UCAPAN TERIMA KASIH. Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis menyampaikan rasa hormat, penghargaan, dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :

Transkripsi

1 UCAPAN TERIMA KASIH Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, yang melimpahkan rahmat dan karunia-nya sehingga penulis bisa menyelesaikan tesis yang berjudul KRIM EKSTRAK GINSENG MENGHAMBAT PENINGKATAN EKSPRESI MMP-1 DAN PENURUNAN KOLAGEN PADA TIKUS (Rattus Norvegicus) WISTAR YANG DIPAPAR UV-B. Tulisan ini disusun untuk memenuhi persyaratan tugas akhir studi yang dijalani Penulis untuk Memperoleh Gelar Magister pada Program Magister Program Studi Ilmu Kedokteran Biomedik, Kekhususan Anti-Aging Medicine, Program Pascasarjana Universitas Udayana. Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis menyampaikan rasa hormat, penghargaan, dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada : 1. Prof. Dr. dr. I Ketut Suastika, SpPD-KEMD selaku Rektor Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. A. A Raka Sudewi, SpS(K) sebagai Direktur Pascasarjana Universitas Udayana, Prof.Dr.Made Budhiarsa, MA selaku Asdir I dan Prof. Dr. Made Sudiana Mahendra, Ph selaku Asdir II yang telah memberikan kesempatan untuk mengikuti Pendidikan di Program Pascasarjana. 2. Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp. And, FAACS selaku pembimbing I dan selaku koordinator Program Studi Ilmu Biomedik Kekhususan Anti Aging Medicine Universitas Udayana yang telah banyak memberikan dorongan, semangat, bimbingan dan masukan kepada penulis selama mengikuti program magister khususnya pada saat penyusunan tesis ini. 3. Dr. dr. A. A. G. P. Wiraguna, SpKK(K),FINSDV,FAADF selaku pembimbing II yang telah banyak memberikan dorongan, semangat, bimbingan dan masukan kepada penulis selama mengikuti program magister khususnya dalam penyusunan tesis ini. 4. Prof. Dr. dr. J Alex Pangkahila, Msc., Sp And selaku penguji yang telah sangat sabar meluangkan waktunya serta memberi bimbingan dan dorongan, semangat dan masukan dalam menyusun tesis ini dari awal sampai akhir ix

2 penelitian. 5. Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp. FK selaku penguji dan pembimbing akademik yang dengan penuh perhatian telah memberikan dorongan, semangat, bimbingan dan saran selama penulis mengikuti program magister, khususnya dalam penyusunan tesis ini. 6. Dr.A.A.A.N. Susraini, Sp.PA (K) selaku Penguji yang telah banyak memberikan saran,dorongan, semangat dan masukan pada penulis dalam menyusun tesis ini sejak awal hingga akhir 7. Dr. I Gusti Kamasan Nyoman Arijana, M.Si.Med yang telah membantu dalam pelaksanaan pemeriksaan histologi laboratorium. 8. Bapak Angga yang banyak membantu dan menjaga tikus penelitian dari tahap awal sampai akhir. 9. Ayahanda tercinta (H.Jamaludin) dan Ibunda tercinta (H.tin Mastini) atas doanya yg tiada henti, dukungan, perhatian dan kasih sayang begitu tulus pada penulis sehingga dapat menyelesaikan tesis ini. 10. Keluarga, anakku tercinta : Naura dan Kayla, Kakak-kakakku : M.Masral dan Yuli Mulyani serta adikku dan ponaanku tersayang atas doa dukungan dan pengertiannya selama penulis menempuh pendidikan serta pada saat menyusun tesis. 11. Sahabat-sahabat seangkatan seperjuangan khususnya dr.marinta Sereyosephine, dr.eva Ratna, dr. Marina, dr. Estie nayda, dr. Muti daya Yang slalu sudi membantu dan menyemangati, serta seluruh teman dokter seangkatan lain yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang selalu bersama dalam suka dan duka, memberikan motivasi dan doa. 12. Para dosen pengajar dan rekan-rekan staf yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang selalu memberikan doa dan dorongan kepada penulis. 13. Penulis juga mengucapkan banyak terima kasih kepada semua pihak yang telah ikut membantu dalam pelaksanaan dan penyelesaian tesis ini. Manusia tidak luput dari kesalahan karena tidak ada manusia yang sempurna, untuk itu penulis berharap dengan semua kekurangan dalam tulisan tugas akhir ini, tetap dapat memberikan manfaat bagi penulis pribadi, bagi program pendidikan Magister Program Studi Ilmu Biomedik, Program Pascasarjana Universitas Udayana, serta bagi pihak-pihak lain yang berkepentingan.akhir kata semoga Allah Yang Maha Kuasa senantiasa x

3 melimpahkan berkat dan rahmat-nya kepada kita semua, amin. Surabaya, Desember 2016 Penulis xi

4 KRIM EKSTRAK PANAX GINSENG MENGHAMBAT PENINGKATAN EKSPRESI MMP-1 DAN PENURUNAN JUMLAH KOLAGEN PADA TIKUS (Rattus norvegicus) WISTAR JANTAN YANG DIPAPAR SINAR ULTRAVIOLET B ABSTRAK Ultraviolet B (UVB) merupakan salah satu sumber radikal bebas yang dapat mempercepat proses penuaan, khususnya penuaan pada kulit. Sinar UVB dapat menembus sampai ke lapisan dermis kulit tempat kolagen berada. Paparan sinar UVB berulang akan membentuk reactive oxygen species (ROS) yang mengaktifkan enzim yang mendegradasi kolagen dan menghambat produksi kolagen melalui peningkatan ekspresi MMP-1. Panax ginseng merupakan jenis herbal yang paling sering digunakan di negara Asia, yang mempunyai efek antioksidan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membutkikan bahwa pemberian krim panax ginseng dapat menghambat penurunan jumlah kolagen dan peningkatan MMP-1 pada kulit tikus Wistar yang dipapar sinar ultraviolet B. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan rancangan post- test only control group design. Subjek yang digunakan dalam penelitian ini adalah 30 ekor tikus (Rattus norvegicus) galur wistar jantan berusia minggu, dengan berat badan gram yang terbagi menjadi 3 (tiga) kelompok masing-masing berjumlah 10 ekor tikus, satu kelompok sebagai kelompok kontrol tanpa perlakuan (P0), satu kelompok diberikan paparan sinar ultraviolet B dengan plasebo (P1), dan kelompok terakhir diberikan paparan sinar ultraviolet B dengan krim panax ginseng (P2). Setelah 48 jam penyinaran terakhir selama 2 minggu seluruh tikus dianestesi kemudian diambil jaringan kulitnya untuk dibuat preparat histologisnya dan dihitung jumlah kolagen dan eskpresi MMP-1 dermisnya sebagai data post test. Hasil analisis menunjukkan rerata jumlah kolagen pada kelompok kontrol tanpa perlakuan (P0) adalah 69,38 ± 3,96 %, pada kelompok yang diberikan paparan sinar ultraviolet B dengan plasebo (P1) adalah 62,79 ± 3,50 %, sedangkan pada kelompok yang diberikan paparan sinar ultraviolet B dengan krim panax ginseng (P2) adalah 80,55 ± 6,41 % (p<0,01). Selain itu didapatkan hasil penelitian rerata ekspresi MMP-1 pada kelompok P0 adalah 15,43 ± 3,13 %, pada kelompok P1 adalah 27,99 ± 5,45 %, sedangkan pada kelompok P2 adalah 6,16 ± 2,33 % (p<0,01). Kesimpulan : bahwa pemberian krim panax ginseng menghambat peningkatan ekspresi MMP-1 dan penurunan jumlah kolagen pada kulit tikus Wistar jantan yang dipapar sinar ultraviolet B. Kata kunci: panax ginseng, kolagen, MMP-1, UVB xii

5 PANAX GINSENG EXTRACT CREAM PREVENTED MMP-1 ELEVATION AND COLLAGEN DEPLETION AND MMP-1 IN UVB-EXPOSED WISTAR RATS (Rattus norvegicus) ABSTRACT Ultraviolet B (UVB) is a source of free radicals that accelerate aging process, especially in the skin. UVB rays can penetrate into the dermis layer of skin which has a lot of collagen. Repeated exposure to UVB rays will form reactive oxygen species (ROS), which activates enzymes that degrade collagen and inhibit collagen production by inducing the expression of MMP-1. Panax ginseng is a typical herb commonly used in Asia, which have antioxidant properties. The purpose of this study was to prove that panax ginseng extract cream can prevent collagen depletion and MMP-1 elevation UVB-exposed wistar rats (Rattus norvegicus). This study was a true experimental research with post-test only control group design. The subjects used in this study was 30 rats (Rattus norvegicus), Wistar strain male aged weeks, weighing grams which were divided into 3 groups with 10 rats each. A group without any treatment (P0), one group exposed to UVB and treated with placebo (P1), and the last group exposed to UVB and treated with panax ginseng extract cream (P2). After 48 hours of the last radiation for the entire 2 weeks, all rats were anesthetized and then skin tissue were collected for histological examination using Sirius red method. The expresion of MMP-1 and the number of collagen were observed under 400 times magnification of binocular microscopy. Results showed the average amount of collagen in the control group without treatment (P0) was ± 3.96%, in the group exposed to ultraviolet B and treated with placebo (P1) was ± 3.50%, whereas in the group exposed to UVB and treated with panax ginseng extract cream (P2) was ± 6.41% (p <0.01). In addition the study also showed a mean expression of MMP-1 in the P0 group was 15,43 ± 3,13%, the group P1 was 27,99 ± 5,45 %, while the P2 group was 6,16 ± 2,33% ( p <0.01). Conclusion that panax ginseng extract cream can prevented MMP-1 elevation and collagen depletion UVB-exposed wistar rats. Keywords: panax ginseng, collagen, MMP-1, UVB xiii

6 Daftar Isi Halaman SAMPUL DALAM.. PRASYARAT GELAR LEMBAR PENGESAHAN... PENETAPAN PANITIA PENGUJI. SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT.. UCAPAN TERIMA KASIH.. ABSTRAK. ABSTRACT.. DAFTAR ISI.. DAFTAR TABEL DAN GRAFIK. DAFTAR SINGKATAN i ii iii iv v vi ix x xi xv xvi DAFTAR GAMBAR.. xvii DAFTAR LAMPIRAN. xviii BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan Penelitian Tujuan Umum Tujuan Khusus Manfaat Ilmiah Manfaat Ilmiah Manfaat Praktis... 9 xiv

7 BAB II KAJIAN PUSTAKA 2.1. Proses Penuaan Teori Pakai dan Rusak Teori Program Gejala Klinis Penuaan Proses Penuaan Pada Kulit Definisi Penuaan Pada Kulit Anatomi Kulit Lapisan Epidermis Kolagen dan MMP Sinar Ultraviolet dan Efeknya Terhadap Kulit Efek Akut Sinar Ultraviolet Eritema Pigmentasi Efek Kronis Ultraviolet Photoaging Fotokarsinogenesis Kerusakan DNA Photoaging dan Mekanisme Terjadinya Photoaging Photoaging Mekanisme Terjadinya Photoaging Radikal Bebas dan Antioksidan Radikal Bebas Antioksidan..39 xv

8 2.8. Ginseng Vitamin C Fenol Flavonoid Tanin Krim Tikus ( Rattus Norvegicus ) Galur Wistar. 51 BAB III KONSEP BERFIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN 3.1. Kerangka Berfikir Konsep Penelitian Hipotesis 58 BAB IV METODE PENELITIAN 4.1. Rancangan Penelitian Parameter yang Diamati Tempat Dan Waktu Penelitian Pupulasi dan Sampel Populasi Kriteria Sampel Kriteria Inklusi Besar Sampel dan Cara Penganmbilan Sampel Variabel Penelitian Indentifikasi Variabel 63 xvi

9 Klasifikasi Variabel Hubungan Antar Variabel Definisi Opersional Variabel Alat Bahan dan Hewan Penelitian Bahan Penelitian Alat Penelitian Hewan Percobaan Prosedur Penelitian Persiapan Hewan Uji Pengamatan Hasil Preparasi Simplisia Ekstrasi Pembuatan Krim Alur Penelitian Analisi Data. 79 BAB V HASIL PENELITIAN 5.1. Analisis Deskriptif Uji Normalitas Data Uji Homogenitas Data Uji Komparabilitas BAB VI PEMBAHASAN 6.1. Subyek Penelitian Distribusi dan Homogenitas Data Hasil Penelitian Pengaruh Pemberian Krim Panax Gingseng Terhadap Jumlah Kolagen Kulit 91 xvii

10 6.4. Pengaruh Pemberian Krim Panax Gingseng Terhadap Ekspresi MMP BAB VII SIMPULAN DAN SARAN 7.1. Simpulan Saran 99 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN - LAMPIRAN xviii

11 DAFTAR TABEL DAN GRAFIK Tabel 2.1 Kandungan Panax Ginseng Tabel 2.1 Kandungan Ekstrak Panax Ginseng.. 45 Tabel 5.1 Hasil analisis Deskriptif data Jumlah Kolagen dan Ekspresi MMP Tabel 5.2 Hasil Uji Normalitas Data 82 Tabel 5.3 Hail Uji HomogenitasData Antar Kelompok 83 Tabel 5.4 Rerata Jumlah Kolagen dan Ekspresi MMP-1 antar Kelompok Tabel 5.5 Analisis LSD Perbandingan Jumlah Kolagen dan Ekspresi MMP-1 antar kelompok Grafik 5.1 Perbandingan Rerata Jumlah Kolagen Antar Kelompok 86 Grafik 5.2 perbandingan Rerata Ekspresi MMP-1 antar Kelompok 86 xix

12 DAFTAR SINGKATAN DNA : Deoxyribonucleic Acid UV : Ultraviolet ROS : Reactive Oxygen Species MMP₅ : Matriks Metalloproteinase TNFᴏ : Necrosis Faktor-alfa TGF.₁ : Transforming Growth Factor mrna : Messenger Ribonucleic Acid Rg : Red Ginseng AAM : Anti-Aging Medicine DHEA : Dehydroepiandrosterone ODC : Ornithine Decarboxylase RER : Rough Endoplasmic Reticulum MED : Minimal Erythema Dose IL : Interleukin EGF : Epidermal Growth Factor TNF α : Tumor necrosis Factor HoCL : Asam Hipoklorid AO : Antioksidan ALA : Alfa Lipoic CoQ₁₀ : Koenzim DEJ : Dermal Epidermal Junction PPT : Protopanaxatriol PPD : Protopanaxadiol xx

13 DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Anatomi Kulit Gambar 2.2 Sintesa Kolagen Gambar 2.3 Procollagen Gambar 2.4 Skematik struktur kolagen Gambar 2.5 Kolagen tipe 1 dengan Pewarnaan HE Gambar 2.6 Efek Sinar Ultraviolet Terhadap Kulit Gambar 2.7 Mekanisme Terjadinya Photoaging Gambar 2.8 Ginseng Gambar 2.9 Mekanisme kerja panax ginseng terhadap sintesa kolagen dan MMP Gambar 2.10 Tikus Galur Wistar...54 Gambar 3.1 Kerangka Konsep...57 Gambar 4.1 Rancangan Post Test Only Control Group Design Gambar 4.2 Hubungan Antar Variable Gambar 4.3 Alur Penelitian Gambar 5.1 Histopatologi Dermis Kelompok Kontrol Tanpa Perlakuan Gambar 5.2 Histopatologi Dermis Kelompok UVB + Plasebo (P1)...81 Gambar 5.3 Histopatologi Dermis Kelompok UVB + krim panax ginseng (P2)..81 Gambar 5.4 Ekspresi MMP-1 pada Jaringan Dermis Tikus dengan Pengecatan IHC...87 Gambar 5.5 Ekspresi Klangen pada Jaringan Dermis Tikus dengan Pengecatan Picro-Sirius...88 xxi

14 DAFTAR LAMPIRAN LAMPIRAN 1 Keterangan Kelaikan Etik LAMPIRAN 2 Hasil Analisis Laboratorium LAMPIRAN 3 Laporan Hasil Uji LAMPIRAN 4 Hasil Penelitian LAMPIRAN 5 Jumlah Kolagen LAMPIRAN 6 Uji SPSS LAMPIRAN 7 Foto Selama Penelitian xxii

15 BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang Penuaan adalah proses yang akan dialami oleh setiap mahluk hidup yang ada di muka bumi ini. Proses penuaan terjadi secara bertahap pada seluruh organ. Terdapat dua jenis penuaan yaitu penuaan secara kronologis dan penuaan secara biologis. Penuaan secara kronologis adalah penuaan yang terjadi seiring waktu atau dengan kata lain bertambahnya usia, yang sampai saat ini tidak dapat dihambat, namun ilmu Anti Aging Medicine berpendapat bahwa penuaan yang terjadi secara biologis dapat dihambat dengan cara mencegah berbagai penyakit yang timbul akibat penuaan. Faktor faktor yang menyebabkan penuaan dapat dikelompokan menjadi faktor intrinsik dan faktor ekstrinsik. Faktor intrinsik merupakan proses penuaaan yang berlangsung secara alamiah yang dapat disebabkan beberapa faktor antara lain adalah radikal bebas, berkurangnya hormon, glikosilasi, metilasi, apoptosis, sistem kekebalan yang menurun dan gen. Faktor ekstrinsik yang utama adalah gaya hidup tidak sehat kebiasaan yang salah, polusi lingkungan, stress dan kemiskinan (Pangkahila, 2011). Karena berbagai faktor itulah terjadi proses penuaan, sehingga orang menjadi tua, sakit, dan akhirnya meninggal. Tetapi, kalau faktor penyebab itu dapat dihindari, maka proses penuaan tentu dapat dicegah, diperlambat, bahkan mungkin dihambat, dan kualitas hidup dapat dipertahankan. Lebih xxiii

16 jauh, ini berarti usia harapan hidup menjadi lebih panjang dengan kualitas hidup yang lebih baik (Pangkahila, 2011). Pada konsep Anti Aging Medicine yang dicetuskan pada tahun 1993, konsep ini mengganggap dan memperlakukan penuaan seperti penyakit yang dapat dicegah, dihindari dan diobati sehingga dapat kembali ke keadaan semula, oleh karena itu manusia tidak lagi harus membiarkan begitu saja dirinya menjadi tua dengan segala keluhan atau mendapatkan pengobatan atau perawatan yang belum tentu berhasil (Pangkahila, 2007). Teori yang mendasari teori terjadinya proses penuaan itupun bermacam macam antara lain wear and tear teori (pakai dan rusak ) dan teori program. Teori pakai dan rusak meliputi kerusakan DNA, glikolisasi, dan radikal bebas. Teori program meliputi replikasi sel, proses imun, dan teori hormon. Pada teori pakai dan rusak prinsipnya menyatakan tubuh menjadi lemah lalu meninggal sebagai akibat dari penggunaan dan kerusakan yang terus-menerus. Kerusakan ini tidak hanya terjadi pada tingkat organ namun juga terjadi pada tingkat sel. Pada teori program menganggap bahwa didalam tubuh manusia terdapat jam biologi, mulai dari konsep konsepsi sampai ke kematian dalam suatu model terprogram (Pangkahila, 2007). Dari semua teori di atas yang banyak dianut adalah teori tentang radikal bebas, karena pada radikal bebas dapat mempengaruhi secara molekuler yang berupa serangkaian peristiwa yang dapat menyebabkan oksidasi organik oleh oksigen molekuler, pada peristiwa ini akan mengakibatkan fungsi seluler melalui terjadinya mutasi DNA, cleavage of xxiv

17 DNA dan agregasi biomolekul melalui cross-linking reaction (Pangkahila, 2011). Radikal bebas mempunyai peranan yang besar dalam mekanisme kerusakan kulit akibat paparan ultra violet. Ada empat cara mengurangi kerusakan kulit dari radikal bebas akibat paparan ultraviolet, yaitu; 1) Menghindari paparan sinar matahari yang berlebihan. 2) Memakai pakaian pelindung dari paparan sinar matahari. 3) Menggunakan tabir surya cream atau lotion yang mengandung antioksidan. 4) Menggunakan antioksidan baik sitemik atau topikal (Wiraguna, 2013). Sinar Ultra violet berasal dari sinar matahari. Terdapat beberapa macam sinar yaitu sinar UVA (ultra violet A) yang memiliki panjang gelombang nm, sinar UVB (Ultra violet B) yang memiliki panjang gelombang nm dan sinar UVC (ultra violet C) dengan panjang gelombang nm. Dari berbagai macam sinar UV (ultra violet) yang ada, sinar UVB yang memiliki daya rusak sampai menembus lapisan dermis kulit dan merusak serat - serat kolagen yang ada didalamnya (Krutmann, 2011). Paparan sinar UVB (ultraviolet B) yang lama dan berulang dapat menyebabkan kerusakan DNA berupa cross-linking pada basa pirimidin dan menyebabkan terbentuknya radikal bebas yaitu reaktive oxygen species (ROS). Sinar UVB juga terbukti meningkatkan dregradasi kolagen, karena sinar UVB dapat menginduksi berbagai matriks mettaloproteinase (MMPs) akibat dari ROS yang terbentuk. Sinar UV (Ultra violet) memacu sintesis xxv

18 MMP-1, MMP-3 dan MMP-9 melalui pelepasan Tumor Necroting Factor - alfa (TNF-) oleh keratinosit dan fibroblast serta menyebabkan penurunan Trasforming Growth Factor-beta (TGF-β) (Alam and Havey, 2010; Krutmann, 2011). Radiasi UV diketahui secara langsung dan tidak langsung mengganggu integritas ekstraseluler matrik dengan cara meningkatkan aktivitas MMP. Pada kulit manusia, MMP-1 adalah tipe yang paling terpengaruh oleh induksi sinar UV matahari dan bertanggung jawab terhadap pemecahan kolagen pada kulit yang mengalami photoaging (Fisher et al., 2001). Ditemukan bahwa hanya dengan satu kali ekspos terhadap paparan radiasi UV sinar matahari dapat mengganggu jaringan konektif dengan menyebabkan gangguan sintesis kolagen yang hampir komplit, selama 24 jam yang kemudian diikuti dengan recovery jam setelahnya ( Fisher et al., 2001). Selain itu juga terjadi degradasi kolagen karena terjadi peningkatan kadar MMP-1 yang cukup signifikan yaitu sekitar 4,4 0,2 kali lipat jika dibandingkan dengan kulit yang tidak dipajan radiasi UV (Fisher et al., 2001). MMP-1 adalah mediator utama terhadap timbulnya degradasi kolagen pada kulit yang mengalami photoaging. Enzim MMP-1 kolagenolitik mendegradasi fibril kolagen dan elastin, yang penting untuk kekuatan dan elastisitas kulit. Aktivitas MMP-1 di kulit akan meningkat walaupun hanya dengan radiasi UV yang singkat, yang akan menyebabkan timbulnya kerutan pada kulit, yang menjadi tanda photoaging (Yaar and Gilchrest, 2008). xxvi

19 Dengan demikian, hambatan terhadap MMP-1 adalah satu cara mencegah kerusakan kulit akibat paparan UV. Selain itu radiasi ultraviolet menghasilkan reactive oxygen species/ ROS (Lee et al., 2004; Yaar and Gilchrest, 2007), bersama dengan aktivasi berbagai ROS- sensitive signaling pathways, yang selanjutnya akan mempengaruhi berbagai macam fungsi selular termasuk menyebabkan fragmentasi kolagen dan sekresi MMP-1 (Yaar and Gilchrest, 2008; Helfich et al., 2008). Stress oksidatif berpengaruh besar dalam proses photoaging dan fotokarsinogenesis dan juga dalam patogenesis fotodermatosis (Stahl et al., 2006). Kulit merupakan organ kompleks dan dinamis dan menunjukan tanda penuaan secara nyata. Kulit berhubungan langsung dengan lingkungan sekitar oleh karena itu proses penuaan yang terjadi pada kulit adalah konsekuensi dari kerusakan oleh lingkungan (Gilchrest and Krutmann, 2006). Penuaan kulit kronologis meliputi segala perubahan yang terjadi pada kulit akibat dari perjalanan waktu saja. Perubahan perubahan ini sebagai bagian dari hasil akumulasi kerusakan endogen dan pembentukan ROS (rective oxygen species) secara terus menerus yang terbentuk selama metabolisme oksidasi seluler (Gilchrest and Krutmann, 2006). Penuaan secara praktis dapat dilihat sebagai suatu proses penurunan fungsi biologis dari usia kronologis seseorang. Penuaan tidak dapat dihindarkan dan berjalan dengan kecepatan berbeda dari susunan genetik seseorang, lingkungan dan gaya hidup sehinggga proses penuaan seseorang xxvii

20 dapat terjadi lebih dini atau lebih tergantung kesehatan individu masingmasing (Flower, 2003). Kolagen adalah salah satu komponen serat yang paling dominan pada lapisan dermis kulit. Serat kolagen ini berperan pada kekenyalan dan kekompakan kulit, kolagen adalah protein yang sangat labil, ada banyak faktor yang mempengaruhinya dalam proses Pembentukan maupun dalam proses degradasinya (Uito et al., 2008). Pada Photoaging, kolagen akan mengalami kerusakan dimana kolagen akan mengalami glikasi, yaitu reaksi non enzimatik yang melibatkan penambahan gula pereduksi molekul matrik ekstrakseluler kolagen dan protein. Kolagen yang mengalami glikasi akan kehilangan kelenturannya dan tidak dapat mengalami remodeling. Kolagen yang terpapar berulang oleh sinar UVB akan mengalami degradasi dan penghambatan pertumbuhan prokolagen. Degradasi kolagen menjadi tidak lengkap dan terjadi akumulasi fragmentasi kolagen yang mengurangi integritas struktural dermis (Yaar and Gilchreas, 2007; Brugman and Sagrhari, 2009). Sel fibroblast bertanggung jawab terhadap produksi kolagen, serat retikulin, serat elastik dan jaringan penyangga dari dermis. Selain itu fibroblast juga dapat menghilangkan serat-serat tersebut dengan mensekresikan enzim seperti collagenase (Matriks Metalloproteinase-1 atau MMP-1) dan elastase (Junqueira et al., 1997; Obagi, 2000). xxviii

21 Proses perubahan kolagen III menjadi I yang terjadi di dalam dermis dikontrol oleh interaksi yang melibatkan sintesis kolagen yang baru dengan melisiskan kolagen. Proses perubahan ini dipengaruhi oleh enzim metalloproteinase- 1 terutama kolagenase. Peningkatan MMP mempengaruhi sintesis kolagen, dimana dengan bertambahnya umur maka level MMP-1, 2, 9, dan 12 akan makin bertambah sementara ekspresi procollagen mrna lebih rendah dibanding saat masih berusia muda (Chung et al., 2004). Panax ginseng merupakan jenis herbal yang paling banyak digunakan di negara Asia, yang mempunyai efek anti oksidan yang mempunyai efek mekanisme meningkatkan Type-1 procollagen and protein expression, prevent MMP-9 gene induction, and elongated the fibrillin -1 fiber length, increase of expression of procollagen type I and decrease MMP-1 (cho et al., 2009), anti inflamasi, menghasilkan anti tumor dan mempunyai potensi terhadap anti-aging. Ada beberapa macam tipe ginseng tergantung dari metode pembuatannya, termasuk fresh ginseng, white ginseng, red ginseng. Fresh ginseng adalah ginseng yang utuh dan akarnya yang tidak kering. Akar ginseng yang kering karena udara disebut white ginseng. Red ginseng adalah ginseng yang di steam 98 0 C C dan dried ginseng root (Kim, 2000). Penelitian tentang Krim ekstrak panax ginseng dapat menghambat peningkatan ekspresi MMP-1 dan penurunan jumlah kolagen pada tikus (Rattus norvegicus) wistar jantan yang dipapar UV-B yang dilakukan oleh Liliana (2016) pada penelitian pendahuluan dengan dosis krim panax ginseng 5%, 10%, dan 20% lalu didapatkan dosis yang yang efektif untuk xxix

22 menghambat peningkatan ekspresi MMP-1 dan jumlah kolagen adalah 20%. Berdasarkan latar belakang penelitian tersebut maka dilakukan penelitian untuk membuktikan bahwa pemberian krim ekstrak panax ginseng 20% dapat mencegah peningkatan ekspresi matrix metalloproteinase-1 dan penurunan kolagen pada tikus wistar yang dipapar sinar ultraviolet-b Rumusan Masalah Berdasarkan latar belakang tersebut maka dapat dibuat rumusan masalah seperti berikut : 1. Apakah krim panax ginseng 20% dapat menghambat peningkatan ekspresi MMP-1 pada kulit tikus Wistar jantan yang dipapar sinar ultraviolet B? 2. Apakah krim panax ginseng 20% dapat menghambat penurunan jumlah kolagen pada kulit tikus Wistar jantan yang dipapar sinar ultraviolet B? 1.3 Tujuan Penelitian Tujuan umum Penelitian dilakukan untuk membuktikan pemberian krim ekstrak panax ginseng dapat menghambat penuaan kulit Tujuan khusus Tujuan secara khusus dari penelitian adalah : 1. Untuk membuktikan pemberian panax ginseng 20% dapat menghambat peningkatan ekspresi MMP-1 pada kulit tikus wistar jantan yang dipapar sinar UVB. xxx

23 2. Untuk membuktikan pemberian panax ginseng 20% dapat menghambat penurunan jumlah kolagen pada kulit tikus wistar jantan yang dipapar sinar UVB. 1.4 Manfaat Penelitian Manfaat ilmiah Dapat menambah wawasan dan memberi informasi ilmiah baru tentang panax ginseng dapat menghambat peningkatan ekspresi MMP-1 dan penurunan jumlah kolagen pada lapisan kulit sehingga diharapkan dapat menjadi salah satu alternatif terbaik dalam penanganan menghambat penuaan kulit secara bertahap dan aman dengan hasil yang maksimal Manfaat Praktis Sebagai dasar untuk digunakan sebagai penelitian lebih lanjut pada manusia. xxxi