata-rata luas per daun. Rata-rata luas per daun ditentukan dengan metode gravimetri. Perhitungan dilakukan di akhir penelitian dengan merata-ratakan luas tiga daun pada setiap tanaman. Peubah pertumbuhan generatif tanaman yang diamati yaitu: 1. Minggu saat tanaman mulai berbunga 75%. 2. Jumlah kaliks
13 Jumlah kaliks dihitung dari keseluruhan kaliks yang dapat dipanen tiap tanaman pada saat panen. 3. Bobot basah dan bobot kering kaliks. Bobot basah dan bobot kering kaliks dihitung dari keseluruhan kaliks tiap tanaman pada saat panen. Bobot kering kaliks diukur setelah kaliks di oven pada suhu 50ºC selama 4 hari. 4. Bobot basah dan bobot kering buah. Bobot basah dan bobot kering buah dihitung dari keseluruhan buah tiap tanaman pada saat panen. Bobot kering kaliks diukur setelah buah di oven pada suhu 50ºC selama 4 hari. 5. Bobot basah dan bobot kering per kaliks Bobot basah dan bobot kering per kaliks dihitung dari total bobot basah kaliks dan total bobot kering kaliks dibagi jumlah total kaliks. 6. Bobot basah dan bobot kering per buah Bobot basah dan bobot kering per buah dihitung dari total bobot basah buah dan total bobot kering buah dibagi jumlah total buah. 7. Kandungan antosianin. Kadar antosianin yang terkandung pada kaliks diukur dengan spektrofotometer. Perhitungan dilakukan terhadap kaliks basah hasil panen terakhir, yaitu diambil masing-masing satu kaliks terbaik dari setiap tanaman sebagai sampel. Pengukuran kandungan antosianin manggunakan metode Sims dan Gamon terdapat pada Gambar 2.
14 Sampel kaliks 0.5 g Sampel digerus +2 ml acetris Masukkan ke microtube 2 ml Sentrifuge 14000 rpm 10 menit Pipet 1 ml supernatan ke dalam tabung reaksi Tambahkan 2 ml acetris Spektrofotometer (λ537 nm, λ647 nm, dan λ 663 nm) Gambar 2. Bagan Pengukuran Kandungan Antosianin Perhitungan kandungan antosianin = [(0.08173 x λ537)-(0.00697 x λ647)-(0.002228 x λ663)] x fp x vol. tera bobot sample Keterangan : fp = faktor pembagi