LAMPIRAN. Universitas Sumatera Utara

Transkripsi

1 62 LAMPIRAN

2 63 Lampiran 1. Proses Ekstraksi Pengambilankulit batang Pengeringan Penggilingan kulit batang mangrove Proses perendaman Penyaringan Penguapan Hasil ekstrak Penimbangan ekstrak Penyimpanan ekstrak

3 64 Lampiran 2. Proses Pengujian Antibakteri Penimbangan ekstrakpengadukan ekstrak ke dalam ekstrak Perendaman kertas cakram Perbandingan suspensipengolesan suspensi bakteri dengan Mcfarland 10 8 ke dalam media TSA Peletakan kertas cakram ke dalam suspensi bakteri Pengukuran zona bening

4 65 Lampiran3. Proses Pengujian Toksisitas LC50 48 jam Pengisian air ke dalam Penimbangan ekstrak Pemberian ekstrak sesuai akuarium konsentrasi Pengamatan mortalias ikan Pengukuran kualitas air

5 66 Lampiran 4. Penginfeksian, Penghitungan Koloni dan Pengobatan Ikan Pemanenan bakteri Pemindahan ke tabung reaksi Penginfeksian bakteri Uji biokimia Hasil uji biokimia MR (+) Hasil ujibiokimia positif VP (-) citrat Hasil uji biokimia O/FPembedahan ikan Pemindahan ke dalam tub positif fermentatif

6 67 Lampiran 4. Lanjutan Pengukuran sampel Pengadukan sampel dalam Pengenceran sampel media BFP cair Penuangan ke media RS Penghitungan koloni bakteri Pemberian ekstrak untuk pengobatan Pengamatan kelulushidupan ikan

7 68 Lampiran 5. Perhitungan Konsentrasi untuk Uji Antimikroba Ekstrak dengan konsentrasi 60% dibuat dengan melarutkan ekstrak sebanyak 0,6 g dalam 1 ml DMSO. Kemudian diencerkan menjadi konsentrasi 40% dan 20% dalam 0,5 DMSO. Contoh perhitungan pengencerannya adalah sebagai berikut: Pengenceran 40% V1 x N1 = V2 x N2 V1 x 60 = 0,5 x 40 V1 = 20/60 V1 = 0,333 ml atau 333,33 µl diambil dari konsentrasi 60% kemudian diencerkan dengan DMSO sebanyak 166,67 µl sehingga didapatkan konsentrasi 40% sebanyak 0,5 ml Pengenceran 20% V1 x N1 = V2 x N2 V1 x 60 = 0,5 x 20 V1 = 10/60 V1 = 0,166 ml atau 166,66 µl diambil dari konsentrasi 60% kemudian diencerkan dengan DMSO sebanyak 333,34 µl sehingga didapatkan konsentrasi 20% sebanyak 0,5 ml.

8 69 Lampiran 6. Data Awal Zona Hambat Ekstrak Kulit Batang Rhizophora mucronata terhadap Bakteri Edwardsiella tarda Zona hambat pada bakteri Edwardsiella tarda yang diamati selama 24 jam Ekstrak Ulangan Zona hambat 24 jam (mm) 60% 40% 20% Kontrol Metanol U1 18,25 13,20 8,15 U2 19,50 14,50 9,85 U3 19,35 14,15 10,15 N-heksana U U U Eti asetat U1 15,15 7,40 4,25 U2 18,50 10,75 5,87 U3 14,35 7,65 4,15 Kloramfenikol U1 37,50 U2 39,51 U3 38,50 DMSO U1 0 U2 0 U3 0

9 70 Lampiran 7. Tabel Probit Persentase Probit ,67 2,95 3,12 3,25 3,36 3,45 3,52 3,59 3, ,72 3,77 3,82 3,87 3,92 3,96 4,01 4,05 4,08 4, ,16 4,19 4, ,29 4,33 4,36 4,39 4,442 4, ,48 4,5 4,53 4,56 4,59 4,61 4,64 4,67 4,69 4, ,75 4,77 4,8 4,82 4,85 4,87 4,9 4,92 4,95 4, ,03 5,05 5,08 5,1 5,13 5,15 5,18 5,2 5, ,25 5,28 5,31 5,33 5,36 5,39 5,41 5,44 5,47 5,5 70 5,52 5,55 5,58 5,61 5,64 5,67 5,71 5,74 5,77 5, ,84 5,88 5,92 5,95 5,99 6,04 6,08 6,13 6,18 6, ,28 6,34 6,41 6,48 6,55 6,64 6,75 6,88 7,05 7, ,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 7,33 7,37 7,41 7,46 7,51 7,58 7,65 7,75 7,88 8,09

10 71 Tabel 8. Data Pengamatan Mortalitas Ikan Mas Pada Uji LC50 48 jam Ulangan Konsentrasi Jam Ke (ppm)

11 72 Lampiran 9. Perhitungan LC50 Ekstrak Kulit Batang Rhizophora mucronata dengan Pelarut Metanol Konsentrasi (ppm) Total Populasi Jumlah Kematian Persen Mortalitas (%) Log Konsentrasi Probit , ,67 1,47 4, ,69 8, ,87 8,09 LC50 (ppm) 39,30 Contoh perhitungan persen mortalitas pada ekstrak metanol dengan konsentrasi 30 ppm Persen mortalitas = Jumlah Ikan yang mati x 100% Jumlah populasi = 14/30 x 100 % = 46,67 % Kurva hubungan log konsentrasi versus nilai probit ekstrak etil asetat: Nilai Probit Ekstrak Metanol y = 15,36x - 19,49 R² = 0,7583 Log Konsentrasi Dari grafik hubungan antara log konsentrasi (sumbu x) dengan nilai probit sumbu y didapatkan persamaan y = 15,36x 19,49 dan R² = 0,7583 Penentuan LC50 (Konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian sebesar 50 %)

12 73 50% nilai probit (y) = 5 (dilihat dari table probit), x = log konsentrasi. Perhitungan LC50 dari persamaan regresi y = 15,36x 19,49 dan R² = 0,7580 adalah sebagai berikut: 5 = 15,36x 19,49 x = (5 (-19,49) / 15,36 x = 1, anti log dari x = 1, LC50 = 39,30 ppm

13 74 Lampiran 10. Data Kelulushidupan Benih Ikan Mas Setelah Diinfeksi Bakteri dan Pasca Perendaman Ekstrak Konsentrasi ekstrak Setelah Diinfeksi Ikan yang hidup Setelah Perendaman U1 U2 U3 U1 U2 U3 Kontrol negatif Kontrol positif Ekstrak 2,86 ppm Ekstrak 3,93 ppm Keterangan : Kontrol negatif : tidak diinfeksi bakteri dan tidak direndam ekstrak Kontrol positif : diinfeksi bakteri tanpa direndam ekstrak

14 75 Lampiran 11. Tabel Analisis ANOVA Anova: Two-Factor With Replication Kontrol negatif Kontrol positif Ekstrak 2,86 ppm Ekstrak 3,93 ppm SUMMARY Total Setelah diinfeksi Count Sum Average , , , Variance 0 1 0, , , Setelah perendaman Count Sum Average 10 0, , , Variance 0 1, , , Total Count Sum Average 10 3, , Variance 0 12, ,4 2, ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Sample 7, , ,9 0, , Columns 127, , , ,21598E-10 3, Interaction 64, , , ,90433E-08 3, Within 6, , Total 205,625 23

15 76 Lampiran 12. Perhitungan dan Proses Pengenceran Bakteri Jumlah Koloni Jumlah Bakteri (CFU/ml) Sebelum Sesudah ,5 x ,1 x ,3 x ,8 x ,0 x Rata-rata 2,18 x ,32 x ml 1ml 1 ml Sampel organ masing-masing berisi 9 ml BFP cair 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

16 77 Lampiran 13. Pengukuran Kualitas Air Pada Pagi dan Sore Selama Pengamatan Pagi Sore Hari Suhu DO Suhu DO ke- ( o ph C) (ppm) ( o ph C) (ppm) ,5 6,5 29 5,7 6, ,6 6,5 28 5,7 6, ,5 6,5 28 5,7 6, ,5 6,5 27 5,8 6, ,5 6,5 27 5,8 6, ,6 6,7 28 5,7 6, ,5 6,7 27 5,7 6, ,7 6,5 29 5,8 6, ,5 6,5 29 5,8 6, ,7 6,5 29 5,8 6, ,6 6,5 29 5,7 6, ,5 6,7 29 5,8 6, ,5 6,7 28 5,7 6, ,6 6,7 27 5,8 6, ,7 6,7 28 5,7 6, ,5 6,7 29 5,7 6, ,6 6,5 29 5,7 6, ,6 6,5 28 5,7 6, ,5 6,5 29 5,7 6, ,6 6,5 28 5,8 6,7