PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA DAN PH METER

dokumen-dokumen yang mirip
LAPORAN PRAKTIKUM ph METER DAN PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRAKTIKUM ph METER DAN PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRAKTIKUM 03 ph METER DAN PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRAKTIKUM ph METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRAKTIKUM ph METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRAKTIKUM 2 PH METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRATIKUM II PRATIKUM PH METER DAN PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

KESEIMBANGAN ASAM BASA

LAPORAN PRAKTIKUM 2 ph METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : Kamis, 31 Maret 2016

PRAKTIKUM PH METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRAKTIKUM PH METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGAN, DAN PENGENCERAN

LAPORAN PRAKTIKUM 2. : Magister Ilmu Biolmedik : ph meter, persiapan larutan penyangga Tanggal pelaksanaan : 10 Maret 2015

ph = pk a + log ([A - ]/[HA])

: Kirana patrolina sihombing

: Kirana patrolina sihombing

PRAKTIKUM 3 : PH METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA, PENGENCERAN STOK GLUKOSA. Oleh : Henny Erina Saurmauli Ompusunggu. Jekson Martiar Siahaan

Laporan Praktikum 3. Praktikum 3 : ph meter, Persiapan larutan penyangga, Pengenceran stok glukosa. Oleh : Rebecca Rumesty L dan Jimmy

Laporan Praktikum ph Meter, Persiapan Larutan Penyangga

Laporan Praktikum 3. ph Meter dan Persiapan Larutan Penyangga

LAPORAN PRAKTIKUM 2 PH METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA, DAN PENGENCERAN

LAPORAN PRAKTIKUM ph METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA DAN PENGENCERAN GLUKOSA

PRAKTIKUM 2 PH METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA, PENGENCERAN STOK GLUKOSA Oleh: Melviana Aditya Candra

LAPORAN PRAKTIKUM 2:

LAPORAN PRAKTIKUM. ph METER DAN PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

LAPORAN PRAKTIKUM 2 BM 506. ph METER DAN PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA

Laporan Praktikum ph Meter dan Persiapan Larutan Penyangga

LAPORAN PRAKTIKUM. ph Meter dan Persiapan Larutan Penyangga

LAPORAN PRAKTIKUM 03 ph Meter dan Persiapan Larutan Penyangga

LAPORAN PRAKTIKUM 3 ph METER, BUFFER, dan PENGENCERAN DISUSUN OLEH : MARIA LESTARI DAN YULIA FITRI GHAZALI Kamis 04 Oktober s/d 16.

H 2 PO 4 H + + HPO 4 [H + ] [HPO 4 2- ] [H 2 PO 4 - ] K a = kalau disusun kembali... [H + ] = K a [H 2 PO 4 [HPO 4 2- ] bila diuraikan didapat rumus

Praktik Biomedik 506 Ketrampilan Dasar Laboratorium. Laporan Praktikum ph Meter, Buffer dan Pengenceran

LAPORAN PRAKTIKUM PH METER, PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGAN, DAN PENGENCERAN

Uji benedict (Semikuantitatif) Tujuan : Menghitung secara kasar kadar glukosa dalam urin. Dasar teori :

Menyiapkan tabung reaksi yang bersih dan kering. Setelah itu dipipet 5 ml reagen benedict lalu dimasukkan kedalam tabung.

Uji Kualitatif Karbohidrat dan Hidrolisis Pati Non Enzimatis

Metodologi Penelitian

UJI KUALITATIF KARBOHIDRAT DAN PROTEIN

TEKNIK DASAR: PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

TEKNIK DASAR: PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

SIFAT DAN REAKSI MONOSAKARIDA DAN DISAKARIDA

PERCOBAAN 3 REAKSI ASAM BASA

PENUNTUN PRAKTIKUM KIMIA DASAR II KI1201

KARBOHIDRAT II (KARAKTERISTIK ZAT PATI)

Nova Nurfauziawati Kelompok 11A V. PEMBAHASAN

LAPORAN PRAKTIKUM 1 TEKNIK DASAR: PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

I PENDAHULUAN Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Latar Belakang Percobaan, (2) Tujuan Percobaan, (3) Prinsip Percobaan, dan (4) Reaksi Percobaan.

BAB I PENDAHULUAN A. Judul percobaan B. Tujuan praktikum

TEKNIK DASAR: PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

SOAL UJIAN OLIMPIADE SAINS NASIONAL 2014

Lampiran 1. Prosedur Karakterisasi Komposisi Kimia 1. Analisa Kadar Air (SNI ) Kadar Air (%) = A B x 100% C

TEKNIK DASAR: PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

LAPORAN BIOKIMIA UJI BENEDICT PADA BUAH

LAPORAN PRAKTIKUM I TEKNIK DASAR : PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : Kamis, 17 Maret 2016

LAPORAN PRAKTIKUM TEKNIK DASAR : PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

cincin ungu pada batas larutan fruktosa cincin ungu tua pada batas larutan glukosa cincin ungu tua pada batas larutan

KONTROL KEASAMAN LARUTAN PENYANGGA (BUFFER)

Bab IV Hasil dan Pembahasan

LAPORAN PRAKTIKUM TEKNIK DASAR : PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

LAPORAN PRAKTIKUM 2 TEKNIK DASAR : PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN DISUSUN OLEH : JEKSON MARTIAR SIAHAAN DAN MARIA LESTARI

TEKNIK DASAR PENGGUNAAN TIMBANGAN MANUAL DAN DIGITAL PENGGUNAAN TIMBANGAN MANUAL

PETA KONSEP. Larutan Penyangga. Larutan Penyangga Basa. Larutan Penyangga Asam. Asam konjugasi. Basa lemah. Asam lemah. Basa konjugasi.

Disusun Oleh: Anastasia Latif ( XI IPA 1 ) Christine ( XI IPA 1 ) Josephine Putri ( XI IPA 2 ) Kelvin Ricky (XI IPA 2 ) Patty Regina (XI IPA 1 )

LAPORAN RESMI PABRIKASI GULA I PENGARUH WAKTU TERHADAP KERUSAKAN MONOSAKARIDA

LAPORAN PRAKTIKUM TEKNIK DASAR : PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN

Lampiran Sumber Belajar : Purba, Michael Kimia SMA. Erlangga. Jakarta

PENENTUAN KADAR GULA METODE NELSON-SOMOGYI. Kelompok 8 Dini Rohmawati Nafisah Amira Nahnu Aslamia Yunus Septiawan

LAPORAN PRAKTIKUM PRAKTIKUM TEKNIK DASAR : TIMBANGAN, PIPET DAN PEMBUATAN LARUTAN IRA ASTUTI HASIBUAN PROGRAM STUDI MAGISTER BIOMEDIK FK USU

LAMPIRAN A PROSEDUR ANALISIS

MODUL PRAKTIKUM BIOKIMIA PROGRAM STUDI TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN JURUSAN TEKNOLOGI PERTANIAN FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS SRIWIJAYA

NAMA PRAKTIKAN : Yuliandriani Wannur Azah ( ) Rahmiwita ( ) Irma Yanti ( )

LAPORAN INSTRUMEN DASAR PENGENALAN ALAT PH METER

PRAKTIKUM II TITRASI ASAM BASA OLEH RONIADI SAGULANI 85AK14020

TEKNIK DASAR LABORATORIUM: PIPET; TIMBANGAN; PEMBUATAN LARUTAN.

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN

LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA DASAR LARUTAN BUFFER

LOGO TEORI ASAM BASA

BAB 7. ASAM DAN BASA

BAB III METODE PENELITIAN. Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian deskriptif. Waktu penelitian dilaksanakan pada bulan Maret 2006.

Lampiran 1. Prosedur analisis karakteristik kompos

Modul 1 Analisis Kualitatif 1

BAB III METODOLOGI PENELITIAN. Jenis penelitian ini adalah termasuk penelitian deskriptif.

PERCOBAAN I PENENTUAN KADAR KARBONAT DAN HIDROGEN KARBONAT MELALUI TITRASI ASAM BASA

Metodologi Penelitian

TITRASI DENGAN INDIKATOR GABUNGAN DAN DUA INDIKATOR

BAB III METODE PENELITIAN. menggunakan Rancangan Acak Kelompok yang melibatkan 2 faktor perlakuan

A. TEKNIK DASAR PENGGUNAAN TIMBANGAN MANUAL DAN DIGITAL

OLIMPIADE SAINS NASIONAL Medan, 1-7 Agustus 2010 BIDANG KIMIA. Ujian Praktikum KIMIA ANALISIS. Waktu 150 menit

LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA DASAR I

Bab III Metodologi. III. 2 Rancangan Eksperimen

Lampiran 1. Prosedur Analisis Karakteristik Pati Sagu. Kadar Abu (%) = (C A) x 100 % B

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA II KLINIK

LAPORAN PRAKTIKUM 3 METABOLISME GLUKOSA TEKNIK SPEKTROFOTOMETRI SISKA MULYANI (NIM: ) HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : KAMIS / 4 Agustus 2016

dimana a = bobot sampel awal (g); dan b = bobot abu (g)

BAB III METODE PENELITIAN

TITRASI POTENSIOMETRI

LAPORAN PRAKTIKUM I TEKNIK DASAR : PIPET, TIMBANGAN, PEMBUATAN LARUTAN HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : Kamis, 17 Maret 2016

Oleh : Melya Susanti Kelompok: melya susanti dan Islah wahyuni Selasa, 3 maret 2015

BAB 6. Jika ke dalam air murni ditambahkan asam atau basa meskipun dalam jumlah. Larutan Penyangga. Kata Kunci. Pengantar

Presentasi Powerpoint Pengajar oleh Penerbit ERLANGGA Divisi Perguruan Tinggi. Bab17. Kesetimbangan Asam-Basa dan Kesetimbangan Kelarutan

Transkripsi:

LAPORAN PRAKTIKUM 2 PERSIAPAN LARUTAN PENYANGGA DAN PH METER NAMA: 1. YULIANDRIANI (NIM: 157008004) 2. KARIN TIKA FITRIA (NIM: 157008003) HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : KAMIS / 31 MARET 2016 TEMPAT : LABORATORIUM BIOMEDIK LANTAI 1 UNIVERSITAS SUMATERA UTARA BAB I. TUJUAN PERCOBAAN 1) Dapat mengerti prinsip prinsip dasar mengenai larutan buffer 2) Latihan penggunaan ph meter 3) Latihan persiapan buffer fosfat dengan teknik titrasi 4) Latihan penggunaan larutan stok serta persiapan pengenceran 5) Latihan pembuatan dan interpretasi grafik BAB II. PROSEDUR KERJA Alat dan bahan yang dibutuhkan 1. Stel & Klem 2. Pipet Mohr 3. Akudes 4. 0,25M NaH 2 PO 4 5. 0,25M Na 2 HPO 4 6. Kertas Timbangan 7. Pipet Otomatik 8. Tabung Reaksi 9. ph Meter 10. Otomatik Stirrer 11. Rak Tabung 12. Larutan 3% Glukosa 13. Reagensia Benedict 14. Pipet Tetes 15. Spidol 16. Water Bath A. PENGGUNAAN ph METER DAN TITRASI BUFFER FOSFAT 1. Penggunaan ph Meter Prosedur Kerja penggunaan ph meter: a. Menghidupkan alat ph meter dengan menekan tombol ON. 1

b. Menyiapkan larutan yang akan diukur ph nya di dalam beaker glass dalam beaker glass dan magnet stirrer dan diletakkan di atas stirrer, dengan volume yang cukup agar magnet yang berputar tidak bersentuhan dengan ujung elektroda ph meter. c. Bagian elektroda ph meter diangkat dari larutan KCL, kemudian dicuci bersih dengan aquadest sebelum dan sesudah pembacaan agar terhindar dari kontaminasi larutan KCl pekat pada bahan titrasi dan juga kontaminasi KCl dengan bahan yang dititrasi. d. Masukkan electrode ke dalam larutan yang akan diukur dengan hati hati agar tidak bersentuhan dengan magnetic stirrer mupun bagian kaca beaker glass dan dijepit pada clamp, kemudian lihat hasil pengukuran, tunggu sebentar sampai angka ditunjukkan di layar ph meter stabil. e. Pada saat melakukan titrasi dengan larutan asam/basa, magnet tetap digunakan dengan putaran pelan agar larutan dapat tercampur homogen, dan setiap titrasi yang dilakukan diukur ph nya. f. Melihat perubahan nilai ph sampai ph yang diinginkan tercapai. Poin-poin yang penting pada penggunaan ph Meter: Elektroda ph disimpan dalam larutan KCl yang pekat Elektroda dipegang dengan hati-hati Bagian elektroda tidak boleh dibiarkan mengenai dinding beaker atau magnetic stir bar, karena alat dibuat dari kaca dan gampang pecah. Elektrode dibilas akudes sebelum dimasukkan ke dalam larutan, serta sebelum dikembalikan ke tempat penyimpanan 2

Gambar 1. ph Meter, Otomatic Stirrer 2. Persiapan Buffer Fosfat dan Titrasi Buffer Fosfat Menyiapkan larutan 0,25M NaH 2 PO 4 dan 0,25M Na 2 HPO 4 dan diukur ph nya. Hasil pengukuran ph 0,25M NaH 2 PO 4 ph = 5,03 Hasil pengukuran ph 0,25M Na 2 HPO 4 ph = 8,19 Cara kerja Persiapan Buffer Fosfat melalui Titrasi: Menyediakan beaker glass 100 ml, kemudian mengisi dengan larutan Na 2 HPO 4 sebanyak 40 ml dan magnet ke dalam beaker dan letakkan beaker di atas otomatik stirrer (kecepatan pelan). Memasukkan temperatur probe kedalam beaker, jepitkan elektroda pada klem yang punya statif, agar elektroda ph meter tidak mengenai magnet yang berputar. Mencatat ph pada readout ph meter. 3

Menambahkan 500 µl larutan natrium fosfat dihidrogen (NaH 2 PO 4 ) dengan pipet otomatik, menunggu sekitar 5 detik dan mengukur phnya lagi. Titrasi dengan larutan natrium dihidrogen fosfat (NaH 2 PO 4 ), dan diulang beberapa kali (setiap titrasi sebanyak 500 µl) sampai tercapai ph 7,8 (pada kali ke-5). Volume akhir NaH 2 PO 4 yang ditambahkan untuk mencapai ph 7,8 adalah sebesar 3 ml. Siapkan ~ 75mL 0,125M buffer fosfat ph tertentu (7,8) pada 28,2 0 C (temperatur ruangan) dari larutan stok (0,25M) Na 2 HPO 4 dan larutan stok (0,25M)NaH 2 PO 4. Volume Na 2 HPO 4 yang dipakai = 40 ml Volume NaH 2 PO 4 yang dipakai = 3 ml Untuk mendapatkan konsentrasi 0,125M buffer fosfat (ph=7,8) C1.V1 = C2.V2 0,25M. (40 + 3) ml = 0,125M. V2 V2 = 86 ml Tabel 1 : Ringkasan hasil pembuatan buffer fosfat ph tujuan Volume 0,25 M Na 2 HPO 4 (ml) Volume 0,25 M NaH 2 PO 4 (ml) Volume 0,125 M buffer fosfat yang disiapkan (ml) 6,3 40 80 240 6,8 40 25,5 131 7,0 40 15,5 111 7,5 40 6 92 7,8 40 3 86 8,19 40 0 - Dalam percobaan pembuatan buffer dihidrogen fosfat ini, larutan Na 2 HPO 4 bertindak sebagai larutan yang ditiitrasi sedangkan NaH 2 PO 4 sebagai larutan pentitrasi. Untuk mengetahui volume 0,125 M Buffer dihidrogen Fosfat yang disiapkan dapat dihitung menggunakan rumus V2 = V1xC1/C2 di 4

mana nantinya akan diencerkan menggunakan akuades hingga sejumlah V2 yang didapat. 1. pada ph 7,8 : V2 = (40+3)x0,25/0,125 = 86 ml 2. pada ph 7,5 : V2 = (40+6) x 0,25/0,125 = 92 ml 3. pada ph 7,0 : V2 = (40+15,5) x 0,25/0,125 =111 ml 4. pada ph 6,8 : V2 = (40+25,5) x 0,25/0,125 = 131 ml 5. pada ph 6,3 : V2 = (40+80) x 0,25/0,125 = 240 ml 8.5 8 7.5 0.0; 8.19 3.0; 7.8 6.0; 7.5 ph Larutan 7 6.5 6 15.5; 7.0 25.5; 6.8 80.0; 6.3 perubahan ph 5.5 5 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 Penambahan Volume NaH2PO4 (ml) Gambar 2. Grafik Penambahan volume larutan 0,25M NaH 2 PO 4 ke dalam 40 ml larutan 0,25M Na 2 HPO 4 terhadap perubahan ph larutan buffer Pembahasan Potensial hydrogen atau ph adalah ukuran keasaman atau kebasaan dari larutan. Kadar keasaman dan kebasaan suatu zat tergantung pada jumlah ion H + (asam) dan OH - (basa) yang terdapat dalam zat tersebut serta derajat ionisasi dari zat tersebut. Tingkat keasaman dan kebasaan suatu zat dinyatakan dengan ph. Nilai ph berkisar antara 0(sangat asam) hingga 14(sangat alkali). Nilai ph netral seperti pada H 2 0 adalah=7(pada suhu 25 o C). Nilai di bawah 7 bersifat asam sedangkan di atas 7 bersifat basa. 5

Pada pengukuran ph larutan 0,25M NaH 2 PO 4 dan larutan 0,25M Na 2 HPO 4 diperoleh hasil yaitu ph NaH 2 PO 4 = 5,03 yang artinya larutan tersebut bersifat asam dan ph Na2HPO4 = 8,19 yaitu bersifat basa. Menurut teori asam-basa Arrhenius, asam adalah suatu zat yang jika dilarutkan dalam air akan menghasilkan ion H +, menurut Brønsted- Lowry, asam merupakan zat yang dapat bertindak sebagai donor proton serta menurut Asam Lewis asam adalah zat yang dapat menerima pasangan elektron. Ketika kita mencampurkan NaH 2 PO 4 dengan Na 2 HPO 4, di dalam larutan, garam natrium dihidrogen fosfat dan natrium hydrogen fosfat terionisasi sempurna kemudian akan terbentuk larutan buffer dihidrogen fosfat. NaH 2 PO 4 (aq) Na + (aq) + H 2 PO 4 (aq) Na 2 HPO 4 (aq) 2Na + (aq) + HPO 4 2 (aq) Larutan buffer adalah larutan yang dapat mempertahankan nilai ph dari pengaruh penambahan sedikit asam atau sedikit basa atau juga pengenceran. Larutan buffer terdiri dari larutan asam lemah atau basa lemah dengan garamnya. Salah satunya yaitu buffer fosfat. Larutan buffer fosfat terdiri dari ion dihidrogen fosfat (H 2 PO - 4 ) yang merupakan pemberi hidrogen (asam) dan ion hidrogen fosfat (HPO 2-4 ) yang merupakan penerima hidrogen (ba sa). Kedua-duanya ion tersebut berada dalam keseimbangan dengan reaksi seperti berikut: H 2 PO 4 - (aq) H + (aq) + HPO 4 2- (aq) - 2- Dalam hal ini H 2 PO 4 adalah asam lemah, sementara HPO 4 merupakan basa konjugasinya. Penambahan ion H + akibat dimasukkannya NaH 2 PO 4 secara sedikit demi sedikit (500 μl) ke dalam larutan berisi Na 2 HPO 4 maka akan membuat reaksi bergeser ke arah kanan. ph awal larutan Na 2 HPO 4 yang awalnya 8,19 perlahan mulai turun seiring bertambah banyaknya ion H + atau bertambah asamnya suasana di dalam larutan. 6

Nilai ph larutan penyangga ditentukan oleh nilai pk a dan perbandingan konsentrasi molar pasangan asam dan basa konjugatnya. Seperti pada rumus berikut = + [ ] [HPO ] = = [ ][HPO ] [ ] Nilai K a atau pk a dari asam lemah tidak bergantung pada konsentrasi asam namun bbergantung pada suhu, sehingga pengenceran larutan penyangga tidak akan merubah nilai pk a.konsentrasi molar pasangan asam-basa konjugat akan berubah jika volume larutan berubah, sebab konsentrasi bergantung pada volume total larutan. Nilai K a untuk buffer dihidrogen fosfat pada suhu 25 C adalah 6,23 x 10-8. Oleh karena ion H 2 PO 4 berasal dari garam NaH 2 PO 4 dan ion H HPO 2 4 dari garam Na 2 HPO 4 maka konsentrasi ionion dalam system kesetimbangan ditentukan oleh konsentrasi garamgaramnya. Dibutuhkan penambahan larutan NaH 2 PO 4 yang lebih banyak ke dalam larutan Na 2 HPO 4 ketika akan mencapai ph 6,3 yaitu sebanyak 80 ml Kesimpulan 1. Pengukuran ph larutan 0,25M NaH 2 PO 4 dan larutan 0,25M Na 2 HPO 4 diperoleh hasil yaitu ph NaH 2 PO 4 = 5,03 yang artinya larutan tersebut bersifat asam dan ph Na2HPO4 = 8,19 yaitu bersifat basa 2. Ketika kita mencampurkan NaH 2 PO 4 dengan Na 2 HPO 4, di dalam larutan, garam natrium dihidrogen fosfat dan natrium hydrogen fosfat terionisasi sempurna kemudian akan terbentuk larutan buffer dihidrogen fosfat. 3. Larutan buffer fosfat terdiri dari ion dihidrogen fosfat (H 2 PO - 4 ) yang merupakan pemberi hidrogen (asam) dan ion hidrogen fosfat (HPO 2-4 ) yang merupakan penerima hidrogen (basa). 7

4. Penambahan NaH 2 PO 4 secara sedikit demi sedikit (@500 μl) ke dalam larutan berisi Na 2 HPO 4 maka akan membuat ph awal larutan Na 2 HPO 4 yang awalnya 8,19 perlahan mulai turun 5. Dibutuhkan penambahan larutan NaH 2 PO 4 yang lebih banyak ke dalam larutan Na 2 HPO 4 ketika akan mencapai ph 6,3 yaitu sebanyak 80 ml B. PENGENCERAN DAN PEMERIKSAAN PENGENCERAN DENGAN REAKSI BENEDICT 1. Pengenceran Pengenceran Serial ada 2 : doubling dilution dan decimal dilution. Tabel 2. Doubling dilution Nomor Tabung 1 2 3 4 5 6 7 8 Pengenceran Glukosa Faktor Stok 1 : 1 1 : 3 1 : 7 1 : 15 1 : 31 1 : 63 1 : 127 _ 2 4 8 16 32 64 128 Tabel 3. Decimal Dilution Nomor Tabung 1 2 3 4 5 6 7 Pengenceran Glukosa Stok 0,3X 0,1X 0,003X 0,01X 0,003X 0,001X Faktor _ 3 10 30 100 300 1000 Cara Kerja : Menyiapkan 16 tabung reaksi dalam rak tabung. Tabung ditandai dengan spidol. Tabung pertama untuk stok glukosa 5%, sementara 15 tabung lainnya diberi label I-XV untuk hasil pengenceran. Pengenceran dilakukan dengan volume 2ml tiap tabung. 8

Tabel 4. Langkah pengenceran No Tabung STOK - Pengen ceran glukosa 5% Langkah Pengenceren (Volume total 2 ml) Perhitungan Konsentrasi hasil pengenceran I 1:10 II 2 : 3 = 1/11 x 2mL = 0,18 ml glukosa 5% + 1,82 ml aquadest = 2/5 x 2mL = 0,8 ml glukosa 5% + 1,2 ml aquadest Pengenceran serial decimal delution III 0,1X IV 0,01X V 0,001X VI 0,3X VII 0,03X VIII 0,003X = 1/10 x 2mL = 0,2 ml glukoasa + 1,8 ml aquadest = 1/100 x 2 ml = 0,02 ml tabung III (0,1 X larutan 5% glukosa) + 1,98 ml aquadest Dengan mengambil 0,2 ml dari tabung III(pengenceran 0,1X) + 1 ml aquadest = 1/1000 x 2 ml = 0,002 ml tabung IV (0,01X larutan 5% glukosa) + 1,998 ml aquadest Dengan mengambil 0,2 ml dari tabung IV(pengenceran 0,01X) + 1,8 ml aquadest = 3/10 x 2 ml = 0,6 ml glukosa 5% + 1,4 ml aquadest = 3/100 x 2 ml = 0,06 ml glukosa 5% + 1,94 ml aquadest Dengan mengambil 0,2 ml dari tabung VI(pengenceran 0,3X) + 1,8 ml aquadest = 3/1000 x 2 ml = 0,006 ml glukosa 5% + 1,994 ml aquadest Dengan mengambil 0,2 ml dari tabung VII(pengenceran 0,03X) + 1,8 ml aquadest = 5 x 0,18/2 = 0,45% = 5 x 0,8/2 = 2% = 5 x 0,2/2 = 0,5 % = 0,5 x 0,02/2 = 0,05 % = 0,05 x 0,2/2 = 0,005% = 5 x 0,6/2 = 1,5% = 5 x 0,06/2 = 0,15% = 5 x 0,006/2 = 0,015% Pengenceran serial doubling dilution IX X XI faktor 2 (1: 1) faktor 4 (1: 3) faktor 8 (1:7) = 1/2 x 2 ml = 1 ml glukosa 5% + 1 ml aquadest = ¼ x 2 ml = 0,5 ml glukosa 5% + 1,5 ml aquadest dengan mengambil 1 ml tabung IX (faktor 2) + 1 ml aquadest = 1/8 x 2 ml = 0,25 ml glukosa 5% + 1,75 ml aquadest dengan mengambil 1 ml tabung X (faktor 8) + 1 ml aquadest C2 =(C1 x V1)/V2 = 5 x 1/2 = 2,5 % = 0,5 x 5/2 = 1,25 % C2 =(C1 x V1)/V2 = 0,25 x 5/2 = 0,625 % 9

XII XII XIV XV faktor 16 (1:15) faktor 32 (1:31) faktor 64 (1:63) faktor 128 (1:127) = 1/16 x 2 ml = 0,125 ml glukosa 5% + 1,875 ml aquadest dengan mengambil 1 ml tabung XI (faktor 8) + 1 ml aquadest = 1/32 x 2 ml = 0,0625 ml glukosa 5% + 1,9375 ml aquadest dengan mengambil 1 ml tabung IX (faktor 16) + 1 ml aquadest = 1/64 x 2 ml = 0,03125 ml glukosa 5% + 1,96875 ml aquadest dengan mengambil 1 ml tabung XII (faktor 32) + 1 ml aquadest = 1/128 x 2 ml = 0,015625 ml glukosa 5% + 1,984375 ml aquadest dengan mengambil 1 ml tabung XII (faktor 64) + 1 ml aquadest = 0,125 x 5/2 = 0,312 % = 0,0625 x 5/2 = 0,156 % C2 =(C1 x V1)/V2 = 0,03125 x 5/2 = 0,078 % = 0,015625 x 5/2 = 0,039 % 4. Pemeriksaan Pengenceran dengan Reaksi Benedict Untuk memeriksa pengenceran yang telah dilakukan, dilakukan pengujian dengan reaksi benedict. Cara Kerja : Menyediakan 15 tabung reaksi dan diberi label nomor 1-15 Mengisi 3 ml larutan benedict pada masing masing tabung. Kemudian pada masing masing tabung ditambahkan 8 tetes larutan glukosa yang telah diencerkan pada tabung I-XV Setelah itu diaduk hingga tercampur, kemudian dipanaskan dengan air mendidih di dalam waterbath selama 5 menit. Kemudian didiamkan dan diamati hasil reaksinya 10

Gambar 3. 15 tabung diisi larutan benedict sebanyak 3 ml Gambar 4. Waterbath dipanaskan hingga 100 C sebelum tabung yang berisi larutan benedict dan hasil pengenceran dimasukkan 11

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Gambar 5. Hasil reaksi benedict dengan glukosa di dalam tabung reaksi yang telah dipanaskan di dalam waterbath Tabel 5. Pedoman interpretasi reaksi Benedict Warna Penilaian Kadar karbohidrat (khusus reaksi Benedict) Biru jernih negatif 0 Hijau atau kuning hijau + < 0,5% Kuning atau kuning kehijauan ++ 0,5 1,0% Jingga +++ 1,0 2,0% Merah (ada endapan) ++++ >2,0% 12

Tabel 6. Hasil Interpretasi reaksi Benedict dengan Pengenceran Stok Glukosa Hasil Konsentrasi Kesesuaian interpretasi Pengenceran pemeriksaan Tabung yang hasil dengan pedoman 5% glukosa Benedict diprediksikan interpretasi (warna) (Seharusnya) 1 1 : 10 0,45 % 2 2 : 3 2 % 3 0,1X 0,5 % 4 0,01X 0,05 % 5 0,001X 0,005 % 6 0,3X 1,5 % 7 0,03X 0,15 % 8 0,003X 0,015 % 9 Faktor 2 2,5 % 10 Faktor 4 1,25 % 11 Faktor 8 0,625 % 12 Faktor 16 0,312 % 13 Faktor 32 0,156% 14 Faktor 64 0,078% 15 Faktor 128 0,039% + Kuning Hijau ++++ Merah (endapan) ++ Kuning Kehijauan + Hijau Negatif (biru jernih) +++ Jingga +++ Jingga - Biru Jernih ++++ Merah (endapan) ++++ Merah (endapan) +++ Jingga +++ Jingga Negatif (Biru Jernih) Negatif (Biru Jernih) Negatif (biru Jernih) Tidak sesuai (+) Tidak (+++) Tidak (++) 13

a Konsentrasi glukosa % 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0.5 0.05 0.005 0,1X 0,01X 0,001X b Konsentrasi glukosa % 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 1.5 0.15 0.015 0,3X 0,03X 0,003X c Konsentrasi glukosa % 2.7 2.6 2.5 2.4 2.3 2.2 2.1 2 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 2.5 1.25 0.625 0.312 0.156 0.078 0.039 Faktor 2 Faktor 4 Faktor 8 Faktor 16 Faktor 32 Faktor 64 Faktor 128 Gambar 6. Grafik perubahan konsentrasi pada Serial Dilution a. decimal dilution 0,1x,0,01x,0,001x; b. Desimal dilution 0,3x,0,03x,0,003x. c. Double dilution 14

Pembahasan Uji benedict adalah uji kimia untuk mengetahui kandungan gula (karbohidrat) pereduksi. Gula pereduksi meliputi semua jenis monosakarida dan beberapa disakarida seperti laktosa dan maltosa. Nama Benedict merupakan nama seorang ahli kimia asal Amerika, Stanley Rossiter Benedict (17 Maret 1884-21 Desember 1936). Benedict lahir di Cincinnati dan studi di University of Cincinnati. Setahun kemudian dia pergi ke Yale University untuk mendalami Physiology dan metabolisme di Department of Physiological Chemistry. Pada prinsipnya, benedict digunakan untuk mengetahui apakah suatu gula merupakan gula pereduksi atau bukan (mempunyai gugus aldehida bebas). Reaksi Benedict akan menyebabkan larutan yang berwarna biru akan berubah menjadi orange atau kuning. Molekul maltosa atau glukosa yang terlihat dari hasil positif pada uji benedict yang terbukti dengan terbentuknya warna merah bata pada tabung reaksi yang telah dipanaskan. Maltosa yang diuji dengan benedict memberikan warna merah bata, sedangkan amilum yang diuji dengan iod akan memberikan kompleks warna biru-ungu. Warna merah bata yang terbentuk disebabkan oleh maltosa dan glukosa memiliki gugus aldehid yang bebas sehingga dapat mereduksi ion-ion tembaga (Cu) yang terdapat pada larutan benedict menjadi Cu2O yang berwarna merah bata. Gambar 7. Reaksi antara glukosa dan larutan Benedict Serial Dilution adalah pengenceran bertahap dari suatu zat dalam larutan. Biasanya faktor pengenceran di setiap langkah adalah konstan Dari grafik pada gambar 6 terlihat perubahan konsentrasi pada serial 15

decimal dilution (a dan b) penurunan konsentrasi murupakan kelipatan 1/10 dari konsentrasi sebelumnya. Sementara pada double dilution (c), penurunan konsentrasi yang terjadi merupakan kelipatan ½ dari konsentrasi sebelumnya. Kesimpulan 1. Reagensi benedict digunakan untuk melihat adanya gula monosakarida dalam cairan, sehingga dalam praktikum terlihat pada larutan dengan konsentrasi glukosa yang pekat larutan berubah menjadi merah dan ada endapan. Hal ini menunjukkan adanya gula monosakarida dalam larutan tersebut. 2. Warna merah bata yang terbentuk disebabkan oleh maltosa dan glukosa memiliki gugus aldehid yang bebas sehingga dapat mereduksi ion-ion tembaga (Cu) yang terdapat pada larutan benedict menjadi Cu2O yang berwarna merah bata. 3. Semakin encer larutannya maka semakin kecil konsentrasinya dan tidak terlihat perubahannya pada saat ditambahkan dengan reagensi benedict ataupun hasilnya penilaiannya negatif. 4. Semakin besar konsentrasinya maka akan semakin tinggi pula kadar karbohidrat setelah diencerkan dengan benedict hingga membentuk endapan merah. 5. Pada latihan pengenceran glukosa ditemukan banyak ketidak sesuaian hasil dengan interpretasi yang diharapkan. Hal ini karena pada saat praktikum, pipet tetes yang telah digunakan untuk mengencerkan tabung sebelumnya tidak dicuci dahulu dengan aquades sebelum di gunakan untuk tabung yang lain, sehingga konsentrasinya walaupun sangat kecil dapat dimungkinkan bercampur, terjadi kekurang telitian saat mencampurkan larutan pengenceran, waktu pemanasan larutan benedict didalam waterbath yang terlalu cepat ataupun terlalu lama. 6. Perubahan konsentrasi pada serial decimal dilution penurunan konsentrasi murupakan kelipatan 1/10 dari konsentrasi sebelumnya. 16

Sementara pada double dilution, penurunan konsentrasi yang terjadi merupakan kelipatan ½ dari konsentrasi sebelumnya. Saran Sarana Air di ruang laboratorium mati, sehingga dalam pencucian alat alat yang digunakan tidak maksimal dan memungkinkan adanya kontaminasi alat/tabung/glassware dengan bahan yang digunakan sebelumnya yang dapat mempengaruhi hasil reaksi yang dilakukan Sebaiknya kesiapan alat-alat yang akan digunakan sebelum praktikum diperhatikan, sehingga praktikum bisa berjalan dengan lancar. Berbagai perhitungan sebaiknya dilakukan praktikan sebelum praktikum dimulai agar waktu praktikum dapat efektif Perlunya penambahan alat praktikum agar setiap kelompok mempunyai alat yang diperlukan/tidak menunggu kelompok lain memakai alat, sehingga waktu pun akan menjadi lebih efisien. Referensi 1. Sulistiyani. Larutan Buffer. http://staff.uny.ac.id/sites/default/files/pendidikan/sulistyanimsi/1e-larutan-buffer.pdf (diakses 2 April 2016) 2. Purba Michael. 2008. KIMIA. Jakarta: Erlangga 3. Sunarya, Yayan dan Setiabudi, Agus.2007. Mudah dan Aktif Belajar Kimia. Bandung: PT Setia Purna Inves 4. Fessenden, RJ dan Fessenden JS. 1997. Dasar-Dasar Kimia Organik. Jakarta:Bina Aksara 5. Nigoskar, Shreya.2007. Biochemistry for Dental Students. New Delhi. Jaypee Brothers Medical Publishers 17