ELEKTROFORESIS. Muawanah. Sabaniah Indjar Gama

Transkripsi

1 ELEKTROFORESIS Muawanah Sabaniah Indjar Gama

2 Elektroforesis adalah teknik pemisahan komponen atau molekul bermuatan berdasarkan perbedaan tingkat migrasinya dalam sebuah medan listrik Atau pergerakan partikel bermuatan listrik atau molekul dalam medium konduktif di bawah pengaruh medan listrik. Prinsip elektroforesis pemisahan didasarkan atas perbedaan migrasi komponen pada fase pendukung, karena adanya perbedaan muatan dan masa molekul. jika suatu fase zat bermuatan, diberi beda potensial, fase tersebut akan berpindah sepanjang medium yang kontinu ke arah katoda atau anoda sesuai dengan muatan partikel.

3 metode elektroforetik dapat diterapkan untuk pemisahan dari suatu sampel dengan variety luas, termasuk protein, asam nukleat, asam amino dan karbohidrat. Efisiensi pemisahan elektroforesis diatur oleh dua faktor utama: 1. mobilitas elektroforesis analit 2. aliran elektroosmosis (EOF) dari solusi.

4 TEKNIK ELEKTROFORESIS Menurut Stenesh dalam Titrawani (1996) teknik elektroforesis dapat dibedakan menjadi dua cara, yaitu : 1. Tanpa ada pengemban padat atau matriks (Elektroforesis lapisan gerak / moving boundary). 2. Dengan pengemban padat atau matriks.

5 J E N I S - J E N I S DA N M A N FA AT E L E K T RO F O R E S I S Manfaat Elektroforesis adalah Mendeteksi muatan suatu sistem dalam koloid, Untuk memproduksi barang industri yang terbuat dari karet, Untuk mengurangi zat pencemar udara yang dikeluarkan dari cerobong asap pabrik, akan tetapi penggunaan elektroforesis selalu mengalami peningkatan sehingga tidak hanya yang disebutkan diatas melainkan dapat digunakan untuk menganalisis DNA dalam berbagai bidang kepolisian, dalam kegiatan molekuler dan mengidentifikasi protein yang terdapat dalam DNA. JENIS ELEKTROFORESIS 1. Elektroforesis Zone (Elektroforesis wilayah) 2. Elektroforesis Kertas 3. Elektroforesis kapiler 4. Elektroforesis gel

6 ELEKTROFORESIS WILAYAH Tujuan dari teknik elektroforesis ini adalah untuk uji kemurnian preparat, penentuan komponen dalam campuran, penentuan bobot molekul, dan penentuan perubahan mobilitas atau konformasi. faktor-faktor yang mempengaruhi pergerakan ion-ion adalah mobilitas ion, tipe resolusinnya, macam larutan buffernya, ph yang digunakan, kuat ion zat terlarut, temperatur, ada atau tidaknya fenomena elektroforesis atau elektroosmosis.

7 ELEKTROFORESIS KERTAS Elektroforesis kertas adalah jenis elektroforesis yang terdiri dari kertas sebagai fase diam dan partikel yang terlarut sebagai fase gerak, terutama ion-ion kompleks. Pemisahan ini terjadi akibat adanya gradasi konsentrasi sepanjang system pemisahan. Pergerakan partikel dalam kertas tergantung pada muatan atau valensi zat terlarut, luas penampang, tegangan yang digunakan, konsentrasi elektrolit, kekuatan ion, ph, viskositas, dan adsorbsivitas zat terlarut.

8

9 ELEKTROFORESIS GEL Elektroforesi gel merupakan salah satu teknik utama dalam biologi molekular. Prinsip dasar teknik ini adalah bahwa DNA, RNA, atau protein dapat dipisahkan oleh medan listrik. Dalam hal ini, molekul-molekul tersebut dipisahkan berdasarkan laju perpindahannya oleh gaya gerak listrik di dalam matriks gel. Laju perpindahan tersebut bergantung pada ukuran molekul bersangkutan. Elektroforesis gel biasanya dilakukan untuk tujuan analisis, namun dapat pula digunakan sebagai teknik preparatif untuk memurnikan molekul sebelum digunakan dalam metode-metode lain seperti spektrometer massa, PCR, kloning, sekuensing DNA, atau immunoblotting

10

11 ELEKTROFORESIS KAPILER Elektroforesis kapiler adalah metode elektroforesis yang digunakan untuk memisahkan asam amino, protein, lipid, karbohidrat, dan nukleotida dengan resolusi tinggi yang dilakukan pada pipa kapiler berisi buffer.elektroforesis kapiler merupakan pengembangan konsep elektroforesis konvensional. Konsep dasar elektroforesis kapiler adalah tidak sedikit molekul berada dalam larutan sebagai partikel bermuatan (ion), baik bermuatan positif (kation) maupun bermuatan negatif (anion). Kalau medan listrik diberikan kepada larutan molekul bermuatan tersebut maka masing-masing ion bergerak menuju elektroda yang berlawanan muatannya. Kation menuju katoda sebaliknya anion menuju anoda.

12

13 SEKIAN DAN TERIMA KASIH

14 Fef = q. E