Kata kunci: Daun sirih, epdermis, fibroblas, kolagen, luka, tikus wistar

Transkripsi

1 ABSTRAK PEMBERIAN EKSTRAK DAUN SIRIH (PIPER BETLE) SECARA TOPIKAL MENINGKATKAN KETEBALAN EPIDERMIS, JUMLAH FIBROBLAS DAN JUMLAH KOLAGEN PADA PROSES PENYEMBUHAN LUKA PADA TIKUS (RATTUS NORVEGICUS) JANTAN GALUR WISTAR Luka pada kulit mengakibatkan hilangnya fungsi lapisan kulit dan dapat menyebabkan terjadinya perdarahan, respon stres simpatis, kontaminasi bakteri bahkan bisa terjadi kematian sel. Proses regenerasi jaringan luka berlangsung lambat bahkan terhambat pada kulit yang mengalami penuaan. Daun sirih (Piper betle) mengandung beberapa molekul bioaktif yang bekerja pada proses penyembuhan luka. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membuktikan bahwa pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) meningkatkan ketebalan epidermis, jumlah fibroblas dan jumlah kolagen pada proses penyembuhan luka pada tikus (Rattus norvegicus) jantan galur wistar. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang menggunakan 36 ekor tikus galur wistar (Rattus norvegicus) dewasa dan sehat, berumur 3-4 bulan, dengan berat badan gram, yang terbagi menjadi 2 (dua) kelompok masing-masing berjumlah 18 ekor tikus. Kelompok pertama adalah kelompok kontrol dengan amoksisilin oral 3 x 10mg/hari selama 3 hari, serta diberi povidine iodine 10% topikal 1 tetes (50 microliter) 2x/hari selama 14 hari (P0), dan kelompok kedua adalah kelompok perlakuan dengan amoksisilin oral 3 x 10 mg/hari selama 3 hari serta diberi ekstrak daun sirih (Piper betle) konsentasi 10% secara topikal 1 tetes (50 microliter), 2x/hari selama 14 hari (P1). Jaringan kulit diambil dan dibuat preparat dengan pewarnaan Hematoxylin-Eosin untuk pemeriksaan ketebalan epidermis dan jumlah fibroblas, dan pewarnaan dengan Picro Sirius Red untuk pemeriksaan jumlah kolagen, kemudian dilakukan pemeriksaan secara mikroskopik. Hasil penelitian menunjukkan rerata tebal epidermis pada kelompok kontrol (P0), 24,72±14,91 µm, pada kelompok perlakuan (P1), 56,75±23,04 µm, kemudian dilakukan uji statistik yang menunjukkan peningkatan bermakna (p<0,01). Rerata jumlah fibroblas pada kelompok kontrol (P0), 75,45±32,52 sel/lapang pandang, pada kelompok perlakuan (P1), 95,67±22,51 sel/lapang pandang, hasil uji statistik menunjukkan perbedaan yang bermakna (p<0,05). Rerata jumlah kolagen pada kelompok kontrol (P0), 65,27±7,13%, pada kelompok perlakuan (P1), 83,09±2,59%, setelah dilakukan uji statstik didapatkan hasil peningkatan bermakna (p<0,01). Kesimpulan penelitian ini adalah pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) konsentrasi 10% secara topikal dapat meningkatkan ketebalan epidermis, jumlah fibroblas dan jumlah kolagen pada luka tikus (Rattus norvegicus) jantan galur Wistar. Kata kunci: Daun sirih, epdermis, fibroblas, kolagen, luka, tikus wistar ix

2 ABSTRACT TOPICAL BETEL (PIPER BETLE) LEAF EXTRACT ADMISTRATION INCREASE EPIDERMIS THICKNESS, FIBROBLAST AND COLLAGEN AMOUNTS OF WOUND HEALING PROCESS IN MALE WISTAR RATS (RATTUS NORVEGICUS) Wounded skin results in loss of skin function and causing a bleeding, sympathetic stress response, bacterial contamination and even cell death. The regeneration of injured tissue is slow or even hampered in aging skin. Betel leaf (Piper betle) contains several bioactive molecules that work on wound healing process. The purpose of this study was to prove that the topical betel (Piper betle) leaf extract adinistration increase epidermis thickness, fibroblas and collagen amounts of wound healing process in male wistar rats (Rattus norvegicus). This study was an experimental research using 36 Wistar rats (Rattus norvegicus) and healthy, aged 3-4 months, weighing grams, divided into two groups with 18 rats each. The first group was the control group treated with oral amoxicillin 3x10mg/day for 3 days and one drop (50 microliter) of povidine iodine 10% topically 2x/day for 14 days (P0), and the second group was the treatment groups treated with oral amoxicillin 3x10mg/day for 3 days and one drop (50 microliter) of extracts of betel leaf (Piper betle) concentrate 10% topically 2x/day for 14 days (P1). The skin as a samples were taken, and then processed the preparats by using Hematoxylin-Eosin colouring method to check the epidermal thickness and fibroblas, and using Picro Sirius Red colouring method to check the collagen amount before performing histophatological examination by using a binocular microscope. The result showed an average of epidermis thickness in the control group (P0) was ± μm, where the treatment group (P1) was ± μm, after statistic test, there was increase of epidermis thickness significantly (p<0.01). The number of fibroblasts in the control group (P0) was 75,45±32,52 cells/visual field, while the treatment group (P1) was 95,67±22,51 cells/visual field, the statistic test showed there was difference significant (p< 0.05). The average of collagen in the control group (P0) was ± 7.13%, while the treatment group (P1) was ± 2.59%, the result of statistic test there was increase of amount of collagen significanly (p <0.01). The conclution of this study was the topical administration of the 10% consentrate of the betel (Piper betle) leaf extract increase epidermis thickness, fibroblas and collagen amounts of wound healing process in male wistar rats (Rattus norvegicus). Keywords: Betel leaf, epidermis, fibroblast, collagen, wound, Wistar rats x

3 DAFTAR ISI SAMPUL DALAM... i PRASYARAT GELAR... ii LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING... iii LEMBAR PENETAPAN PANITIA PENGUJI... iv LEMBAR PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT... v UCAPAN TERIMA KASIH... vi ABSTRAK... ix ABSTRACT... x DAFTAR ISI... xi DAFTAR TABEL... xiv DAFTAR GAMBAR... xv DAFTAR ARTI SINGKATAN... xvi DAFTAR LAMPIRAN... xvii BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan Penelitian Tujuan Umum Tujuan Khusus Manfaat Penelitian Manfaat Ilmiah Manfaat Praktis Manfaat Sosial BAB II KAJIAN PUSTAKA xi

4 2.1 Aging Teori Penuaan Mekanisme Aging Anatomi, Fisiologi dan Histologi Kulit Luka Definisi Luka Klasifikasi Luka Penyembuhan Luka Tanaman Obat Daun Sirih Deskripsi dan Karakteristik Kandungan Daun Sirih Daun Sirih dan Penyembuhan Luka Hewan Percobaan BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS Kerangka Berpikir Konsep Penelitian Hipotesis Penelitian BAB IV METODE PENELITIAN Rancangan Penelitian Tempat dan Waktu Penelitian Penentuan Sumber Data Variabilitas Populasi Kriteria Subyek Kriteria Drop Out xii

5 4.3.4 Besaran Sampel Teknik Pengambilan Sampel Sampel Variabel Penelitian Identifikasi Variabel Klasifikasi Variabel Hubungan Antar Variabel Definisi Operasional Variabel Bahan dan Instrumen Penelitian Prosedur Penelitian Prosedur Pembuatan Ekstrak Daun Sirih Perlakuan Hewan Percobaan Pemeriksaan Histopatologi Alur Penelitian Analisis Data BAB V HASIL PENELITIAN Analisis Deskriptif Uji Normalitas Data Uji Homogenitas Data Uji Komparabilitas BAB VI PEMBAHASAN Subyek Penelitian Distribusi Homogenitas Data Hasil Penelitian Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Sirih (Piper betle) terhadap penyembuhan luka BAB VII SIMPULAN DAN SARAN xiii

6 DAFTAR TABEL Tabel 2.1 Tabel konversi usia hewan dengan usia manusia Tabel 2.2 Tabel perkembangan kebutuhan tikus jantan Tabel 5.1 Rerata Nilai Variabel Antar Kelompok Tabel 5.2 Hasil Uji Normalitas Data Antar Kelompok Tabel 5.3 Hasil Uji Homogenitas Antar Kelompok Tabel 5.4 Komparasi Rerata Masing-Masing Variabel Antar Kelompok xiv

7 DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Struktur anatomi kulit Gambar 2.2 Gambaran histologis kulit normal Gambar 2.3 Proses Penyembuhan luka Gambar 2.4 Daun Sirih Gambar 3.1 Kerangka Konsep Gambar 4.1 Bagan Rancangan Penelitian Gambar 4.2 Bagan Hubungan Antar Variabel Gambar 4.3 Bagan Alur Penelitian Gambar 5.1 Histopatologi Ketebalan Epidermis pada Kelompok Kontrol (P0) Gambar 5.2 Histopatologi Ketebalan Epidermis pada Kelompok Perlakuan (P1) Gambar 5.3 Jumlah Fibroblas pada Kelompok Kontrol (P0) Gambar 5.4 Jumlah Fibroblas pada Kelompok Perlakuan (P1) Gambar 5.5 Jumlah Kolagen pada Kelompok Kontrol (P0) Gambar 5.6 Jumlah Kolagen pada Kelompok Perlakuan (P1) Gambar 5.7 Grafik Perbandingan Rerata Ketebalan Epidermis Antar Kelompok Gambar 5.8 Grafik Perbandingan Jumlah Sel Fibroblas Antar Kelompok Gambar 5.9 Grafik Perbandingan Jumlah Kolagen Antar Kelompok xv

8 DAFTAR ARTI LAMBANG, SINGKATAN DAN ISTILAH AAM : Anti -Aging Medicine DHEA : Dehydroepiandosterone DNA : Deoxyribonucleic Acid E1 : Estron E2 : Estriol GH : Growth Hormone HRT : Hormonal Replacement Therapy VEGF : Vascular Endothelial Growth Factor xvi

9 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 : Hasil Uji Analisis Ekstrak Daun Sirih Lampiran 2 : Kelaiakan Etik (Ethical Clearance) Lampiran 3 : SPSS Lampiran 4 : Hasil Pemeriksaan xvii

10 BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Seiring dengan perkembangan jaman, teknologi dan ilmu pengetahuan juga terus dikembangkan, termasuk didalamnya adalah ilmu kedokteran. Berbagai upaya dilakukan untuk menjaga dan memelihara kesehatan umat manusia. Di negara berkembang seperti Indonesia, tingkat kesadaran masyarakat terhadap pentingnya kesehatan masih tergolong cukup rendah, hal ini dikarenakan faktor ekonomi dan pendidikan yang tidak memadai, sehingga pengetahuan akan kesehatanpun tidak dimengerti dengan baik. Sama halnya dengan pengetahuan akan proses penuaan, masih banyak kekeliruan pendapat mengenai proses penuaan. Keluhan-keluhan yang berhubungan dengan proses penuaan masih sering dianggap sebagai sesuatu yang tidak dapat dihindari dan merupakan proses yang sudah sewajarnya muncul pada usia tua, sehingga bila timbul keluhan mereka tidak cepat-cepat berusaha untuk mencari pengobatan yang tepat. Bila keluhan semakin berat barulah mencari pertolongan, tapi kadang masih saja pertolongan yang dicari tidak kepada ahli yang tepat, masih banyak yang percaya kepada mitos yang berdar, datang ke dukun, dan sebagainya. Mereka tidak menyadari bahwa sebenarnya manusia dapat hidup dengan umur lebih panjang dengan kualitas hidup yang tetap baik. 1

11 2 Menjadi tua adalah suatu proses yang tidak terjadi begitu saja, banyak ilmuwan yang melakukan penelitian untuk menghambat dan memperlambat proses penuaan, karena pada dasarnya manusia tidak ingin menjadi tua, karena menjadi tua hampir selalu dikaitkan dengan kelemahan, ketidakberdayaan atau dengan kekurangan yang lainnya (Pangkahila, 2011). Penuaan merupakan serangkaian proses yang dialami oleh semua organisme. Pada manusia, penuaan mengacu pada proses multidimensi perubahan fisik, psikologis, dan sosial. Beberapa dimensi penuaan tumbuh dan berkembang dari waktu ke waktu, sementara yang lain mengalami penurunan. Perubahan terjadi pada tingkat seluler, organ, maupun sistem karena proses penuaan (Klatz and Goldman, 2003). Proses penuaan terjadi melalui suatu seri rangkaian reaksi yang kompleks, melibatkan interaksi antara replikasi dan ekspresi gen dengan aktivitas metabolisme di dalam sel. Beberapa faktor yang mempengaruhi penuaan antara lain adalah aktivitas berlebih (Wear and Tear Theory), hormonal (Neuroendocrinology Theory), genetik (The Genetic Control Theory), dan radikal bebas (The Free Radical Theory). Apabila faktor-faktor tersebut dapat dihindari, maka proses penuaan tentu dapat dicegah, diperlambat, bahkan mungkin dihambat dan kualitas hidup dapat dipertahankan. Lebih jauh lagi, ini berarti memperpanjang usia harapan hidup dengan kualitas hidup yang baik, hal ini sesuai dengan konsep dasar Anti Aging Medicine (AAM) (Pangkahila 2011). Anti Aging Medicine adalah bagian ilmu kedokteran yang didasarkan pada gabungan dari penggunaan ilmu pengetahuan dan tehnologi kedokteran terkini.

12 3 Ilmu tersebut dapat digunakan untuk melakukan deteksi dini, pencegahan, pengobatan, dan perbaikan ke keadaan semula berbagai disfungsi, kelainan dan penyakit yang berkaitan dengan penuaan. Tujuannya adalah untuk memperpanjang hidup dalam keadaan sehat (Pangkahila, 2011). Upaya lain berkaitan dengan anti aging ialah upaya dalam bidang estetika yang menyangkut penampilan wajah dan tubuh. Penggunaan berbagai jenis kosmetik sebenarnya merupakan upaya sederhana untuk memberikan kesan lebih menarik dan lebih muda, hal ini dikarenakan penampilan mempunyai peranan penting dalam banyak aspek kehidupan. Dengan penampilan yang lebih baik, rasa percaya diri meningkat, kemampuan sosialisasi menjadi lebih baik, dan penerimaan orang lain mungkin menjadi lebih baik pula (Pangkahila, 2011). Timbulnya cacat atau bekas luka dapat mengganggu penampilan fisik, oleh sebab itu penelitian untuk membantu proses penyembuhan luka hingga menjadi kulit normal kembali masih terus dikembangkan. Fungsi kulit manusia yang menurun seiring usia adalah fungsi barier, pergantian sel, pembersihan zat kimia, persepsi sensoris, mekanisme proteksi, penyembuhan luka, respon imun, termoregulasi, produksi keringat, produksi sebum, produksi vitamin D dan perbaikan DNA. Perubahan histologis paling mencolok dan konsisten adalah penyempitan dermal epidermal juction dengan penipisan pada papila dermal dan epidermal rete pegs. Dengan adanya berbagai perubahan struktur dan fungsi yang saling bertautan yang mengganggu integritas kulit sehingga sering sekali penyembuhan luka terhambat sampai dengan

13 4 terbukanya kembali luka yang sudah mulai menyembuh (Gist et al., 2009 ; Minimas, 2007). Luka merupakan hal yang sering dijumpai di masyarakat sehari hari. Luka dapat timbul karena berbagai penyebab, baik yang disengaja ataupun yang tidak disengaja, misalnya karena pekerjaan, kecelakaan lalu lintas, penyakit tertentu, akibat prosedur operasi, akibat prosedur sehubungan dengan estetika misalnya luka pasca prosedur laser, dan lain sebagainya. Setiap luka yang terjadi selalu mengalami masa penyembuhan yang bervariasi tergantung dari besar, jenis, kedalaman, lokasi, dan juga perawatan perawatan untuk luka. Proses penyembuhan luka adalah proses biologis yang terjadi di dalam tubuh (Guo et al., 2010), melibatkan rangkaian proses yang rumit dan rentan dan sangat mungkin terjadi gangguan ataupun kegagalan, sehingga diperlukan kondisi yang optimal untuk mendapatkan penyembuhan yang baik. Pada proses penyembuhan luka, terjadi serangkaian interaksi antara berbagai jenis sel mediator sitokin, dan matriks ekstraseluler yang terangkum dalam tiga fase yang saling tumpang tindih, yaitu fase inflamasi, fase proliferasi, serta fase remodeling jaringan (Broughton et al., 2006). Dalam prosesnya fibroblas akan segera bermigrasi menuju luka, berproliferasi, dan memproduksi matriks kolagen dalam jumlah besar, yang akan membantu mengisolasi dan memperbaiki jaringan yang rusak. Hasil dari mekanisme penyembuhan luka ini tergantung dari perluasan dan kedalaman luka, serta ada tidaknya komplikasi atau infeksi yang mengganggu perjalanan proses penyembuhan luka yang alami.

14 5 Tujuan dari manajemen luka adalah penyembuhan luka dalam waktu sesingkat mungkin, meminimalkan kerusakan jaringan, penyediaan perfusi jaringan yang cukup dan oksigenasi, nutrisi yang tepat untuk jaringan luka (Reddy et al., 2012). Pengobatan dari luka bertujuan untuk mengurangi faktor-faktor risiko yang menghambat penyembuhan luka, mempercepat proses penyembuhan dan menurunkan kejadian luka yang terinfeksi (Soni and Singhai, 2012). Berbagai penelitian untuk mempercepat proses penyembuhan luka sehingga diperoleh hasil sempurna tanpa cacat terus dikembangkan. Dari penemuan alat-alat berteknologi tinggi, prosedur tindakan invasif yang terus ditingkatkan seperti skin grafting, pemberian growth factors, dan tidak ketinggalan penelitian terhadap tanaman obat. Penggunaan tanaman sebagai obat sudah lama dikenal masyarakat Indonesia, hanya saja dasar penggunaan tanaman sebagai obat ini diketahui khasiatnya berdasarkan pengalaman orang-orang tua terdahulu, tanpa mengetahui apa kandungan dari tanaman tersebut. Di negara berkembang, 25 persen dari pengobatan didasarkan pada pemakaian tanaman obat, yang secara luas digunakan pada masyarakat pedesaan. Nenek moyang menemukan kekuatan penyembuhan dari tumbuhan melalui proses trial and error (Soni and Singhai, 2012). Salah satu tanaman obat yang cukup dikenal masyarakat adalah daun sirih (Piper betle). Daun sirih telah lama digunakan dalam pengobatan tradisional oleh nenek moyang sebagai obat kumur, menghilangkan bau badan, obat mimisan, pembersih mata yang gatal atau merah, dan obat sariawan. Selain itu, daun sirih bermanfaat sebagai antiseptik dan vulnerary yaitu menyembuhkan luka

15 6 (Moeljanto, 2003). Daun sirih mengandung saponin, flavonoid, tanin dan minyak atsiri. Saponin, flavonoid serta tanin dapat membantu proses penyembuhan luka karena berfungsi sebagai antioksidan dan antimikroba yang mempengaruhi penyambungan luka juga mempercepat epitelisasi (Senthil et al., 2011; Saroja et al,. 2012). Kandungan saponin dan tanin berperan dalam regenerasi jaringan dalam proses penyembuhan luka (Reddy et al., 2011) dan mempunyai kemampuan sebagai pembersih atau antiseptik (Kimura et al., 2006). Saponin dapat memicu vascular endothelial growth factor (VEGF) dan meningkatkan jumlah makrofag bermigrasi ke area luka sehingga meningkatkan produksi sitokin yang akan mengaktifkan fibroblas di jaringan luka (Kimura et al., 2006). Kandungan flavonoid berfungsi sebagai antioksidan, antimikroba dan juga antiinflamasi pada luka (Park et al., 2010). Onset nekrosis sel dikurangi oleh flavonoid dengan mengurangi lipid peroksidasi. Penghambatan lipid peroksidasi dapat meningkatkan viabilitas serat kolagen, sirkulasi darah, mencegah kerusakan sel dan meningkatkan sintesis DNA (Reddy et al., 2011). Kandungan tanin mempunyai kemampuan astringen, antioksidan dan antibakteri (Nafiu et al., 2011). Kandungan tanin mempercepat penyembuhan luka dengan beberapa mekanisme seluler yaitu membersihkan radikal bebas dan oksigen reaktif, meningkatkan penyambungan luka serta meningkatkan pembentukan pembuluh darah kapiler juga fibroblas (Sheikh et al., 2011). Sementara minyak atsiri mengandung kavikol dan phenol yang berguna sebagai antimikroba, antibakteri dan disinfektan (Lai et al,. 2011).

16 7 Selain zat aktif di atas, daun sirih juga mengandung banyak zat aktif lainnya seperti vitamin C, beta caroten, catalase, antraquinon, hydroxycavicol, terpenoid, glicosida, sterol, estragol, dan lain-lain. Berbagai kandungan bermanfaat dari daun sirih ini menyebabkan penelitian terhadap daun sirih dapat terus dikembangkan, mengingat bahwa tanaman ini dapat mudah ditemukan pada pekarangan-pekarangan rumah di Indonesia sehingga tanaman ini mudah didapatkan tanpa mengeluarkan biaya yang mahal. Penggunaan tanaman untuk pengobatan perlu ditunjang oleh data-data penelitian dari tanaman tersebut sehingga khasiatnya secara ilmiah tidak diragukan lagi dan dapat dipertanggungjawabkan. Hal ini tentu akan lebih mendorong penggunaan tanaman sebagai obat secara meluas oleh masyarakat (Soemiati dan Elya, 2002). Penelitian ekstrak daun sirih secara topikal untuk penyembuhan luka, sudah pernah dilakukan sebelumnya. Fannani dan Nugroho melakukan penelitian pengaruh ekstrak etanol daun sirih terhadap penyembuhan luka iris pada tikus putih jantan (Rattus novergicus). Ekstrak etanol daun sirih yang digunakan adalah ektrak dengan konsentrasi 10%, diberikan secara topikal pada luka iris, dan kemudian dilakukan pengamatan pada subjek selama 14 hari mengenai tingkat percepatan penyembuhan luka iris. Hasil dari penelitian tersebut adalah ekstrak etanol daun sirih mampu mempercepat proses penyembuhan luka. Latar belakang penulis mengamati tentang pengaruh dari ekstrak daun sirih terhadap proses penyembuhan luka karena seperti yang telah dijelaskan diatas, selain kaya akan zat aktif, daun sirih sangat mudah didapatkan dan sudah sejak dahulu banyak digunakan sebagai obat tradisional. Oleh sebab itu peneliti

17 8 melakukan pemeriksaan mikroskopis terhadap ketebalan epidermis, jumlah fibroblas dan jumlah kolagen dari proses penyembuhan luka tersebut, karena kesembuhan yang ditandai dengan penutupan luka saja tidak cukup, akan lebih baik jika proses kesembuhan luka terjadi dengan proses regenerasi yang tepat sehingga diperoleh hasil kesembuhan sempurna tanpa cacat. Untuk obat luka biasanya masyarakat lebih menyukai pemakaian produk topikal yang dapat langsung diaplikasikan ke jaringan luka karena lebih praktis. Bentuk sediaan obat topikal beraneka ragam dari solusio atau cairan, gel, salep ataupun krim, semua sediaan memiliki kekurangan dan kelebihan masing-masing. Berbeda dengan penelitian fanani dan Nugroho yang menggunakan sediaan salep, pada penelitian kali ini peneliti akan menggunakan ekstrak dalam sediaan berbentuk cair dengan pertimbangan digunakannya povidone iodine 10% yang sediaannya berbentuk cair sebagai kontrol, mengingat povidone iodine 10% banyak digunakan pada penatalaksanaan perawatan luka karena bersifat sebagai antiseptik. Uji analisis membuktikan bahwa daun sirih mengandung zat-zat aktif seperti flavonoid, fenol, tanin, beta caroten, vitamin c dan anti oksidan, sehingga daun sirih yang digunakan tidak hanya bersifat antiseptik, tetapi juga bersifat antibakteri, antioksidan, antijamur, antiinflamasi, hemostatik, dan astringent. Dengan pertimbangan proses mekanisme penyembuhan luka yang berbeda antara ekstrak daun sirih dan povidone iodine 10%, maka tujuan penelitian ini tidak membandingkan kedua zat tersebut melainkan bertujuan untuk mengamati adanya peningkatan dari pemberian daun sirih terhadap ketebalan epidermis, jumlah

18 9 fibroblas dan jumlah kolagen dengan pemberian ekstrak daun sirih, dan povidone iodine 10% digunakan sebagai kontrol. Walaupun tidak ada perbedaan nilai hematologi, biokimia, maupun bobot organ antara tikus jantan dan betina (Sihombing dan Tuminah, 2011), untuk mendapatkan sampel yang homogen, dipilih tikus jantan pada penelitian ini. 1.2 Rumusan Masalah Dari uraian latar belakang diatas, dapat dibuat rumusan masalah penelitian sebagai berikut: 1. Apakah pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentrasi 10% secara topikal dapat meningkatkan ketebalan epidermis? 2. Apakah pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentrasi 10% secara topikal dapat meningkatkan jumlah fibroblas? 3. Apakah pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentrasi 10% secara topikal dapat meningkatkan jumlah kolagen? 1.3 Tujuan Penelitian Tujuan Umum Untuk mencari bahan alami yang dapat meningkatkan ketebalan epidermis, jumlah fibroblas dan kolagen pada proses penyembuhan luka jika terbukti secara uji klinis.

19 Tujuan Khusus 1. Untuk membuktikan pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentrasi 10% secara topikal dapat meningkatkan ketebalan epidermis pada luka tikus (Rattus norvegicus) jantan galur wistar. 2. Untuk membuktikan pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentrasi 10% secara topikal dapat meningkatkan jumlah fibroblas pada luka tikus (Rattus norvegicus) jantan galur wistar. 3. Untuk membuktikan pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentrasi 10% secara topikal dapat meningkatkan jumlah kolagen pada luka tikus (Rattus norvegicus) jantan galur wistar. 1.4 Manfaat Penelitian Manfaat Ilmiah 1. Untuk memperoleh informasi ilmiah mengenai pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentasi 10% secara topikal dapat meningkatkan meningkatkan ketebalan epidermis pada luka tikus (Rattus norvegicus) jantan galur wistar. 2. Untuk memperoleh informasi ilmiah mengenai pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentasi 10% secara topikal dapat meningkatkan meningkatkan jumlah fibroblas pada luka tikus (Rattus norvegicus) jantan galur wistar.

20 11 3. Untuk memperoleh informasi ilmiah mengenai pemberian ekstrak daun sirih (Piper betle) dengan konsentasi 10% secara topikal dapat meningkatkan meningkatkan jumlah kolagen pada luka tikus (Rattus norvegicus) jantan galur wistar. 4. Sebagai dasar untuk penelitian lebih lanjut pada manusia Manfaat Praktis Diharapkan dapat digunakan sebagai bahan dasar untuk uji klinis setelah dilakukan terlebih dahulu penelitian terhadap efek samping dan dosis optimum ekstrak daun sirih Manfaat Sosial Dapat digunakan sebagai acuan oleh masyarakat untuk memahami khasiat dan manfaat daun sirih untuk membantu proses penyembuhan luka.