Lapisan n-heksan bebas

Transkripsi

1 Lapisan n heksan Lapisan air Diekstraksi lagi dengan 5 ml n-heksan Dipisahkan 2 lapisan yang terbentuk Lapisan n-heksan Lapisan n-heksan Lapisan air Disatukan dengan lapisan n-heksan pertama Ditambah 500 mg Na 2 SO 4 anhidrat Didiamkan selama 25 menit Disaring Na 2 SO 4 anhidrat Lapisan n-heksan bebas Diambil 1 µl untuk diinjeksikan kea lat Kromatografi Gas Lampiran 2. Kondisi Alat Kromatografi Gas Kondisi alat Kromatografi Gas sebagai berikut: 1. Jenis GC : shimadzu, GC 14B dari jepang 2. Jenis detector : FID (Flame Ionization Detector) 3. Jenis kolom : kapiler DB Kondisi operasi alat Kromatografi Gas a. Suhu detector : 260 C

2 b. Suhu injector : 260 C c. Gas pembawa : N 2 dengan tekanan 100 kpa 5. Temperatur kolom terprogram : a. Suhu pertama : 200 C dipertahankan selama 5 menit naik 7 C/menit b. Suhu kedua : 220 C dipertahankan selama 10 menit 6. Split : 40 menit/5 ml 7. Waktu retensi : 30 menit 8. Volume injeksi : 1 µl 9. Kecepatan alir : 3,0 ml/menit Lampiran 3. Bagan Alir Hidrolisis VCO dan PKO VCO/PKO (6 g) Ditambahkan 10 ml akuades Ditambahkan 2,5 ml CaCl 2 0,063 M Ditambahkan suspense 5ml buffer tris-hcl dan 100 mg enzim lipase Diinkubasi pada suhu 37 C selama 8 jam Dikocok selama 10 menit tiap selang 1 jam Hidrolisat

3 Ditambahkan 50 ml etanol Lapisan atas : asam lemak Lapisan bawah Lampiran 4. Bagan Alir Pembuatan Metil Ester Asam Lemak Sesudah Hidrolisis 250 ml VCO atau PKO Ditambah 6 ml BF 3 tabung ditutup Dipanaskan 100 C selama 5 menit Didinginkan Ditambah 10 ml n-heksan, dikocok kuat 30 detik Ditambah 15 ml NaCl jenuh, terbentuk 2 lapisan Dipisahkan dua lapisan tersebut Lapisan air

4 Lapisan n-heksan Diekstraksi lagi dengan 5 ml n-heksan Dipisahkan 2 lapisan yang terbentuk Lapisan n-heksan Lapisan air Disatukan dengan lapisan n- Lapisan n-heksan heksan pertama Ditambahkan 500 mg Na 2 SO 4 anhidrat Didiamkan selama 15 menit Disaring Na 2 SO 4 anhidrat Lapisan n-heksan bebas air Diambil 1 µl untuk diinjeksikan ke alat Kromatografi Gas Lampiran 5. Karakteristik Kromatogram Standar Metil Ester Asam Lemak Sebelum Hidrolisis

5 Lampiran 6. Kromatogram I VCO Sebelum Hidrolisis

6 Lampiran 7. Kromatogram II VCO Sebelum Hidrolisis

7 Lampiran 8. Kromatogram III VCO Sebelum Hidrolisis

8 Lampiran 9. Kromatogram I PKO Sebelum Hidrolisis

9 Lampiran 10. Kromatogram II PKO Sebelum Hidrolisis

10 Lampiran 11. Kromatogram III PKO Sebelum Hidrolisis

11 Lampiran 12. Perhitungan Nilai Gizi VCO dan PKO Contoh perhitungan evaluasi nilai gizi VCO. Perbandingan persentase dari tiap golongan asam lemak dari hasil analisi Kromatografi Gas adalah sebagai berikut : %SFA:%MUFA :%PUFA (0,48 + 6,94 + 5,71+ 48, ,82 + 8,94 + 2,73 + 0,07)%:( 6,05 + 0,04)% : 1,29% 71,06% :6,09% : 1,29% Nilai gizi VCO :

12 Δ = 33,33% - %SFA + 33,33% - %MUFA + 33,33% - %PUFA = 33,33% - 92,60% + 33,33% - 6,09% + 33,33% - 1,29% = 59,27% + 27,24% + 32,04% = 118,55 % Nilai penyimpangan VCO dan PKO Komposisi asam lemak (penyimpangan) Total Sampel SFA(%) MUFA (%) PUFA(%) Penyimpangaan (%) Ideal VCO 59,27 27,24 32,04 118,55 PKO 47,60 16,85 30,84 95,29 Lampiran 13. Daftar Spesifikasi Enzim Lipase Prodek enzim lipase : Lipozyme TL IM Produksi Asal : Novo Nordisk Bioindustry Ltd. Denmark : Thermomyces lanuginosus diproduksi oleh permentasi medis cair dari suatu rekayasa genetika dari Aspergillus oryzae. Tipe : Granul

13 Ukuran partikel (mm) : 0,3-1,0 Spesifikasi posisi : sn - 1,3 Aplikasi : Interistefikasi lemak, mentega, margarine Pengelompokkan penggunaan : makanan Lampiran 14. Kromatogram I VCO Sesudah Hidrolisis

14 Lampiran 15. Kromatogram II VCO Sesudah Hidrolisis

15 Lampiran 16. Kromatogram III VCO Sesudah Hidrolisis

16 Lampiran 17. Kromatogram I PKO Sesudah Hidrolisis

17 Lampiran 18. Kromatogram II PKO Sesudah Hidrolisis

18 Lampiran 19. Kromatogram III PKO Sesudah Hidrolisis

19 Lampiran 20. Perhitungan Asam Laurat pada Posisi Sn-2 Berat total minyak VCO = 6000 mg Berat standar FAME campuran = 100 mg Persentase asam laurat standar = 6,4537% Luas area asam laurat standar =

20 Berat asam laurat standar dalam campuran 6,4537% = x100mg 100% = 6,4537 mg Berat sampel yang dipreparasi = 246 mg Faktor koreksi Berat asam laurat standar = Luas area asam laurat standar 6,4537 = = 0, Maka bobot asam laurat (mg/mg sampel) = Faktor koreksi x luas area asam laurat sampel = 0, x = 49,0096 mg /246 mg Lampiran 21. Hasil Perhitungan Berat Asam Laurat Sebelum Hidrolisis

21 Sampel Berat Berat Berat Luas area laurat Faktor Berat Berat as. Berat Berat rata Berat Berat Laurat/ Berat rata as. total as. Berat total sampel Faktor Laurat / Sampel asam Laurat as.laurat asam preparasi Standar Sampel koreksi total asam lemak standar (mg) lemak (mg) lemak (mg) (mg) sampel (mg) (mg) , , , ,6302 VCO , , , , , , , , , , , , ,1395 PKO , , , , , , , , ,4786 Lampiran 22. Hasil Perhitungan Berat Asam Laurat Setelah Hidrolisis

22 VCO PKO Standar Sampel 3655, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,3693 Lampiran 23. Perhitungan Distribusi Asam Laurat pada Posisi Sn-2 Bobot asam laurat posisi sn-2 Bobot asam laurat pada posisi sn-2 dapat dihitung dengan mengurangkan bobot asam laurat sebelum dan sesudah hidrolisis Bobot pada posisi sn-2 = Bobot total Bobot pada posisi sn-1,3

23 Sampel = 1,20 g 0,62 g = 0,58 g Bobot padasn 2 Persentase distribusi asam laurat pada posisi sn-2 = X100% Bobot total Asam laurat dalam 6 gram sampel minyak Bobot total (g) Bobot total pada sn-1,3(g) Bobot pada sn- 2 (g) 0,58g = X100% 1,20g = 48,33% Persentase asam laurat pada posisi sn-2 (%) VCO 1,20 0,62 0,58 48,33 51,67 PKO 1, ,69 48,59 51,41 Persentase asam laurat pada posisi sn-1,3 (%) Lampiran 24. Perhitungan Statistik Berat Asam Laurat dalam VCO dan PKO 1. Perhitungan Statistik Berat Asam Laurat pada VCO Sebelum Hidrolisis No. Xi Berat as. Laurat/ total asam (Xi- X ) (Xi- X ) 2 lemak sampel (mg) ,6302-0,4198 0, ,3333-4, , ,1864 5, ,

24 3582,1499 X = 1194, , SD = ( Xi - X) n -1 2 = 48, = 4,9399 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 3-1 =2 diperoleh nilai t tabel (α /2, dk) = 9,9250. Data diterima jika t hitung < t tabel. t hitung = Xi SD / X n 0,4198 t hitung 1 = = 0,1472 (Data diterima) 4,9399 / 3 4,7167 t hitung 2 = = 1,6238 (Data diterima) 4,9399 / 3 5,1364 t hitung 3 = = 1,8010 (Data diterima) 4,9399 / 3 2. Perhitungan Statistik Berat Asam Laurat pada PKO Sebelum Hidrolisis No. Xi Berat as. Laurat/ total asam (Xi- X ) (Xi- X ) 2 lemak sampel (mg) , , , ,6870-9, , , , , ,3051 X = 1422, , SD = ( Xi - X) n -1 2

25 = 1390, = 26,3697 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 3-1 =2 diperoleh nilai t tabel (α /2, dk) = 9,9250. Data diterima jika t hitung < t tabel. t hitung = Xi SD / X n 20,6289 t hitung 1 = = 1,3550 (Data diterima) 26,3696 / 3 9,0814 t hitung 2 = = 0,5965 (Data diterima) 26,3696 / 3 29,7102 t hitung 3 = = 1,9515 (Data diterima) 26,3696 / 3 3. Perhitungan Statistik Berat Asam Laurat pada VCO Sesudah Hidrolisis No. Xi Berat as. Laurat/ total asam (Xi- X ) (Xi- X ) 2 lemak sampel (mg) , , , , , , ,5766 9, , ,3957 X = 620, , SD = ( Xi - X) n -1 2 = 1135, = 23,8289

26 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 3-1 =2 diperoleh nilai t tabel (α /2, dk) = 9,9250. Data diterima jika t hitung < t tabel. t hitung = Xi SD / X n 17,3906 t hitung 1 = = 0,4214 (Data diterima) 23,8289 / 3 27,1587 t hitung 2 = = 1,9741 (Data diterima) 23,8289 / 3 9,7780 t hitung 3 = = 0,7107 (Data diterima) 23,8289 / 3 4. Perhitungan Statistik Berat Asam Laurat pada PKO Sesudah Hidrolisis No. Xi Berat as. Laurat/ total asam (Xi- X ) (Xi- X ) 2 lemak sampel (mg) ,9723 9, , ,7377 6, , , , , ,1081 X = 735, , SD = ( Xi - X) n -1 2 = 387, = 13,9258 Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = n-1 = 3-1 =2 diperoleh nilai t tabel (α /2, dk) = 9,9250. Data diterima jika t hitung < t tabel.

27 t hitung = Xi SD / X n 9,6030 t hitung 1 = 13,9258/ 3 = 1,1944 (Data diterima) 6,3684 t hitung 2 = 13,9258/ 3 = 0,7921 (Data diterima) 15,9712 t hitung 3 = = 1,9864 (Data diterima) 13,9258/ 3 Lampiran 25. Gambar Sampel Minyak

28 Gambar 1. VCO Gambar 2. Lampiran Kromatografi Gas PKO 26. Gambar

29 Gambar 3. GC Shimadzu

30 Lampiran 27. Tabel Distribusi t