Menentukan Waktu Retensi pada Senyawa Antagonis H 2 dengan variasi Fase Gerak secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( KCKT )

Transkripsi

1 Menentukan Waktu Retensi pada Senyawa Antagonis H 2 dengan variasi Fase Gerak secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( KCKT ) SKRIPSI OLEH : WULAN NINGRUM S NIM FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2010

2 Menentukan Waktu Retensi pada Senyawa Antagonis H 2 dengan variasi Fase Gerak secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( KCKT ) SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai Gelar Sarjana Farmasi pada Falkutas Farmasi OLEH: WULAN NINGRUM S NIM FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2010

3 LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI Menentukan Waktu Retensi pada Senyawa Antagonis H 2 dengan variasi Fase Gerak secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( KCKT ) OLEH: WULAN NINGRUM S NIM Dipertahan di hadapan Panitia Penguji Falkutas Farmasi Pada tanggal : November 2010 Pembimbing I, Panitia Penguji, (Drs. Ismail, M.Si. Apt.) (Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, SU., Apt.) NIP NIP Pembimbing II, (Prof. Dr. Siti Morin Sinaga., M.Sc. Apt.) NIP (Prof.Dr.rer.nat.Effendy DeluxPutra,SU,Apt) NIP (Drs. Muchlisyam, M.Si., Apt.) NIP (Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt) NIP Medan, Oktober 2010 Falkutas Farmasi Dekan, (Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.) NIP

4 KATA PENGHANTAR Puji dan syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan ridho Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi ini. Terima kasih dan hormat yang tulus dan sebesar besarnya kapada Ayahanda dan Ibunda serta kakak dan adikku tersayang yang telah mendukung, memberi dorongan semangat, dan doa yang tak henti hentinya kepada penulis untuk menyelesaikan studi serta demi kesuksesan penulis. Penulis juga mengucapkan terima kasih yang sebesar besarnya kepada Bapak Drs. H. Ismail, MSi., Apt. dan Bapak Prof. Dr. rer. Nat. Effendy De Lux Putra, SU., Apt., yang telah membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Bapak dekan FMIPA USU, Ketua dan Sekretaris Departemen Farmasi FMIPA USU, yang telah memberikan fasilitas kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan pendidikan. Ibu Dra. Salesa Salbi,Msi., Apt, selaku dosen wali yang telah membimbing penulis selama masa perkuliahan. Bapak dan Ibu staf pengajar Departemen Farmasi FMIPA USU yang telah mendidik penulis hingga menyelesaikan pendidikan. Bapak Kepala Laboratorium Kimia Farmasi Kuantitatif beserta staf yang telah banyak memberikan fasilitan dan bantuan selama penelitian. Teman teman mahasiswa / I Jurusan Farmaasi khususnya Angkatan 2007 yang telah memberikan bantuan dan dorongan kepada penulis selama perkuliahan maupun penelitian hingga selesainya pendidikan.

5 Semoga Allah SWT selalu melindungi dan melimpahkan rahmatnya kepada kita semua. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat menjadi sumbangan yang berarti bagi ilmu pengetahuan khususnya dibidang farmasi. Medan, November 2010 Penulis ( Wulan Ningrum S )

6 Menentukan Waktu Retensi pada Senyawa Antagonis H 2 dengan variasi Fase Gerak secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( KCKT ) ABSTRAK Telah dilakukan studi penetapan harga koefisien partisi atau pengukuran waktu retensi senyawa senyawa antihistamin H 2 yaitu Simetidin, Ranitidin, Famotidin dengan variasi fase gerak A (Simetidin), fase gerak B (Ranitidin), dan fase gerak C (Famotidin) dengan metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui apakah harga koefisien partisi atau pengukuran waktu retensi dapat ditentukan dengan menggunakan metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT), membandingkannya dengan fase gerak A, B, dan C, membandingkan dengan peneliti sebelumnya (Vonna, 2006) dan program Chem Draw. Dari hasil penelitian diperoleh waktu retensi atau harga koefisien partisi senyawa antihistamin H 2 yang terbesar dengan menggunakan fase gerak A dibandingkan fase gerak B dan fase gerak C yaitu simetidin baku (Fase Gerak A = 2226), (Fase gerak B = 1,647 ), dan Fase Gerak C = 1,777. Simetidin generik (Fase gerak A = 2,312), (Fase gerak B = 1,642), dan (fase gerak C = 1,913). Omekur ( Fase gerak A = 2,204), (Fase gerak B = 1,647), dan (Fase gerak C = 1,869). Ranitidin baku (Fase gerak A = 1,829), (Fase gerak B = 1,642), dan (Fase gerak C = 1,842), Ranitidin generik (Fase gerak A = 1,925), (Fase gerak B = 1,642), dan (Fase gerak C = 1,870). Omeranin (Fase gerak A = 1,834), (Fase gerak B = 1,646), dan (Fase gerak C = 1,870). Famotidin baku (Fase gerak A = 2,150), Fase gerak B = 1,503), dan (Fase gerak C = 1,766), Famotidin generik

7 (Fase gerak A = 2,044), (Fase gerak B = 1,504), dan Fase gerak C = 1,871). Pratifar ( Fase gerak A = 2,114), (Fase gerak B = 1,503), dan (Fase gerak C = 1,870). Peneliti sebelumnya (Vonna, 2006) telah melakukan penelitian tentang penentuan nilai log P sediaan bahan baku antihistamin - H 2 yaitu : Simetidin (Log P = -0,307), Rantitidin (Log P = -1,328), Famotidin (Log P = -0,946) dengan penggojokan sistem oktanol-air yang dianalisis secara spektrofotometri ultraviolet. Dari hasil penelitian yang diperoleh adalah Simetidin mempunyai nilai Log P (Koefisien Partisi) yang lebih besar sedangkan dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) waktu retensi pada fase gerak A (Simetidin) lebih besar dimana harga koefisien partisi senyawa antihistamin H 2 yang terbesar adalah Simetidin, yang berarti senyawa tersebut mempunyai kelarutan dalam lemak yang paling besar dibandingkan senyawa antihistamin lain yang diuji. Tetapi berdasarkan program (Chem Draw) penentuan nilai log P sediaan bahan baku antihistamin H 2 yaitu : Simetidin (Log P = 0,79), Ranitidin (Log P = 1,2), Famotidin (Log P = -0,03) dimana harga koefisien partisi senyawa antihistamin H 2 yang terbesar adalah Ranitidin disebabkan karena dalam bentuk base yang larut dalam fase non polar, bukan dalam bentuk garamnya yaitu Ranitidin HCI yang lebih mudah larut dalam fase polar.

8 ABSTRAC This is a study that to determine the partition coefficients or to measure retensi time of antihistamin H 2 compounds, which are simetidin, ranitidine, famotidin with variation mobile fase A ( cimetidine ), B( ranitidine ), and C ( famotidine ) with High Performance Liquid Chromatographi ( HPLC ) methode The aim of this study is to know wheather the value of partition coefficients or measure retensi time can be determine by method High Performance Liquid Chromatographi (HPLC), to compare with fase gerak a, b, dan c, to compare with the last scientist ( Azizah Vonna, 2006 ) and the program Chem Draw. The result of research show that retensi time or value partition coefficient of antihistamine H 2 the good with use mobile fase A than mobile fase B and C is cimetidin (mobile fase A = 2226), (mobile fase B = 1,647 ), dan (mobile fase C = 1,777). cimetidin generic (mobile fase A = 2,312), (mobile fase B = 1,642), dan (mobile fase C = 1,913). Omekur (mobile fase A = 2,204), (mobile fase B = 1,647), dan (mobile fase C = 1,869). Ranitidin (mobile fase A = 1,829), (mobile fase B = 1,642), dan (mobile fase C = 1,842), Ranitidin generic (mobile fase A = 1,925), (mobile fase B = 1,642), dan (mobile fase C = 1,870). Omeranin (mobile fase A = 1,834), (mobile fase B = 1,646), dan (mobile fase C = 1,870). Famotidin (mobile fase A = 2,150), (mobile fase B = 1,503), dan (mobile fase C = 1,766), Famotidin generic (mobile fase A = 2,044), (mobile fase B = 1,504), dan (mobile fase C = 1,871). Pratifar (mobile fase A = 2,114), (mobile fase B = 1,503), dan (mobile fase gerak C = 1,870). The last scientist ( Azizah Vonna ) have done this research about to determine the partition coefficient of antihistamin H 2 is cimetidin ( Log P = -0,307 ), rantitidin ( Log P = -1,328 ), famotidin ( Log P = -0,946 )with by using octanol-water system mixing methode. The result of research show cimetidine have value of partition coefficient is more biggest whereas with High Performance Liquid Chromatographi (HPLC) retensi time of mobile fase A (cimetidine ) more biggest where value of partition coefficient antihistamine H 2 compound the biggest is cimetidine But based on Chem Draw to determine value partition coefficient of antihistamine H2 compound is cimetidine ( Log P = 0,79 ), ranitidine ( Log P = 1,2), famotidine ( Log P = -0,03 ) where value partition coefficient antihistamine H 2 compound is biggest ranitidine.

9 JUDUL DAFTAR ISI HALAMAN PENGESAHAN ABSTRAK.. ABSTRAC DAFTAR ISI HALAMAN DAFTAR TABEL vi DAFTAR GAMBAR viii DAFTAR LAMPIRAN x BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Perumusan Masalah Hipotesis Tujuan 3 BAB II METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Pelaksanaan Alat Bahan Pengambilan Sampel Pola Penelitian Pengujian Bahan Baku secara Spektrofotometri Ultraviolet Simetidin Ranitidin Famotidin Penetapan Koefisien Partisi Simetidin Ranitidin Famotidin Analisa Data Secara Statistik. 9 BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN Penetapan Uji Bahan Baku Pengukuran Waktu Retensi 15 BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran 40 DAFTAR PUSTAKA 41 LAMPIRAN. 43 i ii iv v

10 DAFTAR TABEL Tabel 1. Data waktu retensi dengan variasi fase gerak 15 Tabel 2. Tabel Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan baku dengan KCKT pada fase gerak A.. 20 Tabel 3. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan generik dengan KCKT pada fase gerak A 21 Tabel 4. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi merek dagang dengan KCKT pada fase gerak A 22 Tabel 5. Tabel Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan baku dengan KCKT pada fase gerak B 23 Tabel 6. Tabel Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan generik dengan KCKT pada fase gerak B.. 24 Tabel 7. Tabel Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi merek dagang dengan KCKT pada fase gerak B 25 Tabel 8. Tabel Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan baku dengan KCKT pada fase gerak C. 26 Tabel 9. Tabel Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan generik dengan KCKT pada fase gerak C 27 Tabel 10. Tabel Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi merek degang dengan KCKT pada fase gerak C.28 Tabel 11. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan baku secara KCKT pada fase gerak A 29 Tabel 12. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan generik secara KCKT pada fase gerak A.. 29 Tabel 13. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi merek dagang secara KCKT pada fase gerak A 30 Tabel 14. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori ( Cham Draw ) dan waktu retensi bahan baku secara KCKT pada fase gerak B. 31 Tabel 15. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan generik secara KCKT pada fase gerak B.. 32 Tabel 16. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi merek dagang secara KCKT pada fase gerak B. 33 Tabel 17. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan baku secara KCKT pada fase gerak C Tabel 18. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan generik secara KCKT pada fase gerak C 35 Tabel 19. Tabel Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi merek dagang secara KCKT pada fase gerak C.. 36 Tabel 20. R 2 Penggojokan secara Spektrofotometri dan waktu retensi secara KCKT.. 38 Tabel 21. R 2 Cham Draw ( Teori ) dan waktu retensi secara KCKT. 38

11 DAFTAR GAMBAR HALAMAN Gambar 1. Kurva serapan Simetidin dengan konsentrasi 6 µg per ml dan panjang gelombang maksimum secara spektrofotometri ultraviolet Gambar 2. Kurva serapan Rantidin HCI dengan konsentrasi 9 µg per ml dan panjang gelombang maksimum secara spektrofotometri ultraviolet. 13 Gambar 3. Kurva serapan Famotidin dengan konsentrasi 10 µg per ml dan panjang gelombang maksimum secara spektrofotometri ultraviolet. 14 Gambar 4. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan retensi time bahan baku dengan KCKT pada fase gerak A. 20 Gambar 5. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan generik dengan KCKT pada fase gerak A. 21 Gambar 6. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi merek dagang dengan KCKT pada fase gerak A.. 22 Gambar 7. Log P (koefisien partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan baku dengan KCKT pada fase gerak B 23 Gambar 8. Log P ( koefisien partisi ) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan generik dengan KCKT pada fase gerak B.. 24 Gambar 9. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi merek dagang dengan KCKT pada fase gerak B.. 25 Gambar 10. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan baku dengan KCKT pada fase gerak C. 26 Gambar 11. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi bahan generik dengan KCKT pada fase gerak C. 27 Gambar 12. Log P (Koefisien Partisi) bahan baku dengan penggojokan dan waktu retensi merek dagang dengan KCKT pada fase gerak C. 28 Gambar 13. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan baku secara KCKT pada fase gerak A 29 Gambar 14. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan generi secara KCKT pada fase gerak A 30 Gambar 15. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi merek dagsecara KCKT pada fase gerak A. 31 Gambar 16. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan baku secara KCKT pada fase gerak B 32 Gambar 17. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan generik secara KCKT pada fase gerak B 33 Gambar 18. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi merek dagang secara KCKT pada fase gerak B.. 34 Gambar 19. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan baku secara KCKT pada fase gerak C.. 35

12 Gambar 20. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi bahan generik secara KCKT pada fase gerak C 36 Gambar 21. Log P (Koefisien Partisi) secara teori dan waktu retensi merek dagang secara KCKT pada fase gerak C 37

13 DAFTAR LAMPIRAN HALAMAN Lampiran 1. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Simetidin bahan baku pada fase gerak A.. 42 Lampiran 2. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Simetidin bahan generik pada fase gerak A 44 Lampiran 3. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Omekur pada fase gerak A. 46 Lampiran 4. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Ranitidin bahan aku pada fase gerak A. 48 Lampiran 5. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Ranitidin bahan generik pada fase gerak A.. 50 Lampiran 6. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Omeranin pada fase gerak A. 52 Lampiran 7. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Famotidin bahan baku pada fase gerak A 54 Lampiran 8. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Famotidin bahan generik pada fase gerak A 56 Lampiran 9. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Pratifar pada fase gerak A. 58 Lampiran 10. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Simetidin bahan baku pada fase gerak B. 60 Lampiran 11. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Simetidin bahan generik pada fase gerak B. 62 Lampiran 12. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Omekur pada fase gerak B Lampiran 13. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Ranitidin bahan baku pada fase gerak B 66 Lampiran 14. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Ranitidin bahan generik pada fase gerak B 68 Lampiran 15. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Omeranin pada fase gerak B.. 70 Lampiran 16. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Famotidin bahan baku pada fase gerak B Lampiran 17. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Famotidin bahan generik pada fase gerak B 74 Lampiran 18. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Pratifar pada fase gerak B. 76 Lampiran 19. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Simetidin bahan baku pada fase gerak C 78 Lampiran 20. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Simetidin bahan generik pada fase gerak C 80 Lampiran 21. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Omekur pada fase gerak C.. 82 Lampiran 22. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Ranitidin bahan baku pada fase gerak C. 84 Lampiran 23. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Ranitidin bahan generik pada fase gerak C 86

14 Lampiran 24. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Omeranin pada fase gerak C 88 Lampiran 25. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Famotidin bahan baku pada fase gerak C. 90 Lampiran 26. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Famotidin bahan generik pada fase gerak C. 92 Lampiran 27. Analisa data statistik waktu retensi ( Log P ) sediaan Pratifar pada fase gerak C. 94 Lampiran 28. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Simetidin, Ranitidin, Famotidin dengan menggunakan fase gerak A ( Simetidin ) pada konsentrasi 10 mcg / ml, yang dianalisis secara KCKT pada λ 220 nm, kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm), fase gerak metanol : campuran air-asam fosfat (1 : 4) laju alir 2,0 ml/menit Lampiran 29. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Simetidin, Ranitidin, Famotidin dengan menggunakan fase gerak B ( Ranitidin ) pada konsentrasi 112 mcg / ml, yang dianalisis secara KCKT pada λ 322 nm,kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm), fase gerak Metanol : Amonium asetat 0,1 M (70 : 30) laju alir 2,0 ml/menit Lampiran 30. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Simetidin, Ranitidin, Famotidin dengan menggunakan fase gerak C ( Famotidin ) pada konsentrasi 100 mcg / ml, yang dianalisis secara KCKT pada λ 275 nm, kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm), fase gerak larutan buffer : Acetonitril (93 : 7) laju alir 1,4 ml/menit Lampiran 31. Gambar alat KCKT dan syringe 100 µl Lampiran 32. Gambar alat ultrasonic cleaner dan penyaring