UJI AKTIVITAS FRAKSI BUAH BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L) TERHADAP JAMUR Candida albicans SECARA IN VITRO

Transkripsi

1 UJI AKTIVITAS FRAKSI BUAH BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L) TERHADAP JAMUR Candida albicans SECARA IN VITRO Riska Marlin 1, Joko Marwoto 2, Salni 3 Bagian Biologi Kedokteran Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya Jl. Dr. Moh. Ali Komplek RSMH Palembang Indonesia riska.oktavery@yahoo.co,id ABSTRAK Kandidiasis vaginalis masih merupakan penyakit infeksi yang disebabkan oleh fungi Candida albicans. Salah satu bahan alam yang digunakan untuk pengobatan tradisional sebagai anti jamur adalah tanaman Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh fraksi buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) terhadap jamur Candida albicans. Penelitian ini meliputi proses ekstraksi (maserasi) dengan larutan methanol 96%dilanjtkan dengan fraksinasi dengan metode Fraksinasi Cair Cair, Uji aktivitas antijamur dengan penentuan KHM dilakukan dengan metode difusi agar terhadap Candida albicans.hasil penelitian ini menunjukkan bahwa fraksi buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L) yang aktif adalah fraksi dengan pelarut etil asetat. Golongan senyawa aktif yang terkandung dari fraksi tersebut adalah tannin dengan nilai Rf 0,4. SUMMARY Candidiasis Vaginalis is an infectious disease caused by the fungus Candida albicans. One of the natural materials used for traditional medicine as an anti fungal are soar (Averrhoa bilimbii L). The purpose of this study was to determine the effect of fraction soar (Averrhoa bilimbii L) againsts the Candida albicans fungus.the research content of extraction with methanol 96% and then fractionation by FCC, the antifungi activity test and MIC by Agar diffusion method. This Results of this study showed that the active fraction is a fraction of ethyl acetate from soar (Averrhoa bilimbii L). Class of active compounds contained in the faction is tannins. Ethyl acetate fraction from soar (Averrhoa bilimbii L) had a MIC value 1,25% against the Candida albicans fungus with Rf 0,4

2 PENDAHULUAN Kandidiasis vaginalis merupakan penyakit infeksi yang disebabkan fungi oleh genus Candida terutama Candida albicans. Beberapa kondisi dan faktor yang berperan pada pathogenesis Kandidiasis vaginalis antara lain kehamilan, pemakaian kontrasepsi hormonal, menstruasi, penderita diabetes mellitus, pemakaian antibiotik oral jangka lama, kurangnya kebersihan pasangan seksual, dan pemakaian celana ketat dari bahan nilon (Hapsari, 2006). Saat ini banyak tersedia obat-obat antifungi untuk pemakaian secara oral maupun topikal untuk terapi kandidiasis vaginalis Ketokonazol topikal untuk perawatan kandidiasis vaginalis adalah pada konsentrasi 2%. Tetapi ketokonazol topikal mempunyai beberapa efek samping antara lain iritasi, gatal, dan lain-lain (Indriana, 2006). Dewasa ini telah berkembang penggunaan obat tradisional sebagai pengobatan alternative yang dianggap lebih aman dibandingkan zat kimia lainnya. Alasan utamanya dikarenakan obat tradisional mempunyai efek samping yang relatif lebih kecil bahkan ada yang tidak memiliki efek samping apabila digunakan secara tepat. Salah satu tumbuhan yang telah lama dimanfaatkan sebagai obat tradisional oleh masyarakat adalah buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L). Hasil uji skrining fitokimia pendahuluan terhadap ekstrak kental metanol buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L) diketahui positif mengandung senyawa golongan flavonoid, alkaloid, tanin, dan minyak atsiri dengan kemungkinan kandungan utamanya adalah flavonoid. Flavonoid merupakan golongan terbesar senyawa fenol, dimana senyawa fenol dapat bersifat fungistatik atau antijamur. Senyawa fenol dalam buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L) bekerja dengan cara denaturasi protein sehingga meningkatkan permeabilitas membram sel dan

3 mengakibatkan kerusakan sel jamur. Kerusakan tersebut meyebabkan kematian sel jamur (Lathifah, 2008). Menurut Rahayu (2013), dari penelitian yang dilakukannya, ekstrak buah belimbing wuluh pada kosentrasi 6 % terbukti mampu menghambat pertumbuhan Candida albicans secara in vitro. Tetapi mekanisme kerja dari ekstrak buah belimbing wuluh yang mengandung flavonoid dalam penghambatan pertumbuhan Candida albicans belum diketahui secara pasti. Dibandingkan dengan ketokonazol 2%, ekstrak buah belimbing wuluh 6% memiliki efektivitas lebih tinggi dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans secara in vitro (Rahayu, 2013). METODE PENELITIAN 1. Ekstraksi Serbuk Simplisia Ekstraksi dilakukan secara maserasi dengan cara rimpang lengkuas putih seberat 3 kg dikeringkan, kemudian diblender sampai halus. Simplisia diekstraksi dengan cara merendamnya dengan metanol selama 2 x 24 jam, kemudian disaring dan diuapkan menggunakan rotavapor sampai mengental seperti pasta sehingga didapatkan ekstrak methanol. 2. Fraksinasi Ekstrak Proses fraksinasi dilakukan dengan metode FCC (fraksi cair-cair) yakni ekstrak aktif dipartisi dalam labu pisah dengan menggunakan pelarut-pelarut yang sesuai menjadi 3 fraksi yaitu n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi metanol. Tahap fraksinasi dilakukan dengan metode FCC (fraksi cair-cair), dari ekstrak buah belimbing wuluh yang diperoleh dalam tahap ekstraksi metanol ditambahkan dengan air dengan perbandingan 7:3 yaitu sebanyak 200 ml aquades dan metanol 80 ml metanol. Selanjutnya ditambahkan pelarut n-heksana sebanyak 1L secara bertahap, setiap kali dimasukan sebanyak 250 ml n-heksana (4x250 ml).

4 Fraksi metanol dan n-heksan dipisahkan dengan corong pemisah sehingga diperoleh fraksi n-heksan lalu diuapkan pada rotary evaporator sehingga didapatkan fraksi berbentuk pasta. Fraksi metanol air dilanjutkan dengan penambahan pelarut etil asetat sebanyak 1L secara bertahap, setiap kali dimasukkan sebanyak 250 ml etil asetat (4x250 ml) kemudian dipisahkan dengan corong pemisah sehingga diperoleh fraksi etil asetat dan fraksi metanol setelah diuapkan pada rotary evapator dan penangas air. Tahap akhir proses fraksinasi diperoleh tiga fraksi yaitu n-heksan, atil asetat, dan metanol dalam bentuk masing-masing pasta. Untuk mengetahui berat masing-masing fraksi, timbanglah botol yang kosong sebelum diisi fraksi, selisih berat botol sebelum dan sesudah diberi fraksi adalah berat fraksi yang didapatkan. Ketiga macam fraksi yang diperoleh diuji dengan Candida albicans untuk menentukan fraksi yang aktif. Pengujian dilakukan dengan menggunakan metode difusi agar untuk mengetahui ada tidaknya pengaruh fraksi buah belimbing wuluh (Averrhoe bilimbi L) menghambat pertumbuhan Candida albicans secara In Vitro. Kekuatan fraksi aktif buah belimbing wuluh (Averrhoe bilimbi L) menghambat pertumbuhan Candida albicans dapat dilihat dari besarnya diameter zona hambat yang terbentuk di sekitar kertas cakram yang telah ditetesi dengan fraksi buah belimbing wuluh (Averrhoe bilimbi L). 3. Uji Aktivitas Antijamur Fraksi Aktif Suspensi jamur dimasukkan ke dalam cawan petri sebanyak 0,1 ml, kemudian ditambahkan medium SDA (Sabouraud Dextrose agar) 10 ml yang belum membeku, dengan suhu sekitar 40 0 C. Selanjutnya dihomogenkan sampai membeku. Kertas cakram berukuran 6 mm diteteskan 20 µl dengan menggunakan mikropipet dari masing masing fraksi dan dibuat sebanyak 4 kali ulangan, dengan konsentrasi 10%, 5%, 2,5%, 1,25%, 0,625%, 0,312%, kemudian diletakkan di atas

5 media agar dan diberi label pada cawan petri, untuk menentukan jenisnya. Setelah itu diinkubasi selama 2 x 24 jam pada suhu 37 0 C. Pengujian aktivitas antijamur dinyatakan aktif apabila di sekitar cakram terdapat zona bening yang bebas pertumbuhan Candida albicans (Salni, 2003). Diameter zona hambat yang terbentuk karena adanya bahan bioaktif antibakteri dari bahan fraksi aktif yang diukur menggunakan jangka sorong dengan cara menjumlahkan ukuran diameter vertikal ditambah diameter horizontal kemudian dirata-ratakan (Salni, 2003). 4. Penetuan Nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Fraksi Aktif Penentuan nilai konsentrasi hambat minimum dilakukan dengan metode difusi agar dengan menggunakan kertas cakram (paper disc) berdiameter 6 mm. Konsentrasi terkecil yang menghambat pertumbuhan jamur merupakan nilai konsentrasi hambat minimum (KHM). Prosedur kerja penentuan KHM yaitu : Fraksi aktif dibuat dengan konsentrasi 10%, 5%, 2,5%, 1,25%, 0,625%, 0,312%, Masing- masing dibuat empat kali ulangan. Pelarut yang digunakan adalah dimetilsulfoksida (DMSO). Suspensi Candida dimasukkan ke dalam cawan petri sebanyak 0,1 ml, kemudian ditambahkan SDA 10 ml yang belum membeku dan selanjutnya dihomogenkan untuk memastikan sel-sel terdistribusi merata dan dibiarkan membeku. Di atas medium yang berisi jamur dimasukkan kertas cakram berdiameter 6 mm dan ditetesi dengan larutan isolat masing-masing dengan konsentrasi tersebut sebanyak 20µl dengan menggunakan mikropipet. Kemudian diinkubasi selama 2 X 24 jam di dalam inkubator dengan suhu 37 0 C dan diukur diameter zona hambat yang terbentuk (Salni, 2003). 5. Uji Bioautogrfi dan Penentuan Golongan Senyawa Aktif Antijamur Uji bioautografi dilakukan untuk mengetahui aktivitas antijamur suatu senyawa dengan menggunakan kromatografi lapis tipis. Prosedur uji bioautografi adalah

6 sebagai berikut: fraksi aktif dengan konsentasi 1% ditotolkan pada plat silica gel GF254, kemudian dikembangkan dengan fase gerak untuk pemisahan senyawasenyawa yang terdapat dalam fraksi, penotolan fraksi aktif dibuat rangkap dua pada kromatogram. Kromatogram pertama diletakkan dalam cawan yang berisi biakan Candida albicans, fraksi aktif pada kromatogram dibiarkan menempel pada medium agar selama 1 jam supaya bahan bioaktif menempel dan berdifusi ke dalam medium agar, kemudian diangkat dengan hati-hati. Cawan petri yang berisi biakan Candida tersebut diinkubasi selama 2 X 24 jam. Setelah medium diinkubasi diamati daerah bening yang menunjukkan hambatan pertumbuhan Candida dan merupakan daerah senyawa aktif berada dan dihitung nilai Rfnya. Tinggi dan nilai Retodansi faktor (Rf) ditentukan dengan rumus : (Betina, 1973). Kromatogram kedua digunakan untuk mendeteksi senyawa kimianya dengan menyemprotkan penampak bercak larutan H2SO4 pada plat silika gel, kemudian dipanaskan sehingga akan terlihat jelas senyawa kimia berdasarkan warna yang terbentuk dengan demikian dapat diketahui golongan senyawanya (Farnsworth, 1966). HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi, Fraksinasi dn Uji Aktivitas Antijamur Ekstraksi dilakukan secara maserasi dengan pelarut metanol. Dari 250 g simplisia Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) dihasilkan sebanyak 24 g ekstrak yakni 10,4% dari jumlah simplisia. Ekstrak yang diperoleh selanjutnya difraksinasi dengan menggunakan metode FCC. Hasil fraksinasi ekstrak Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) dari ekstrak seberat 24 gram diperoleh fraksi n-heksan seberat 6,2 gram (25,8%), fraksi etil asetat seberat 10,7 gram (44,6%) dan fraksi metanol seberat 7,1 gram (29,6%) dalam bentuk pasta. Fraksi yang diproleh kemudian dilakukan uji aktivitas aktivitas antijamur untuk menentukan fraksi yang

7 aktif. Dari hasi pengujian aktivitas antijamur pada ekstrak methanol, fraksi N Heksan, Etil asetat dan Metanol air aktif terhadap jamur uji. Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya zona bening disekitar kertas cakram pada medium agar yang ditumbuhi jamur Candida albicans. Hal ini menunjukkan bahwa baikekstrak maupun ketiga fraksi buah belimbing wuluh memiliki senyawa antijamur sehinggamempunyai aktivitas dalam menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans. TABEL 1: Hasil Uji Antijamur ekstrak dan fraksi buah belimbing wuluh terhadap Candida albicans. No Jenis Fraksi n Rerata + Standar Deviasi Diameter Hambat (mm) 1 Ekstrak 4 13,00±0,81 2 n-heksan 4 9,25±0,50 3 etil asetat 4 16,00±0,81 4 metanol air 4 12,55±0,57 Uji aktivitas antibakteri dari tiga fraksi, fraksi etil asetat memiliki diameter zona hambat terbesar yaitu 16 mm. Ini menunjukkan bahwa fraksi etil asetat adalah fraksi yang paling aktif dan lebih kuat aktivitas antijamur dibandingkan fraksi n- heksan dan fraksi methanol, dilihat dari zona hambat yang terbentuk fraksi etil asetat terhadap jamur candida albicans termasuk dalam kategori kuat. Hasil penelitian ini sesuai dengan pernyataan David dan Stout (1971) kekuatan daya antibakteri dibedakan menjadi 4, yaitu zona hambat 20 mm atau lebih berarti sangat kuat, zona hambat mm berarti kuat, 5-10 mm berarti sedang dan zona hambat 5 mm atau kurang berarti lemah. Selain pernyataan sebelumnya, terdapat pernyataan Parekh & Chandra (2007) mengemukakan bahwa aktivitas

8 antijamur dinyatakan tinggi apabila zona hambat yang terbentuk lebih dari 14 mm sehingga fraksi etil asetat pada penelitian ini mempunyai aktivitas anijamur yang kuat. Di dalam fraksi aktif terkandung senyawa aktif antimikroba. Senyawa aktif ini akan menghambat komponen-komponen sel bakteri yang memiliki sejumlah besar protein asam nukleat, enzim, membran semipermeabel dan dinding sel. Jika komponen senyawa aktif dari fraksi Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) mengganggu salah satu komponen sel jamur maka akan terjadi kerusakan pada sel jamur sehingga menyebabkan terhambatnya pertumbuhan jamur. Asumsi ini dibuat berdasarkan pernyataan Hugo & Russel (1977) yang menjelaskan bahwa kerusakan komponen sel jamur dapat disebabkan oleh bereaksinya senyawa aktif antijamur dengan penyusun dinding sel sehingga akan mempengaruhi penghambatan polimerisasi penyusun dinding sel. Apabila berkembang lebih lanjut maka akibatnya kebutuhan sel tidak dapat terpengaruh dengan baik. Jawetz et al., (1996) menjelaskan bahwa mekanisme yang menyebabkan terhambatnya pertumbuhan jamur adalah kerusakan membran sel oleh zat aktif antijamur. Kerusakan membran sel akan mengganggu integritas komponenkomponen seluler dan menyebabkan proses respirasi bakteri tidak terjadi. Pada akhirnya mengakibatkan tidak tercukupinya energi untuk transport aktif zat hara sehingga pertumbuhan jamur terganggu. a. Uji Sensitifitas Jamur Candida albicans Uji sensitifitas dilakukan dengan manggunakan obat Ketokonazol melalui metode Difusi Agar. Konsentrasi yang digunakan adalah 2% dengan pelarut Dimetilsulfoksida (DMSO). Hasil uji sensitifitas terhadap jamur dapat dilihat pada Gambar 1

9 Gambar 1 Hasil Uji Sensitifitas dengan Ketokonazol pada kosentrasi 2% terhdap jamur Candida albicans Dari gambar 1 dapat dilihat bahwa Ketokonazol menghasilkan diameter hambat terhadap jamur Candida albicans sebesar 15 mm. Hasil uji sensitifitas menunjukkan bahwa jamur Candida albicans tersebut masih sensitif terhadap Ketokonazol sehingga dapat digunakan sebagai sampel penelitian. Hasil ini juga didukung oleh penelitian yang dilakukan oleh Patel et al (2011) bahwa jamur Candida albicans masih sensitif terhadap ketokonazol terlihat dari diameter zona hambat yang terbentuk yaitu 11 mm. b. Penentuan Nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Hasil uji aktifitas antijamur menunjukkan bahwa fraksi etil asetat aktif terhadap jamur Candida albicans. Dalam penelitian ini penentuan konsentrasi hambat minimum berdasarkan penurunan konsentrasi yang dimulai dari 10%, 5%, 2,5%, 1,25%, 0,625%, 0,312% dengan 4 kali pengulangan Hasil penentuan KHM fraksi etil asetat terhadap jamur Candida albicans dapat dilihat pada Gambar 2.

10 TABEL 2 : Rerata Diameter Hambat (mm) Fraksi Etil asetat Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) terhadap jamur Candida albicans pada berbagai Konsentrasi Konsentrasi Fraksi (%) n Diameter Hambat (mm) Etil Asetat Rerata + Standar Deviasi ,75 + 0, ,50 + 0,57 2,5 4 11,75 + 0,50 1,25 4 9,25 + 0,50 0, ,00 + 0,00 0, ,00 + 0,00 Dari Tabel 2 dapat dilihat bahwa Fraksi etil asetat dengan konsentrasi 10% mempunyai diameter hambat terbesar yaitu 15,75 mm sedangkan pada konsentrasi 1,25% mempunyai diameter terkecil yaitu 9,25 mm terhadap jamur Candida albicans. Aktivitas fraksi menurun seiring dengan penurunan konsentrasi, sehingga diameter zona hambat yang terbentuk juga semakin kecil.konsentrasi

11 fraksi etil asetat mempengaruhi diameter hambat, semakin kecil konsentrasi maka semakin kecil diameter hambat sehingga konsentrasi terkecil yang masih memiliki aktivitas antijamur yaitu pada konsentrasi 1,25%. Tinggi rendahnya aktifitas antijamur memang dapat dilihat dengan mengetahui besar kecilnya diameter zona hambat namun kekuatan aktifitas antijamur lebih ditentukan oleh nilai KHM karena KHM menunjukkan kemampuan antimikrobial yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba dalam konsentrasi minimalnya, sedangkan penilaian berdasarkan zona hambat hanya menggambarkan kekuatan daya hambat suatu zat antijamuri tanpa menggambarkan konsentrasi minimal suatu zat antijamur untuk memberikan efek antijamur (Rahayu, 2009). c. Uji Bioautografi dan Penentuan Golongan Senyawa Hasil uji bioautografi dan penentuan golongan senyawa aktif dari fraksi etil asetat diakukan dengan menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Fase gerak etil asetat dan Metanol air dengan perbandingan eluen 9,5:0,5 untuk mengetahui golongan senyawa berdasarkan warna bercak yang timbul pada plat silika gel. Setelah disemprot dengan H 2SO 4 10% menunjukan bercak coklat diduga tannin. Tabel 3: Hasil Uji KLT Fraksi etil asetat N Jenis R Wa Senya o Fraksi f rna wa Aktif 1 etil as eta t 0,4 Co kla t Tanin

12 Berdasarkan hasil uji KLT, pada fraksi aktif etil asetat terdapat golongan senyawa tanin. Hal ini sesuai dengan hasil peneltian Puji Rahayu (2013), dimana ekstrak metanol Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) menunjukkan bahwa terdapat golongan senyawa tanin (Rahayu, 2013). Sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Mukhlisoh (2010) dalam Monalisa (2012) bahwa kandungan kimia dari daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) mengandung senyawa tanin. Penelitian lainnya yang dilakukan oleh Hayati, et al (2010) didapatkan bahwa ekstrak daun belimbing wuluh mengandung senyawa tanin dengan hasil uji fitokimia positif mengandung senyawa tanin. Senyawa antimikroba mempengaruhi sel mikroba melalui beberapa cara yaitu penghambatan sintesa dinding sel, menghambat fungsi membram sel, menghambat sintesis protein dan menghambat sintesis asam nukleat (Salni, 2013). Tanin mempunyai sifat dapat mengekrutkan membram sel sehingga mengganggu permeabilitas sel itu. Lim et al. (2006) memaparkan bahwa tanin terhidrolisis mampu menghambat pertumbuhan yeast dengan menghambat sintesis pembentukan membran sel dari dinding sel. Abnormalitas yang terjadi pada membran sel ini kemudian menyebabkan perubahan pada permeabilitas sel. Terganggunya permeabilitas membran sel menyebabkan terganggunya transport nutrisi (senyawa dan ion) melalui membran sel sehingga sel bakteri mengalami kekurangan nutrisi yang diperlukan bagi pertumbuhannya. Sebagai akibatnya, sel tidak dapat melakukan aktivitas hidup sehingga pertumbuhannya terhambat atau bahkan mati. Selain melalui reaksi dengan membran sel, efek antimikroba tanin juga melalui inaktivasi enzim dan destruksi atau inaktivasi fungsi materi genetik (Liana, 2010). Kesimpulan KESIMPULAN DAN SARAN

13 Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka dapat diambil simpulan sebagai berikut a. Ekstrak metanol, fraksi n-heksan, etil asetat dan metanol air buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) aktif terhadap jamur Candida albicans b. Fraksi etil asetat adalah fraksi yang paling aktif terhadap jamur Candida albicans c. Fraksi etil asetat buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) memiliki Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) 1,25 % terhadap jamur Candida albicans d. Fraksi etil asetat buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) mengandung senyawa aktif tanin. e. Fraksi etil asetat buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) pada konsentrasi 10% mempunyai daya efektivitas yang sama dengan ketoconazol 2% Saran a. Perlu dilakukan penelitian mengenai senyawa murni yang terkandung dalam fraksi etil asetat dari buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) yang bersifat antijamur misalnya dengan cara Kramatografi Kolom. b. Penelitian lebih lanjut terhadap jenis jamur lain untuk mengetahui efek antijamur dari buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) sehingga dapat melengkapi informasi ilmiah yang sudah ada. c. Perlu dilakukan penelitian secara in vivo terhadap mencit/tikus untuk mengetahui efektivitas senyawa aktif dari buah belimbing wuluh (Averrhoa bilimbii L) terhadap jamur Candida albicans DAFTAR PUSTAKA Betina V Bioautography in paper and Thin Layer Chromatography and Its Scope in the Antibiotic Field. J. Chromatography (78): 41-51

14 Farnsworth N.R., Biological and Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Sciences vol 55 (3) Hapsari, Nina Uji Banding Efektivitas Kunyit ( Curcuma Longa linn) 100% dengan Ketokonazol 2% secara In Vitro Terhadap Pertumbuhan Candida albicans pada Kandidiasis Vaginalis. Artikel Karya Tulis Ilmiah. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Indriana Uji Banding Efektivitas Ekstrak Rimpang Temu Kunci (Kaempferia pandurata Roxb) 10% dengan Ketokonazol 2% secara In Vitro Terhadap Pertumbuhan Candida albicans pada Kandidiasis Vaginalis. Artikel Karya Tulis Ilmiah. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Jawetz E, J.L. Melnick & E.A. Adelberg Mikrobiologi Kedokteran. Edisi 20. Jakarta: Penerbit EGC Lathifah, Qurroti A Yunin Uji Efektivitas Ekstrak Kasar Senyawa Antibakteri pada Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L) dengan Variasi Pelarut. Skripsi Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Tehnologi Universitas Islam Negeri Malang. Liana, I Aktivitas Antimikroba Fraksi Dari Ekstrak Metanol Daun Senggani (Melastoma Candidum D. Don) Terhadap Staphylococcus Aureus Dan Salmonella Typhimurium Serta Profil Kromatografi Lapis Tipis Fraksi Teraktif. Skiripsi Jurusan Biologi Universitas Surakarta Monalisa, Putri., Rina Widiana., Rince Meriko Pengaruh Sari Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa biliimbii L) terhadap Pertumbuhan Jamur Candida albicans. Skripsi Program Studi Ilmu Biologi. STKIP PGRI Sumatera Barat Rahayu, Puji Kosentrasi Hambat Minimum (KHM) Buah Belimbinh Wuluh (Averrhoa bilimbi L) Terhadap Pertumbuhan Candida albicans. Skripsi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Hasanuddin Makasar. Salni Karakteristik dan Uji Kativitas Tropikal Senyawa Antibakteri dari Daun Karamuntung (Rhodomyrtus tomentosa Ait Hassk). Disertasi. ITB. Bandung Reveny, J Daya Antimikroba Ekstrak dan Fraksi Daun Sirih Merah (Piper bettle Linn). Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara