25 III. BAHAN DAN METODE 3.1 Tempat dan Waktu Percobaan Pelaksanaan percobaan berlangsung di Kebun Percobaan dan Laboratorium Teknologi Benih Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran, Jatinangor, Jawa Barat, dengan ketinggian 725 m di atas permukaan laut. Percobaan dilaksanakan dari bulan Januari 2012 sampai dengan bulan April 2012. 3.2 Bahan dan Alat Percobaan Bahan- bahan yang digunakan dalam percobaan ini adalah : (1) Benih kedelai kultivar Wilis kelas benih pokok yang diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman Kacang kacangan dan Umbi-umbian (BALITKABI), Malang, Jawa Timur; (2) Insektisida berbahan aktif tiametoksam (Cruiser 350 FS ) yang digunakan untuk pelapis benih; (3) Tanah ordo Inceptisol yang diambil dari Kebun Percobaan Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran, Jatinangor; (4) Bokashi berbahan dasar pupuk kandang dan sekam padi; (5) Pupuk urea, pupuk SP36, dan pupuk KCI digunakan sebagai pupuk dasar; (6) Inokulan Rhizobium; (7) Insektisida Curacron 500 EC untuk mengendalikan hama dan fungisida Dithane M-45 80 WP untuk mengendalikan penyakit; (8) Kertas merang untuk uji daya berkecambah. Alat- alat yang digunakan dalam percobaan ini meliputi : alat pengolah tanah (cangkul, sekop, tugal, dan kored), polibag (ukuran 10 kg, 8 kg, dan 6 kg),
26 alat penyiraman, alat penyemprot pestisida, timbangan teknis dan analitik. Alatalat untuk uji daya berkecambah yaitu : kantung plastik ukuran 2 kg, tali rafia, pinset, sprayer, dan germinator. Alat- alat yang digunakan dalam proses pelapisan benih : kantung plastik 1 kg, pipet, sarung tangan, dan masker. 3.3 Metode Percobaan Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Kelompok (RAK) yang diulang tiga kali. Ada 12 kombinasi perlakuan antara dosis insektisida berbahan aktif tiametoksam dan pupuk bokashi, sehingga total satuan percobaan adalah 36 yang dibuat dalam tiga seri percobaan. Kombinasi perlakuannya adalah sebagai berikut : A. Insektisida tiametoksam 0 ml kg -1 benih + bokashi 0 ton ha -1 B. Insektisida tiametoksam 0 ml kg -1 benih + bokashi 7.5 ton ha -1 C. Insektisida tiametoksam 0 ml kg -1 benih + bokashi 15 ton ha -1 D. Insektisida tiametoksam 2 ml kg -1 benih + bokashi 0 ton ha -1 E. Insektisida tiametoksam 2 ml kg -1 benih + bokashi 7.5 ton ha -1 F. Insektisida tiametoksam 2 ml kg -1 benih + bokashi 15 ton ha -1 G. Insektisida tiametoksam 4 ml kg -1 benih + bokashi 0 ton ha -1 H. Insektisida tiametoksam 4 ml kg -1 benih + bokashi 7.5 ton ha -1 I. Insektisida tiametoksam 4 ml kg -1 benih + bokashi 15 ton ha -1 J. Insektisida tiametoksam 6 ml kg -1 benih + bokashi 0 ton ha -1 K. Insektisida tiametoksam 6 ml kg -1 benih + bokashi 7.5 ton ha -1 L. Insektisida tiametoksam 6 ml kg -1 benih + bokashi 15 ton ha -1
27 3.3.1 Rancangan analisis Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Kelompok dengan persamaan linier sebagai berikut: Yij = µ + α + βj + εij Di mana: Yij = Nilai pengamatan pada perlakuan ke-i dan kelompok ke-j µ = Nilai rata-rata umum βj = Pengaruh aditif dari ulangan ke-j εij = Pengaruh galat percobaan dari perlakuan ke-i pada kelompok ke-j Cara untuk mengetahui pengaruh dari perlakuan yang diberikan, digunakan uji F dengan taraf nyata 5%, sedangkan untuk menguji perbedaan nilai rata-rata perlakuan dilakukan dengan uji Scott Knott pada taraf nyata 5%. Perhitungan analisis ragam Rancangan Acak Kelompok dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Analisis Ragam Rancangan Acak Kelompok Sumber Keragaman Derajat Bebas Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah Fhitung F 0.05 Ulangan r-1 X j t Perlakuan t-1 X rt X i r X rt Galat (r-1)(t-1) JKT-JKU-JKP JKU r-1 JKP t-1 JKG (r 1)(t 1) KTU KTG KTP KTG Total r.t 1 X ij t Sumber : Gasperz, 1995 X rt
28 3.4 Pelaksanaan Percobaan 3.4.1 Pengujian benih di laboratorium Beberapa pengujian dilakukan sebelum perlakuan untuk mendapatkan data awal, yang meliputi bobot 100 butir benih dan daya berkecambah. Metode pengujian yang dilakukan pada umumnya mengacu pada ketentuan Internasional Seed Testing Association (ISTA). a. Penentuan bobot 100 butir benih (g) Tujuan dari penentuan bobot 100 butir benih adalah untuk mengetahui ukuran benih. Perhitungan ini dapat dipergunakan untuk mengetahui jumlah benih per kg. Penentuan bobot 100 butir dilakukan dengan menggunakan timbangan analitik. Penentuan bobot 100 butir dilakukan dengan menghitung jumlah benih murni suatu contoh kemudian menimbangnya, sehingga bobot dari 100 butir benih diketahui. b. Pengujian daya berkecambah awal (%) Pengujian daya berkecambah benih awal dilakukan dengan metode Uji Kertas Digulung Didirikan dalam Plastik (UKDdp), benih yang diuji sebanyak 40 butir untuk setiap gulungan kertas dengan ulangan sebanyak tiga kali. 3.4.2 Pencampuran benih dengan insektisida Insektisida sesuai masing-masing dosis dimasukkan ke dalam kantung plastik ukuran 1 kg berbeda (kebutuhan insektisida tiametoksam untuk masingmasing perlakuan dapat dilihat pada Lampiran 3). Selanjutnya ke dalam kantung plastik tersebut dimasukkan 2 ml air, lalu diratakan dengan tangan dari bagian luar
29 plastik. Setelah itu 100 g benih kedelai dimasukkan ke dalam masing-masing kantung plastik, kemudian dikocok sampai benih benar-benar terselimut rata dan tidak ada lagi bercak merah pada plastik. Proses pencampuran insektisida dilakukan di tempat yang benar-benar aman serta menggunakan sarung tangan dan masker. 3.4.3 Penanaman dan pemeliharaan a. Persiapan media tanam dan polybag Dalam percobaan ini terdapat tiga seri percobaan, yaitu : 1. Seri percobaan 1 : Tanaman pada seri percobaan ini dijadikan sampel pengamatan dan dibiarkan sampai panen. Seri percobaan ini menggunakan polibag yang berisi 10 kg campuran tanah. 2. Seri percobaan 2 : Tanaman pada seri percobaan ini dibongkar pada umur 7 mst (minggu setelah tanam) untuk menghitung parameter jumlah bintil akar. Seri percobaan ini menggunakan polibag yang berisi 8 kg campuran tanah. 3. Seri percobaan 3 : Tanaman pada seri percobaan ini dibongkar pada umur 3 mst untuk menghitung bobot kering bagian atas bibit sebagai salah satu parameter vigor bibit. Seri percobaan ini menggunakan polibag berisi 6 kg campuran tanah. Media tanam berupa tanah yang telah dihaluskan dan diayak dimasukkan ke dalam polibag. Setiap polibag diberikan bokashi sesuai dosis masing-masing perlakuan (Lampiran 4), cara pembuatan bokashi dapat dilihat pada Lampiran 6.
30 Polibag kemudian diatur berbaris dengan jarak 50 x 50 cm. Seminggu sebelum tanam masing-masing polibag diberi inokulan Rhizobium. b. Penanaman Benih kedelai yang telah dilumuri insektisida tiametoksam ditanam pada setiap polibag dengan kedalaman 2-3 cm. Tiap polibag berisi tiga butir benih. Pada umur 2 mst tanaman dijarangkan sehingga tinggal dua tanaman per polibag. c. Pemupukan Pemberian pupuk dasar yaitu : Urea sebanyak 50 kg ha -1, pupuk SP36 sebanyak 100 kg ha -1, dan pupuk KCl sebanyak 100 kg ha -1 yang diberikan saat tanam (Balai Penelitian Tanah, 2005). Cara perhitungan kebutuhan pupuk untuk setiap polibag dapat dilihat pada Lampiran 2. d. Pemeliharaan Pemeliharaan mencakup penyiraman, penyulaman, penyiangan, serta pengendalian hama, penyakit, dan gulma. Penyiraman dilakukan setiap 2 hari sekali pada pagi hari bila tidak turun hujan. Penyulaman dilakukan pada saat 5 hst 10 hst (hari setelah tanam). Penyiangan dilakukan pada saat gulma telah terlihat tumbuh. Penyiangan dilakukan secara manual. Pengendalian serangan hama dan penyakit menggunakan insektisida Curacron 500 EC dan fungisida Dithane M-45 80 WP. Pengendalian hama dan penyakit dilakukan setelah melewati fase bibit yaitu setelah melewati 30-40 hst dilakukan dua kali yaitu pada 35 hst dan 48 hst. 3.5 Pengamatan Penunjang dan Utama 3.5.1 Pengamatan penunjang 1. Bobot 100 butir benih awal (g) dan daya berkecambah awal benih (%)
31 2. Analisis tanah awal 3. Analisis kandungan pupuk bokashi 4. Data suhu, curah hujan, dan kelembaban nisbi udara 5. Serangan hama dan penyakit 6. Umur panen 7. Daya berkecambah benih hasil percobaan 3.5.2 Pengamatan utama a. Vigor Bibit - Daya muncul kecambah (%) Pengamatan daya muncul kecambah di lapangan (field emergence) dihitung pada saat umur 1 mst, yaitu dengan cara perhitungan : Daya muncul kecambah (%) = x 100% - Bobot kering bagian atas bibit (g) : untuk pengamatan bobot kering dilakukan pembongkaran bibit tanaman pada umur 3 mst. Bagian atas bibit dikeringkan dengan oven pada suhu 80ºC selama 72 jam sampai bobotnya konstan, kemudian ditimbang menggunakan timbangan analitik. b. Intensitas serangan hama lalat bibit (%) - Perhitungan intensitas serangan hama lalat bibit dilakukan pada fase bibit, yaitu umur 1, 2, dan 3 mst. c. Jumlah bintil akar efektif - Perhitungan jumlah bintil akar efektif dilakukan dengan melalukan pembongkaran tanaman pada umur 7 mst yaitu pada akhir fase berbunga.
32 d. Pertumbuhan - Tinggi tanaman (cm) : diukur setiap minggu dari umur 2 mst sampai dengan akhir stadia vegetatif yaitu pada umur 5 mst. - Indeks luas daun : dihitung saat akhir stadia vegetatif yaitu pada umur 5 mst, perhitungan indeks luas daun adalah sebagai berikut : ( Indeks luas daun = ) ( ) Luas daun dihitung dengan menggunakan metode scanning dan dengan bantuan software Irfanview. Menurut Arip (2010), dengan bantuan software tersebut, akan didapatkan jumlah pixels, pixels akan menunjukkan jumlah pixel warna hitam pada gambar daun hasil scanning yang tengah ditampilkan. Selain itu perlu dicatat DPI yang digunakan pada saat melakukan scanning daun, DPI adalah singkatan dari Dot Per Inch atau jumlah titik per inci. Luas daun dapat diukur dengan rumus (Irfan Skiljan, 2010 dikutip Arip, 2010): Luas daun (cm 2 ) =. - Bobot kering tanaman (g) : diukur saat panen, yaitu pada umur 99 hst, proses pengeringan bobot kering tanaman sama dengan bobot kering bibit. e. Komponen hasil dan hasil - Jumlah polong isi per tanaman (buah) yaitu menghitung jumlah polong yang berisi biji dari setiap tanaman sampel. - Jumlah polong hampa per tanaman (buah) yaitu menghitung jumlah polong yang kosong, tidak berisi biji dari setiap tanaman sampel.
33 - Jumlah biji per polong (butir), dihitung dengan membagi jumlah biji per tanaman dengan jumlah polong isi per tanaman. - Jumlah biji per tanaman (butir) yaitu menghitung biji dari setiap sampel tanaman. - Bobot 100 butir (g), yaitu menimbang 100 butir biji yang telah dijemur dengan sinar matahari hingga kadar airnya mencapai 12-14 %. - Bobot biji per tanaman (g), yaitu menimbang bobot biji per tanaman sampel yang telah dijemur dengan sinar matahari hingga kadar airnya mencapai 12-14 %. - Indeks Panen adalah perbandingan bobot biji per tanaman dengan biomassa tanaman. Dengan perhitungan : IP = Keterangan : IP Ye Yb = Indeks Panen = Bobot biji per tanaman = Bobot kering tanaman