LAMPIRAN. Lampiran 1. Alur Kerja Isolasi Rhizobium dari Bintil Akar

Transkripsi

1 LAMPIRAN Lampiran 1. Alur Kerja Isolasi Rhizobium dari Bintil Akar Bintil akar Dicuci dengan akuades steril Dimasukkan ke dalam botol vial steril Direndam dengan akuades steril selama 5 menit Direndam dengan alkohol 96% selama 10 detik Direndam dengan klorox 5,25% selama 10 detik Dibilas dengan akuades steril sebanyak 4 kali Ditiriskan Bintil akar steril Diambil ± 6 buah Dimasukkan ke dalam petri steril Dipencet dengan spatula Ditambahkan 1 ml aquadest steril Suspensi bakteri Hasil Diambil sebanyak 0,1 ml dengan pipetman Diisolasi ke media YMA + Congo Red steril dengan metode cawan sebar Diinkubasi selama jam pada suhu 28 o C

2 Lampiran 2. Alur Kerja Uji Nodulasi Tanah Isolat Rhizobium Disterilisasi pada suhu Diambil sebanyak 1 ose 121 o C, 15 psi selama 3x30 Diinokulasi ke dalam 10 menit dengan selang waktu ml media YMB 24 jam Dishaker selama 12 jam dengan kecepatan 150 Dibagi ke dalam polybag rpm Kultur cair Media tanam Ditanam pucuk P. javanica yang telah disterilisasi permukaannya dengan klorox dan dibilas dengan akuades steril Diamati bintil akar yang terbentuk pada minggu ke-8 Hasil

3 Lampiran 3. Uji Daya Hidup pada Medium Pembawa Medium pembawa Isolat Rhizobium Disterilisasi pada suhu Diambil sebanyak 1 ose 121 o C, 15 psi selama 3x30 Diinokulasi ke dalam 10 menit dengan selang waktu ml media YMB 24 jam Dishaker selama 12 jam Ditambahkan CaCO3 dengan kecepatan 150 sampai ph netral rpm Dibagi ke dalam wadah plastik masing-masing sebanyak 100g Diinkubasi Kultur cair Medium pembawa Hasil Diambil sebanyak 1g Dimasukkan ke dalam tabung reaksi steril Ditambahkan akuades sampai 10ml -6 Dilakukan pengenceran sampai 10 Diambil 0,1 ml dari pengenceran terakhir Dimasukkan ke dalam tabung berisi 5 ml media YMA yang masih cair Dihomogenkan dengan vortex Dituang ke dalam petri steril Diinkubasi selama 24 jam Dihitung jumlah koloni yang tumbuh

4 Lampiran 4. Faktor Fisik Lokasi Pengambilan Sampel Faktor fisik lokasi pengambilan sampel Lokasi Tekstur Tanah ph Tanah Suhu Tanah Status Inokulasi Kebun Kelapa Sawit Tanah kering 6 27 o C Belum pernah Sei Aek Pancur diinokulasi Kebun Kelapa Sawit Tanah berpasir o C Belum pernah Marihat diinokulasi Kebun Kelapa Sawit Universitas Sumatera Utara Tanah kering/keras o C Belum pernah diinokulasi

5 Lampiran 5. Tabel Jumlah Sel Hidup/g Medium Pembawa (10 7 ), Tabel Jumlah Sel Hidup (10 7 )/g Medium Pembawa Setelah Diduga Data yang Hilang dengan Teknik Iterasi dan Tabel Jumlah Sel Hidup/g Medium Pembawa (transformasi log) pada Medium Pembawa Tanah Gambut Tabel jumlah sel hidup/g medium pembawa (10 7 ) pada medium pembawa tanah gambut Kode Jumlah sel hidup (10 7 )/g medium pembawa setelah minggu ke- Isolat U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 AP AP AP AP M M M M U U

6 Tabel jumlah sel hidup (10 7 )/g medium pembawa setelah diduga data yang hilang dengan teknik iterasi pada medium pembawa tanah gambut Kode Jumlah sel hidup (10 7 )/g medium pembawa setelah minggu ke- Isolat U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 AP AP AP AP M M M M U U

7 Tabel jumlah sel hidup/g medium pembawa (transformasi log) pada medium pembawa tanah gambut Kode Jumlah sel hidup/g medium pembawa (transformasi log) setelah minggu ke- Isolat U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 AP , AP ,000 9, AP AP M M , M , M , U U

8 Lampiran 6. Tabel Kombinasi Perlakuan RAL faktorial 10x5x3, Tabel Dwikasta I x T, Sidik ragam 10x5x3, Tabel Uji Duncan Faktor Waktu Penyimpanan Kombinasi perlakuan RAL faktorial 10x5x3 Kombinasi Jumlah sel hidup (Transformasi Log)/gr Total Rataan Perlakuan medium pembawa Ulangan AP1T AP1T AP1T AP1T AP1T AP2T AP2T AP2T AP2T AP2T AP3T AP3T AP3T AP3T AP3T AP4T AP4T AP4T AP4T AP4T M1T M1T M1T M1T M1T M2T M2T M2T M2T M2T M3T M3T M3T M3T M3T M4T M4T M4T M4T

9 M4T U1T U1T U1T U1T U1T U2T U2T U2T U2T U2T Total FK = JK Total = JK Perlakuan = Tabel dwikasta I x T Kode Isolat Jumlah sel hidup (Transformasi Log)/gr medium pembawa Total T0 T1 T2 T3 T4 AP AP AP AP M M M M U U Total JKI = JKT = JK IXT = JK Galat = 8.491

10 Tabel Sidik Ragam 10x5x3 Fh% SK DB JK KT Fh 5% 1% Perlakuan ** I ** T ** IxT ** Galat Total Keterangan: * (berbeda nyata) ** (berbeda sangat nyata) Tabel uji duncan faktor waktu penyimpanan Perlakuan Rataan Notasi T0 8,940 a T1 8,670 c T2 8,579 c T3 8,648 c T4 8,894 a

11 Lampiran 7. Tabel Interaksi Jumlah Sel Hidup/g Medium Pembawa (x10 7 ) pada Medium Pembawa Tanah Gambut Kode Isolat Rataan jumlah sel hidup/g medium pembawa (x10 7 ) setelah minggu ke AP1 abcd 167,0 abcdef 168,3 fghi 53,3 bcdefgh 99,7 166,7 AP2 cdefghi 53,0 cdefghi 51,3 bcdef 78,0 ij 37,7 48,0 AP3 62,7 cdefghi 54,7 ghi 36,3 ghi 44,7 69,0 AP4 77,3 ghi 42,0 defghi 23,5 hij 64,0 52,7 M1 207,0 efghi 43,7 fghi 40,3 ij 16,0 130,0 M2 165,7 abcdef 151,7 defghi 136,7 abcdef 174,7 157,0 M3 94,3 bcdefgh 73,0 bcdefgh 71,3 ghi ,7 M4 35,0 jk 5,3 k 4,7 bcdefgh 61,3 63,3 U1 171,0 abc 170,7 ab 170 a 255,3 158,0 U2 100,0 ghi 70,3 efghi 40,3 bcdefgh 186,0 ghi 35,7 abc defghi bcdefgh cdefghi abcde abcd bcdef cdefghi abcde Angka yang diikuti huruf yang sama pada baris menunjukkan tidak berbeda nyata dengan uji DNMRT pada taraf 5%.

12 Lampiran 8. Tabel Jumlah Sel Hidup/g Medium Pembawa (10 7 ), Tabel Jumlah Sel Hidup (10 7 )/g Medium Pembawa Setelah Diduga Data yang Hilang dengan Teknik Iterasi, dan Tabel Jumlah Sel Hidup/g Medium Pembawa (transformasi log) pada Medium Pembawa Kompos Tandan Kosong Kelapa Sawit Tabel jumlah sel hidup/g medium pembawa (10 7 ) pada medium pembawa kompos tandan kosong kelapa sawit Kode Jumlah sel hidup (10 7 )/g medium pembawa setelah minggu ke- Isolat U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 AP AP AP AP M M M M U U

13 Tabel jumlah sel hidup (10 7 )/g medium pembawa setelah diduga data yang hilang dengan teknik iterasi pada mediumpembawa kompos tandan kosong kelapa sawit Kode Isolat Jumlah sel hidup (10 7 )/g medium pembawa setelah minggu ke U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 AP AP AP AP M M M M U U

14 Tabel jumlah sel hidup/g medium pembawa (transformasi log) pada medium pembawa kompos tandan kosong kelapa sawit Kode Jumlah sel hidup (10 7 )/g medium pembawa setelah minggu ke- Isolat U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 U1 U2 U3 AP AP AP , AP M , , M , M M U , U ,000

15 Lampiran 9. Tabel Kombinasi Perlakuan RAL faktorial 10x5x3, Tabel dwikasta I x T, Sidik Ragam 10x5x3, dan Tabel Uji Duncan Faktor Waktu Penyimpanan Kombinasi perlakuan RAL faktorial 10x5x3 Kombinasi Jumlah sel hidup (transformasi log)/gr Total Rataan Perlakuan medium pembawa Ulangan AP1T AP1T AP1T AP1T AP1T AP2T AP2T AP2T AP2T AP2T AP3T AP3T AP3T AP3T AP3T AP4T AP4T AP4T AP4T AP4T M1T M1T M1T M1T M1T M2T M2T M2T M2T M2T M3T M3T M3T M3T M3T M4T M4T M4T M4T

16 M4T U1T U1T U1T U1T U1T U2T U2T U2T U2T U2T Total FK = JK Total = JK Perlakuan = Tabel Dwikasta IxT Kode Isolat Jumlah sel hidup (Transformasi Log)/gr medium pembawa Total T0 T1 T2 T3 T4 AP AP AP AP M M M M U U Total JKI = JKT = JK IXT = JK Galat = 5.853

17 Tabel sidik ragam 10x5x3 SK DB JK KT Fh Fh% 5% 1% Perlakuan ** I ** T * IxT ** Galat Total Keterangan: * (berbeda nyata) ** (berbeda sangat nyata) Tabel Uji Duncan Faktor Waktu Penyimpanan Perlakuan Rataan Notasi T0 8,829 a T1 8,695 b T2 8,815 ab T3 8,917 a T 8,864 4 a

18 Lampiran 10. Tabel Interaksi Jumlah Sel Hidup/g Medium Pembawa (10 7 ) pada Medium Pembawa Kompos Tandan Kosong Kelapa Sawit Kode Isolat Rataan jumlah sel hidup/g medium pembawa (x10 7 ) setelah minggu ke AP1 defghijkl 62,0 defghijkl 58,7 fghijklm 50,3 abcdef 141,3 76,0 AP2 hijklm 40,7 klm 28,3 abcdefgh 131,3 abcdefghij 138,7 klm 33,7 AP3 59,0 m 19,0 fghijklm 97,7 cdefghijkl 77,7 139,3 AP4 24,7 ghijklm 54,7 fghijklm 79,7 abcdefghij 98,3 58,7 M1 105,7 abcdefghi 114,3 hijklm 55,3 ijklm 40,0 55,3 M2 77,0 fghijklm 51,3 ijklm 37,0 bcdefghijk 90,3 169,3 M3 95,3 ijklm 57,7 defghijkl 76,7 cdefghijkl 82,7 30,7 M4 87,3 cdefghijkl 69,7 abcdefg 129,5 cdefghijkl 108,0 162,7 U1 173,3 abcde 168,0 abcdefg 128,0 a 205,3 ab 180,0 U2 68,3 ghijklm 47,0 abcdefg 108,7 abcdefghi 175,3 76,7 bcdefghijk abcdefgh efghijkl ijklm abc jklm abcd bcdefghijkl Angka yang diikuti huruf yang sama pada baris menunjukkan tidak berbeda nyata dengan uji DNMRT pada taraf 5%.

19 Lampiran 11. Foto-foto penelitian Pengukuran faktor fisik lokasi pengambilan sampel Uji nodulasi isolat Rhizobium terhadap P. javanica Penghitungan jumlah sel hidup dengan metode SPC Medium pembawa Sumber: Kelti Bioteknologi Tanaman Pusat Penelitian Kelapa Sawit Marihat