BAB 3 METODE PENELITIAN

Transkripsi

1 59 BAB 3 METODE PENELITIAN 3.1. Ruang Lingkup Penelitian genetika. Penelitian ini merupakan penelitian di bidang ilmu penyakit saraf dan 3.2. Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di RSUP Dr. Kariadi Semarang dan Laboratorium Biologi Molekuler Universitas Gajah Mada Yogyakarta mulai bulan Juli 2011 sampai Oktober Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian observasional belah lintang. Bagan 3.1. Rancangan penelitian

2 Populasi dan Sampel Penelitian Populasi target Populasi target adalah pasien pasca stroke iskemik lebih dari tiga bulan setelah onset serangan Populasi terjangkau Populasi terjangkau adalah pasien pasca stroke iskemik yang kontrol ke klinik saraf RSUP Dr. Kariadi Semarang Sampel penelitian Sampel adalah pasien pasca stroke iskemik yang kontrol ke klinik saraf RSUP Dr. Kariadi Semarang yang memenuhi kriteria inklusi Kriteria inklusi 1. Pasien laki-laki dan perempuan pasca stroke iskemik yang telah dibuktikan dengan CT Scan Otak. 2. Pasca stroke iskemik onset lebih dari 3 bulan. 3. Umur th. 4. Minimal lulusan SD (berkemampuan baca tulis). 5. Pasien tetap mendapatkan obat untuk faktor risiko stroke. 6. Pasien setuju untuk diikutsertakan dalam penelitian dan menandatangani surat informed consent Kriteria eksklusi 1. Pasien tidak kooperatif.

3 61 2. Menderita epilepsi, tumor otak, infeksi otak yang ditegakkan melalui anamnesis, pemeriksaan neurologi dan pemeriksaan penunjang 3. Adanya gangguan penglihatan dan atau pendengaran yang berat sebelum dan sesudah menderita stroke iskemik 4. Peminum alkohol 5. Adanya afasia sesudah menderita stroke iskemik 6. Adanya gangguan fungsi kognitif, sudah terjadi gangguan aktivitas sosial dan kehidupan sehari-harinya (seperti demensia) sebelum terkena stroke iskemik (yang dieksklusi dengan menggunakan kuesioner SHORT IQ CODE secara alloanamnesis). 7. Mengalami gangguan psikiatrik / depresi (yang dieksklusi dengan menggunakan kuesioner skala depresi geriatri) Cara pemilihan subyek penelitian Pemilihan subyek penelitian dilakukan secara konsekutif, yaitu berdasarkan kedatangan penderita untuk dirawat di RSUP Dr. Kariadi Semarang. Penderita yang memenuhi kriteria penelitian digunakan sebagai subyek penelitian Besar Sampel Adapun dasar penentuan besar sampel dihitung dengan formulasi :

4 62 2 PQ / d 2 dimana Q = ( 1 P ) n : Besar sampel : Tingkat kepercayaan 95% = 1,96 P : Perkiraan proporsi populasi (13%) = 0,13 d : Tingkat kesalahan yang diperbolehkan (0,15), power penelitian 85% Berdasarkan rumus tersebut diatas, diperoleh n=20. Untuk menghindari kekurangan subyek karena drop out maka ditambahkan 20% jumlah subyek, maka diperoleh jumlah sampel minimal: 24 subyek penelitian Identifikasi variabel Variabel bebas Genotip gen APOE Variabel lain Usia Pendidikan Jenis kelamin Tekanan darah Kadar gula darah Profil lipid darah Merokok Variabel tergantung Fungsi kognitif Domain kognitif atensi, memori, bahasa, fungsi eksekutif, visuokonstruksi

5 Definisi operasional Tabel 3.1. Definisi operasional No. Variabel Batasan operasional Instrumen Skala 1. Genotip gen APOE 2. Gangguan fungsi kognitif umum 3. Gangguan fungsi kognitif domain tertentu 4. Lokasi Infark Terdapat enam genotip gen APOE, yaitu 2/ 2, 2/ 3, 3/ 3, 4/ 4, 4/ 3, 4/ 2. Masingmasing pasien mempunyai salah satu genotip tersebut Gangguan fungsi kognitif umum=vci Memenuhi kriteria probable demensia vaskuler atau VCIND Demensia vaskuler : memenuhi kriteria probable demensia sesuai guideline Perdossi th dan atau VCIND: terdapat gangguan kognitif pada minimal 1 domain dan CDR Tes Modifikasi CERAD Domain Kognisi 1. Atensi: Atensi terganggu : Forward digit span <5 Backward digit span <4 2. Memori Memori terganggu : Word list memory task <17,4 Word list memory recall <5,4 Word list memory recognition <8,8 3. Bahasa Bahasa terganggu : Boston Naming Test <14 4. Fungsi Eksekutif Fungsi Eksekutif terganggu Verbal Fluency Test <13 5. Visuokonstruksi Visuokonstruksi terganggu Construction praxis <9 Lokasi infark adalah kematian jaringan otak yang ditegakkan melalui CT Scan Kepala, terdiri ; lobus temporal, lobus oksipital ganglia basalis, talamus,globus Diperiksa menggunakan teknik PCR-RFLP (terlampir) dengan alat pemeriksaan, dilakukan oleh tim dari Laboratorium Biologi Molekuler FK UGM Wawancara dengan menggunakan modifikasi tes CERAD CT Scan kepala

6 64 No. Variabel Batasan operasional Instrumen Skala palidus,nukleus kaudatus, nukleus lentiformis Campuran korteks dan subkorteks 5. Jumlah Lesi Jumlah lesi adalah banyaknya gambaran lesi infark didaerah otak yang ditegakkan dengan CT Scan Kepala, terdiri : CT Scan kepala Ordinal l 6. Usia Usia adalah usia penderita saat penelitian dihitung berdasarkan tanggal lahir seperti yang tercantum pada catatan medik. Usia dinyatakan dalam tahun penuh 7. Jenis kelamin Jenis kelamin adalah jenis kelamin penderita saat penelitian berdasarkan pengamatan dan kartu identitas penderita (KTP, SIM). Jenis kelamin ada dua: pria dan wanita 8. Pendidikan Lama pendidikan terakhir dimana subyek tamat sekolah. Dibedakan 9. Tekanan darah Tekanan darah (TD) tinggi ditandai dengan TD mmhg. Dan atau terdapat retinopati hipertensif dan atau terdapat riwayat hipertensi yang dinyatakan oleh penderita atau keluarga serta mendapat obat antihipertensi 10. Gula darah Kenaikan kadar gula darah (GD) yang ditandai dengan: Riwayat menderita DM yang dinyatakan oleh penderita atau keluarga, serta mendapat terapi DM dan atau -Adanya retinopati diabetik 11. Profil lipid darah - Profil lipid darah diperiksa setelah penderita puasa 6-8 jam. - Profil lipid darah abnormal ditandai dengan kadar kolesterol total > 200 mg/dl dan atau trigliserida > 150 mg/dl dan atau kolesterol LDL > 130 mg/dl dan atau kolesterol HDL < 40 mg/dl dan atau riwayat abnormalitas profil lipid darah Catatan medik pasien KTP/SIM Manometer air raksa Catatan medik Alat diagnostik laboratorium di instalasi patologi klinik RSUP Dr. Kariadi Hasil dibaca oleh satu orang dokter spesialis patologi klinik Catatan medik Alat diagnostik laboratorium di instalasi patologi klinik RSUP Dr. Kariadi Hasil dibaca oleh satu orang dokter spesialis patologi klinik Catatan medik

7 65 No. Variabel Batasan operasional Instrumen Skala 12. Merokok Berdasarkan anamnesis, apakah subyek pernah mempunyai kebiasaan merokok 13. Alkohol Positif apabila subyek mempunyai kebiasaan minum alkohol minimal sehari sekali 14. Depresi Positif apabila skala depresi geriatri bernilai lebih atau sama dengan 10 Skala depresi geriatri 3.7. Cara pengumpulan data Data yang dikumpulkan Data primer diperoleh dari seluruh penderita pasca stroke iskemik dengan beberapa karakter menggunakan kuesioner yang terdiri dari data: usia, jenis kelamin, pendidikan, tekanan darah, denyut nadi per menit, frekuensi pernafasan per menit, suhu tubuh, kadar gula darah, kadar lipid darah, letak dan jumlah lesi. Yang diperiksa adalah: 1. Tekanan darah diukur menggunakan manometer air raksa merek anova. 2. Denyut nadi dan frekuensi pernafasan dihitung menggunakan jam. 3. Suhu tubuh diukur menggunakan termometer air raksa. 4. Letak dan jumlah lesi diketahui dengan menggunakan CT scan merek Siemens yang terdapat di bagian Radiologi RSUP Dr. Kariadi dan dibaca oleh dokter Spesialis Radiologi. 5. Dilakukan pemeriksaan laboratorium darah rutin, genotip APOE dan faktor risiko lain: profil lipid darah, gula darah puasa dan gula darah 2 jam post prandial, HbA1c.

8 66 6. Dilakukan pemeriksaan skala depresi menggunakan skala depresi geriatri 7. Dilakukan pemeriksaan fungsi kognitif (modifikasi tes CERAD dan tes CDR) Cara kerja Terhadap seluruh penderita yang masuk dalam kriteria inklusi dilakukan anamnesis baik secara autoanamnesis maupun alloanamnesis (menggunakan SHORT IQ CODE), pemeriksaan fisik, pemeriksaan neurologis, pemeriksaan skala depresi, pemeriksaan fungsi kognitif (menggunakan Modifikasi Tes CERAD) di Poliklinik Saraf RSUP Dr. Kariadi Semarang, dilanjutkan pemeriksaan laboratorium darah rutin, gula darah sewaktu, gula darah puasa dan gula darah 2 jam PP, HbA1c, kolesterol total, kolesterol LDL, kolesterol HDL, trigliserida di Instalasi Laboratorium Rawat Jalan RSUP Dr. Kariadi Semarang. Sampel darah vena kemudian dikirim ke Laboratorium Biologi Molekuler Universitas Gajah Mada Yogyakarta untuk diperiksa genotip alel gen APOE dengan teknik polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR- RFLP). 67,68

9 Alur penelitian Bagan 3.2. Alur kerja penelitian 3.9. Analisis data Pengumpulan data dilakukan secara manual dengan menggunakan kuesioner penelitian yang telah disediakan. Terhadap data yang telah dikumpulkan, dilakukan cleaning, coding, dan tabulasi data, lalu dimasukkan ke dalam komputer. Hasil disajikan dalam bentuk tabel. Analisis univariat untuk melihat deskripsi seluruh data penelitian. Analisis bivariat untuk menguji hubungan genotip gen APOE dengan fungsi kognitif dilakukan uji Chi-square dengan tingkat kepercayaan 95% atau uji. Perbandingan data numerik antara dua kelompok diuji menggunakan uji t tidak berpasangan jika distribusi data normal atau uji Mann-Whitney U jika distribusi data tidak normal, sedangkan perbandingan data numerik lebih dari dua kelompok menggunakan uji one way ANOVA jika distribusi data normal atau uji Kruskal Wallis jika distribusi data

10 68 tidak normal. Penyajian dan analisis dilakukan dengan komputer menggunakan program SPSS for Windows versi 15. Nilai p dianggap bermakna apabila < 0, Etika penelitian APOE dengan Profil Lipid dan Ketebalan Tunika Intima-Media Arteri Karotis ethical clearance dari Komisi Etik Fakultas Kedokteran UNDIP/RSUP Dr. Kariadi Semarang No.005/EC/FK/RSDK/2011 tanggal 17 Januari Kesediaan pasien atau keluarga pasien untuk diikutsertakan dalam penelitian dilakukan secara tertulis (informed consent). Sebelumnya diberikan penjelasan mengenai tujuan dan manfaat penelitian. Seluruh biaya yang berhubungan dengan penelitian merupakan tanggung jawab peneliti. Data identitas pasien akan dirahasiakan dan tidak dipublikasikan tanpa seijin pasien.