IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR ZAT WARNA MERAH DALAM DAWET YANG DIJUAL DI SEPANJANG JALAN "X" SECARA KLT DENSITOMETRI OLEH: LANNI WIJAYA

Transkripsi

1 IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR ZAT WARNA MERAH DALAM DAWET YANG DIJUAL DI SEPANJANG JALAN "X" SECARA KLT DENSITOMETRI OLEH: LANNI WIJAYA NRP No. INDUK T~L-T~ERI-MA 8.J..C'bG ( o I. f7. }1... OJ No. BUKU FF W[/ f-1 KC.rtl ICE { (.SC(fU) FAKULTAS FARMASI UNIVE~ITAS KATOLIK WIDYA MAN-DALA SURABAYA Januari 2001

2 IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR ZA T WARNA MERAH DALAM DA WET YANG DIJUAL DI SEPANJANG JALAN "X" SECARA KL T DENSITOMETRI SKRIPSI Diajukan kepada Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Sains PBRPU"T K~4' i UniYerdt>~a "'-&rohlr Widya lvil!\.udaim S, K 'BAY-\ Oleh: LANNIWIJAYA NIUP. : FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA Januari 2001

3 LEMBAR PERSETUJUAN Naskah skripsi berjudul ldentifikasi dan Penetapan Kadar Zat Warna Merah dalam Dawet Yang dijual di Sepanjang Jalan "X" Secara KLT Densitometri yang ditulis oleh Lanni Wijaya telah disetujui dan diterima untuk diajukan ke Tim Penguji. Pembirnbing I Dra. Andjar Sardjirnah, MS, Apt. Pernbirnbing II Dra. Siti Surdijati, MS, Apt.

4 LEMBAR PENGESAHAN Skripsi yang ditulis oleh LANNI WUA Y A NRP Telah disetujui pada tanggal 11 Januari 2001 dan dinyatakan LULUS oleh Ketua Tim Penguji : Drs. H. A. Inoni, Apt. Mengetahui Dekan,

5 KATAPENGANTAR Segala hormat, puji syukur dan kemuliaan hanya bagi Tuhan Y esus Kristus dan Bunda Maria atas segala rahmat dan kemurahannya kepada saya sehingga saya dapat menyelesaikan skripsi yang dibuat sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains pada Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Pada kesempatan ini perkenankan saya untuk menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Dra. Andjar Sardjimah, MS. Apt. dan Dra. Siti Surdijati, MS. Apt. sebagai pembimbing skripsi, yang telah menyediakan waktu dan tenaga, memberikan sumbangan pikiran dan pengarahan dari awal hingga selesainya penyusunan skripsi ini. 2. Drs. H.A. Inoni, Apt.; Dra. Emi Sukarti, MS. Apt. dan Drs. Engkun Kuswono, Apt. sebagai penguji yang telah memberikan saran dan masukan yang sangat berguna bagi penyelesaian skripsi ini. 3. Pimpinan Fakultas Farmasi beserta seluruh staf pengajar dan seluruh karyawan Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya yang telah mendidik dan membimbing saya selama menuntut ilmu di bangku kuliah dan memberikan bantuan dan kemudahan dalam penyediaan fasilitas selama penelitian.

6 4. lbu Karyadi Wijaya, Mama tercinta yang telah banyak berkorban untuk saya, memberikan semangat doa dan dukungan baik moril maupun materiil untuk studi saya maupun untuk kehidupan saya. 5. Martadi Sutikno, pendamping hidup saya yang telah mendukung sepenuhnya usaha saya dan studi saya, memberikan semangat dan doa untuk keberhasilan dan hidup saya. 6. Kristina Wijaya, adik saya yang telah mendukung sepenuhnya usaha saya selama ini. 7. Sahabat-sahabat, ternan-ternan dan semua pihak yang telah memberikan dukungan, semangat dan doa selama pelaksanaan orientasi maupun penelitian skripsi. Semoga penelitian ini dapat memberikan sumbangan yang bermanfaat bagi masyarakat luas pada umumnya dan ilmu kefarmasian pada khususnya. Saya sadar sepenuhnya bahwa skripsi ini masih jauh dari sempuma dan masih banyak kekurangan mengingat terbatasnya fasilitas dan kemampuan saya, karena itu saya sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata semoga Tuhan Yang Maha Kuasa berkenan memberikan balasan kepada semua pihak yang telah membantu saya dalam menyelesaikan skripsi. Penyusun ii

7 DAFTARISI i PBRPU'\l 1(4,,. Ulll enhaa Katoli.k Wid,a Mandala SURABAYA KATA PENGANT AR.... Hal am an DAFT AR lsi DAFT AR GAMBAR DAFTAR TABEL... DAFT AR LAMP IRAN ABSTRAK... ABSTRACT... Vll IX X Xl xu BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Permasalahan Tujuan Penelitian Manfaat Penelitian... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Tinjauan Tentang Zat Warna Makanan dan Minuman Kegunaan Zat Warna Makanan dan Minuman Klasifikasi Zat Warna Klasifikasi Berdasarkan Asal Zat Warna Klasiftkasi Berdasarkan Cara Pemakaian Zat W arna Merah Makanan dan Minuman Carmoisin

8 Erythrosine AlluraRed Ponceau 4R Amaranth Rhodamin B Tinjauan Tentang Dawet Tinjauan Tentang Ekstraksi Zat Warna dari Makanan Ekstraksi Zat W arna Alam Ekstraksi Zat Warna Sintetis Larut Dalam Minyak Ekstraksi Zat Warna Sintetis Larut Dalam Air Tinjauan Tentang Kromatografi Lapis Tipis Prinsip Pemisahan Pada KLT Fase Diam Fase Gerak Tinjauan Tentang Densitometri Analisis Kualitatif dengan Densitometri Analisis Kuantitatif dengan Densitometri Validasi Metode Uji Selektifitas Linieritas Homogenitas Limit Deteksi (LOD) dan Limit Kuantitas (LOQ) Akurasi IV

9 Presisi Tinjauan Tentang Metode Pengambilan Sampel Macam Teknik Pengambilan Sampel Jenis-jenis Sampel BAB III METODE PENELITIAN Alat-alat Bahan-bahan Rancangan Penelitian Pemilihan Fase Gerak I Larutan Pengembang Pemilihan Panjang Gelombang Maksimum Uji Kualitatif Validasi Linieritas Homogenitas Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Akurasi dan Presisi Penentuan Kadar Zat Warna Pada Sampel/ Uji Kuantitatif Metode Analisa Data Linieritas Homogenitas LOD dan LOQ Presisi Akurasi v

10 3.3.7 Sampling Skema Tahapan Penelitian BAB IV ANALISADATADANINTERPRETASIPENEMUAN Sampling Data Pada Pemilihan Pelarut Pengembang dan Panjang Gelombang Maksimum Pemilihan Pelarut Pengembang Pemilihan Panjang Gelombang Maksimum Analisa Kualitatif Validasi Uji Linieritas Rhodamin B Uji Homogenitas UjiLODdanLOQ Uji Akurasi dan Presisi Kadar 0,029% Kadar 0,014% Penetapan Kadar Interpretasi Penemuan BAB V KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran DAFTARPUSTAKA Vl

11 DAFTAR GAMBAR Gam bar Hal am an 4.1 Foto hasil eluasi zat warna merah standard Ponceau 4R, Carmoisin, Allura Red, Erythrosin, Amaranth dan Rhodamin B dengan eluen Isopropanol : Amonia = 4 : Foto hasil eluasi zat warna merah standard Ponceau 4R, Carmoisin, Allura Red, Erythrosin, Amaranth dan Rhodamin B dengan eluen Etanol: Amonia = 9: Foto hasil eluasi zat warna merah standard Ponceau 4R, Carmoisin, Allura Red, Erythrosin, Amaranth dan Rhodamin B dengan eluen Etil Acetat : Metanol : Aquadest : Amonia = 150 : 40: 35 : Foto hasil eluasi zat warna merah standard Ponceau 4R, Carmoisin, Allura Red, Erythrosin, Amaranth dan Rhodamin B dengan eluen Isopropanol: Amonia = 4,5 : 0, Foto hasil eluasi zat warna merah standard Ponceau 4R, Carmoisin, Allura Red, Erythrosin, Amaranth dan Rhodamin B dengan eluen Isopropanol: Amonia = 3,5 : 1, Kurva serapan terhadap panjang gelombang dari masing-masing larutan zat warna merah yang diamati pada panjang gelombang nm Hasil eluasi Replikasi I sampel I - X dan standard dengan pelarut pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Hasil eluasi Replikasi II sampai I - X dan standard dengan pelarut pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Kurva serapan Replikasi I sampel I - X dan standard Rhodamin B dengan pelarut pengembang Isopropanol: Amonia = 4: Kurva serapan Replikasi II sampel I- X dan standard Rhodamin B dengan eluen Isopropanol: Amonia = 4:! Hasil eluasi Replikasi I sam pel XI - XX dan standard dengan pelarut pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Vll

12 4. 12 Hasil eluasi Replikasi II sampel XI - XX dan standard dengan pelarut pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Kurva serapan Replikasi I sampel XI- XX dan standard Rhodamin B dengan pelarut pengembang Isopropanol : Amonia = 4: Kurva serapan Replikasi II sampel XI - XX dan standard Rhodamin B dengan pelarut pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Kurva Linieritas Rhodamin B Hasil eluasi kadar sampel II dan V (masing-masing 4 replikasi) dan baku dengan eluen Isopropanol : Amonia = 4 : Hasil eluasi kadar sampel XI dan XIII (masing-masing 4 replikasi) dan baku dengan eluen Isopropanol : Amonia = 4 : Vlll

13 DAFTAR TABEL Tabel Hal am an 4.1 Hasil Sampling Uji Kualitatif dan Uji Kuantitatif Harga Rf Standard Zat W arna Merah dalam Berbagai Pelarut Pengembang ( eluen) Panjang Gelombang Maksimum Ponceau 4R, Carmoisin, Allura Red Erythrosin, Amaranth, Rhodamin B dengan Pelarut Pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Harga RfSampel Dawet I -X dengan Pelarut Pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Harga Rf Sampel Dawet XI - XX dengan Pelarut Pengembang Isopropanol : Amonia = 4 : Linieritas Rhodamin B Homogenitas Rhodamin B LOD dan LOQ Rhodamin B Linieritas Akurasi dan Presisi Akurasi Rhodamin B dengan Kadar 0,029% Presisi Rhodamin B dengan Kadar 0,029% Akurasi Rhodamin B dengan Kadar 0,014% Presisi Rhodamin B dengan Kadar 0,014% Linieritas untuk Penetapan Kadar Kadar Rhodamin B dalam Sampel lx

14 DAFTAR LAMPIRAN Lamp iran Hal am an 1. Perhitungan Linieritas Rhodamin B Perhitungan Homogenitas Perhitungan LOD dan LOQ Perhitungan Akurasi dan Presisi Rhodamin B Perhitungan Penetapan Kadar Rhodamin B dalam Sampel Area Linieritas Rhodamin B Area Homogenitas Rhodamin B Area LOD dan LOQ Rhodamin B Area Akurasi dan Presisi Rhodamin B Area Kadar Sampel Sertifikat Analisa Ponceau 4R Sertifikat Analisa Carmoisin Sertifikat Analisa Allura Red Sertifikat Analisa Erythrosin Laporan Pengujian Amaranth Laporan tentang Rhodamin B Tabel t X

15 ABSTRAK Wijaya, Lanni : "Identifikasi dan Penetapan Kadar Zat Warna Merah dalam Dawet yang Dijual di Sepanjang Jalan "X" Secara KLT-Densitometri. Telah dilakukan analisa zat warna merah pada dawet yang dijual di sepanjang jalan "X''. Untuk uji kualitatif pengambilan sampel diambil seluruh sampel di sepanjang jalan "X". Untuk uji kuantitatif pengambilan sampel dilakukan dengan cara undian, dipilih 5 sample. Dari analisa kualitatif dengan menggunakan pelarut pengembang isopropanol : Amonia = 4 : 1, standard Erythrosine, Carmoisin, Allura Red, Ponceau 4R, Amaranth dan Rhodamin B berturut-turut memberikan harga Rf pada KLT 0,69 ; 0,55 ; 0,63 ; 0,36 ; 0,60 dan serapan maksimum pada Densitometer pada panjang gelombang 537 nm, 497 nm, 481 nm, 481 nm, 519 nm, 553 nm. Berdasarkan data analisa kualitatif temyata dawet yang dijual di sepanjang jalan "X" mengandung zat warna merah Rhodamin B yang tidak diijinkan untuk makanan berdasarkan Permenkes RI No. 722/Menkes/Per/IX/1988 tentang Bahan Tambahan Makanan. Pada analisa kuantitatif digunakan fasa diam silika gel GF 254 dan fasa gerak Isopropanol: Amonia = 4 : 1 dengan panjang gelombang maksimum terpilih 553 nm untuk Rhodamin B. Adapun hasil dari validasi metode dan penetapan kadar dari sampel dawet adalah : Linieritas :R = 0,9991 a = 187,7494 b = 4676,5991 Vxo = 1,75% Xp = 0,0152 J.tg Homogenitas : PW = 0,8208 LOD & LOQ: untuk LOD = 0,0412 J.tg untuk LOQ = 0, 0618 J.tg Ketelitian : KV = 1,67% dan 1,56% Akurasi :%recovery= 98,51% untuk kadar Rhodamin B = 0,029% :%recovery= 98,95% untuk kadar Rhodamin B = 0,014% Kadar Rhodamin B dalam sampel = 0,011% sampai dengan 0,016% Xl

16 ABSTRACT Wijaya, Lanni : "Identification and Determination of Red Colouring Agent Content Sold along the "X" street using TLC-Densitometry. The analysis of red colouring agent content in dawet which is sold along the "X'' street has been conducted. For qualitative analysis, samples were collected along the "X" street. For qualitative analysis, the collection of samples was performed randomly. Five samples were selected. The qualitative analysis using a mixture of isopropanol : ammonia = 4 : 1 as the mobile phase, the Rf values of Erythrosine, Carmoisin, Allura Red, Ponceau 4R, Amaranth and Rhodamine B were 0.69, 0.55, 0.63, 0.36 and 0.60 respectively and the respective wavelength maximum were 537 nm, 497 nm, 481 nm, 481 nm, 519 nm and 553 nm. Based on the qualitative analysis data, dawet which is sold along the "X'' street contained red colouring agent Rhodamine B, which is not permitted to be used in food, according to Permenk:es RI No. 722/Menk:es/Per/IX/1988 about Food Additives. For qualitative analysis, silica gel GF2s4 were used as the stationary phase and a mixture of isopropanol : amonia = 4 : 1 was used as mobile phase. The selected maximum wavelenght was 553 nm for Rhodamine B. The validation of analytical method for determination of red colouring agent in dawet showed the following results : Linearity : r = a = b = Vxo = 1.75% Xp = J..tg Homogeneity: PW = Limit ofdetection = J..tg Limit of Quantitation = J..tg Precision :Coefficients of Variation= 1.67% dan 1.56% Accuracy :%recovery= 98.51% for Rhodamine B content of0.029% :%recovery= 98.95% for Rhodamine B content of0.014% Rhodamine B content in samples = % to % Xll