ISBN t a hun IAI. Seminar Nasional Farmasi Universitas Sumatera Utara 2012: Peran Farmasi dalam Pembangunan Kesehatan

Transkripsi

1 ISBN t a hun ISBN

2 PERPUSTAKAAN NASIONAL: KATALOG DALAM TERBITAN Peranan Farmasi Dalam Pembangunan Kesehatan-Seminar Proceeding editor, M. Pandapotan Nst, dkk. Medan : Fakultas Farmasi USU, 2012 ISBN Termasuk bibliografi 1. Peranan Farmasi I. Kesehatan Hak Cipta dilindungi berdasarkan Undang-Undang No. 19 Tahun 2002 tentang Hak Cipta Dilarang memperbanyak sebagian atau seluruh isi buku ini dengan cara apapun, termasuk dengan cara penggunaan mesin fotocopy tanpa izin dari penerbit Cetakan pertama, September 2012 M. Pandapotan Nst. PERANAN FARMASI DALAM PEMBANGUNAN KESEHATAN: SEMINAR PROCEEDING Hak penerbitan pada Fakultas Farmasi USU. Editor dan Penerbit tidak bertanggung jawab atas substansi tulisan. Penyunting Desain cover : Lia Laila : Sumardi ISBN

3 DAFTAR ISI KATA SAMBUTAN KETUA PANITIA... 3 KATA SAMBUTAN DEKAN FAKULTAS FARMASI USU... 4 KATA SAMBUTAN REKTOR... 6 KATA PENGANTAR EDITOR... 9 DAFTAR ISI KUMPULAN MAKALAH LENGKAP KATEGORI BIOLOGI FARMASI KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN ISOLASI SERTA KANDUNGAN ASIATIKOSIDA DAN UJI FITOKIMIA ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI Pemisahan Senyawa Flavonoid dari Ekstrak Etlasetat dengan KKt Preparatif UJI POTENSI ANTITUBERKULOSIS EKSTRAK ETANOL UJI SITOTOKSIK FRAKSI EKSTRAK ETANOL KUDA LAUT AKTIVITAS SITOTOKSIK BEBERAPA ISOLAT SKRINING FITOKIMIA DAN UJI KEMAMPUAN SEBAGAI TANGGAP PERTUMBUHAN KEDELAI PADA ANALISIS KOMPONEN KIMIA MINYAK ATSIRI STUDI PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ISOLASI DAN IDENTIFIKASI AGAR POTENSI EKSTRAK ETILASETAT DAN EKSTRAK ETANOL UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI POTENSI ANTIBAKTERI AIR REBUSAN SERBUK, EKSTRAK PRODUKSI BIOMASSA SECARA IN VITRO PADA ISOLASI DAN KARAKTERISASI NATRIUM ALGINAT DARI UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KUMPULAN MAKALAH LENGKAP KATEGORI FARMAKOLOGI FARMASI EFEK JUS WORTEL (Daucus carota L.) UNTUK MENURUNKAN KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA MARMUT (Cavia cobaya) EFEK SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG TANJUNG (Mimusopsi cortex) TERHADAP SEL T47D PEMAKAIAN NSAIDS PADA SEBUAH APOTEK DI MEDAN, INDONESIA: MASALAH TERAPI OBAT ISBN

4 PENGETAHUAN HIPERTENSI PADA MAHASIWA FARMASI YANG MENGIKUTI PHARMACY UPDATE MASALAH TERKAIT PENGGUNAAN OBAT (MTPO) DITINJAU DARI SEGI INTERAKSI OBAT: SEBUAH STUDI KASUS PADA PENDERITA DIABETES MELITUS TIPE 2 (DM TIPE 2) DENGAN PENYULIT HIPERTENSI PROFIL KINERJA PRAKTIK FARMASI KOMUNITAS/APOTEK EFEK EKSTRAK RIMPANG TEMULAWAK (CURCUMA XANTHORRHIZA ROXB.) TERHADAP PENURUNAN KONTRAKSI OTOT POLOS ILEUM TIKUS (RATTUS NOVERGICUS) JANTAN TERISOLASI SECARA IN VITRO SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIFITAS SALEP EKSTRAK ETANOL DAUN JARAK TINTIR(Jatropha multifida L. )SEBAGAI OBAT LUKA BUATAN YANG DIINFEKSI PADA KULIT MARMUT JANTAN (Cavia cobaya) EFEK PENYEMBUHAN LUKA PADA MARMUT DARI MEMBRAN ALGINAT- KITOSAN DAN KALSIUM ALGINAT KITOSAN UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP SEL T47D PENGARUH EKSTRAK ETANOL RIMPANG TEMU MANGGA UJI EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH MERAH EFEK EKSTRAK ETANOL MAJAKANI (Quercus infectoria G. Olivier) TERHADAP RESPON IMUN SELULER MENCIT... xxx UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL DAUN AFRIKA (Vernonia amygdalina Del.) TERHADAP TIKUS JANTAN GALUR WISTAR... v UJI EFEK EKSTRAK ETANOL BIJI JENGKOL (Pithecellobium lobatum Benth.) TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI ALOKSAN... 6 UJI ANTIDIARE EKSTRAK ETANOL MAJAKANI PUTIH (Quercus infectoria G. Olivier) DENGAN METODE TRANSIT INTESTINAL PADA TIKUS...iv PENGUJIAN EFEK ANTIDIARE... 7 UJI EFEK HIPOGLIKEMIK NATRIUM ALGINAT DARI RUMPUT LAUT Sargassum ilicifolium (Turner) C.Agardh TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI ALOKSAN EFEK PEMBERIAN MONOSODIUM GLUTAMAT ( MSG ) TERHADAP TERBENTUKNYA MIKRONUKLEUS PADA SEL DARAH MERAH MENCIT UJI AKTIVITAS ANTIMIELOSUPRESI EKSTRAK ETANOL RIMPANG TEMU MANGGA (Curcuma mangga Valeton & v.zijp.) PADA MENCIT JANTAN YANG DIINDUKSI DENGAN SIKLOFOSFAMIDA... 2 KUMPULAN MAKALAH LENGKAP KATEGORI KIMIA FARMASI... 9 PENURUNAN RESIDU PESTISIDA PADA TOMAT DENGAN METODE PENCUCIAN AKRILAMID DALAM MINYAK GORENG BEKAS PENETAPAN KADAR PROTEIN DAN NON PROTEIN NITROGEN (NPN) PADA ULAT KIDU (RHYNCHOPHORUS FERRUGINEUS) DAN ISBN

5 PEMANFAATAN HEMISELULOSA TONGKOL JAGUNG SEBAGAI ANALISIS KOMPOSISI ASAM LEMAK DAN IDENTIFIKASI POSISI ASAM LAURAT DALAM MINYAK KELAPA MURNI...iv PENETAPAN KADAR CEFADROXIL DALAM SEDIAAN KAPSUL DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI... 1 PENGARUH INTERESTERIFIKASI LEMAK SAPI... 3 PENETAPAN KADAR MERKURI, KROMIUM DAN TEMBAGA PADA KERANG DI PERAIRAN BELAWAN SECARA SPEKTROFOTOMETRI SERAPAN ATOM ANALISIS KANDUNGAN MINERAL KALIUM, NATRIUM, DAN MANGAN PADA CACING TANAH Peryonix sp SECARA SPEKTROFOTOMETRI SERAPAN ATOM PENGEMBANGAN METODE PENETAPAN KADAR BAHAN PEMANIS, PENGAWET, DAN KAFEIN DALAM PRODUK MINUMAN RINGAN BERKARBONASI DENGAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI SIFAT ANTIBAKTERI DARI HASIL HIDROLISIS MINYAK KELAPA MURNI TERHADAP BAKTERI PATOGEN DAN PROBIOTIK PENETAPAN KADAR SEFADROKSIL DALAM SEDIAAN KAPSUL IDENTIFIKASI ASAM LEMAK PALMITAT PADA... 1 KAJIAN HARA TANAH (ph, C-organik, N dan P) PADA LAHAN KEBUN KELAPA SAWIT PT. PANGKATAN INDONESIA YANG DIAPLIKASIKAN LIMBAH CAIR PABRIK KELAPA SAWIT... 5 PENGEMBANGAN METODE KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI SPEKTROMETRI MASSA UNTUK PENETAPAN KADAR RIFAMPISIN, ISONIAZID DALAM SEDIAAN TABLET... 2 PENENTUAN GOLONGAN SENYAWA KIMIA YANG MEMBERIKAN EFEK ANTIDIABETES DARI EKSTRAK KELOPAK BUNGA ROSELA (Hibiscus sabdariffa L.)... 2 PENENTUAN KADAR VITAMIN C PADA KERIPIK KENTANG TERHADAP LAMA PENYIMPANAN DAN KONDISI KEMASAN DENGAN METODE TITRASI IODOMETRI KUMPULAN MAKALAH LENGKAP BIDANG TEKNOLOGI FARMASI... 1 PENGGUNAAN EKSTRAK DAUN PANDAN WANGI (Pandanus amaryllifolius Roxb) SEBAGAI PEWARNA RAMBUT DALAM SEDIAAN KRIM... 2 FORMULASI BENTUK SEDIAAN SACHET NATA DE COCO YANG... 2 PRAPERLAKUAN VITAMIN C TERHADAP BIOAVAILABILITAS KLOMIPRAMIN PENGGUNAAN SERBUK BIJI ALPUKAT (Persea gratissima Gaertn) DALAM FORMULA PEWARNA RAMBUT UJI AKTIVITAS DAN DAN DAYA PELEMBAB... 6 PENGGUNAAN ZAT WARNA KAYU SECANG... 1 ISBN

6 FORMULASI SEDIAAN LIPSTIK MENGGUNAKAN... 5 FORMULASI ORALLY DISINTEGRATING TABLET (ODT) METOKLOPRAMIDA HCL METODE FREEZE DRYING...iv FORMULASI ORALY DISINTEGRATING TABLET (ODT) METOKLOPRAMIDA HCL MENGGUNAKAN KROSPOVIDON DAN AC-DI-SOL DENGAN METODE CETAK LANGSUNG... 4 PENGGUNAAN HASIL MODIFIKASI FISIKA PENGARUH KONSENTRASI PATI DAN PH TERHADAP PEMANFAATAN PATI JAGUNG HASIL ISOLASI OPTIMASI FORMULA SEDIAAN TABLET HANCUR DI MULUT METOKLOPRAMID DENGAN EKSIPIEN SARI TAPE PADAT, CORN STARCH DAN AVICEL PENGARUH PENAMBAHAN ASAM TARTRAT TERHADAP PENINGKATAN NILAI SPF (SUN PROTECTING FACTOR) SEDIAAN TABIR SURYA KOMBINASI OKSIBENZON DAN OKTILMETOKSISINAMAT ISBN

7 B16 PRODUKSI BIOMASSA SECARA IN VITRO PADA PEGAGAN (Centella asiatica) Noverita Sprinse Vinolina Fakultas Pertanian Universitas Sisingamangaraja XII Medan ABSTRAK Penggunaan tumbuhan sebagai obat, berkaitan dengan kandungan kimia yang terdapat dalam tumbuhan tersebut terutama zat bioaktif. Tanpa adanya suatu senyawa bioaktif dalam tumbuhan secara umum tumbuhan itu tidak dapat digunakan sebagai obat. Senyawa bioaktif yang terdapat dalam pegagan merupakan senyawa metabolik sekunder centellosida dan lain-lain. Media terbaik untuk induksi kalus dari daun adalah: [MS + IAA (2 mg/l) + Kn (0,2 mg/l); MS + IBA (0,1 mg/l) + BA (2 mg/l) dan MS + NAA (2 mg/l) + BA (2 mg/l)]. Ketiga media digunakan untuk menginduksi kalus-kalus dari eksplan tangkai daun tetapi bahan ini terbukti kurang efektif untuk induksi eksplan dari daun. Pada media [MS + IAA (2 mg/l) + Kn (0,2 mg/l)], induksi kalus baik tetapi pertumbuhannya sedikit. Pada media [MS + IBA (0,1 mg/l) + BA (2 mg/l)] dan [MS + NAA (2 mg/l) + BA (2 mg/l)] diamati pembentukan kalus yang subur. Pada media dengan NAA, IAA dan IBA akan dihasilkan kalus-kalus yang keras dan kompak, yang tidak diinginkan. Sebaliknya, media yang mengandung 2,4-D (1 mg/l) dengan kombinasi Kn (0,1 mg/l) akan dihasilkan kalus-kalus yang remah, tapi pertumbuhan yang signifikan tidak diinduksi, dan ketika digunakan Kn 1 mg/l tidak ada induksi kalus. Centellosida yang terbanyak dalam kultur kalus adalah madekakosida dan asiatikosida. Jika pada media digabungkan NAA dan BA maka kandungan dari kedua centellosida ini sama. Kandungan dalam kalus kira-kira sepuluh kali lebih rendah daripada tanaman in vitro, kandungannya berkisar antara 1,3-2,5 mg/g berat kering setelah elisitasi. Kandungan asiatikosida pada tanaman in vitro dilaporkan sekitar 50% lebih rendah daripada tanaman yang tumbuh di lapangan. Kata kunci: Produksi biomassa, in vitro, centellosida, pegagan PENDAHULUAN Pegagan (Centella asiatica) merupakan tanaman liar yang banyak tumbuh di perkebunan, ladang, tepi jalan, pematang sawah ataupun di ladang yang agak basah. Tanaman ini berasal dari daerah Asia tropik, tersebar di Asia Tenggara, termasuk Indonesia, India, Tiongkok, Jepang dan Australia kemudian menyebar ke berbagai negara-negara lain. Nama yang biasa dikenal untuk tanaman ini selain pegagan adalah daun kaki kuda dan antanan. Pegagan (Centella asiaticai (L) Urban) telah lama dimanfaatkan sebagai obat tradisional baik dalam bentuk bahan segar, kering maupun yang sudah dalam bentuk ramuan (jamu). Di Australia telah dibuat obat dengan nama Gotu Kola yang bermanfaat sebagai anti pikun dan juga sebagai anti stress. Di Indonesia pegagan telah banyak dimanfaatkan sebagai obat untuk penyembuhan penyakit HIV melalui peningkatan ketahanan tubuh pasien. Secara empirik, pegagan bermanfaat sebagai ISBN

8 penyembuh luka, radang, reumatik, asma, wasir, tuberkulosis, lepra, disentri, demam dan penambah selera makan. Di Cina, pegagan bermanfaat untuk memperlancar sirkulasi darah, bahkan dianggap lebih bermanfaat dibandingkan dengan ginkgo biloba atau ginseng yang berasal dari Korea. Senyawa bioaktif Centella asiatica adalah triterpenoid saponin dan sapogenin dengan kerangka ursane yaitu asiatikosida dan madekasosida yang sangat menarik, demikian juga asam madecassic dan asam asiatik. Asiatikosida dapat mempercepat proses penyembuhan luka dan berguna dalam pengobatan kusta dan TBC, sementara madekasosida memiliki sifat antiinflamatory dan secara signifikan mampu meningkatkan sekresi kolagen III. Pegagan berasa manis, bersifat mendinginkan, memiliki fungsi membersihkan darah, melancarkan peredaran darah, peluruh kencing (diuretika), penurun panas (antipiretika), menghentikan pendarahan (haermostatika), meningkatkan syaraf memori, anti bakteri, tonik, antispasma, antiinflamasi, hipotensis, insektisida, antialergi dan stimulan. Saponin yang ada menghambat produksi jaringan bekas luka yang berlebihan (menghambat terjadinya keloid). Karena sifatnya sebagai obat, minat pada tanaman ini telah meningkat beberapa tahun belakangan dan termasuk dalam studi literatur yang menggambarkan produksi triterpenoid saponin pada berbagai bagian tanaman pada berbagai tanaman dan juga dalam kultur suspensi. Dengan demikian pegagan merupakan tumbuhan yang sangat bermanfaat untuk kehidupan. Bertitik tolak dari ini maka penulis tertarik dan ingin mengetahui produksi biomassa secara in vitro pada pegagan. Penelitian Kultur Teknis Dan Efek Farmakologis Pegagan Penelitian yang bertujuan untuk menghasilkan bahan pemuliaan yang akan dimanfaatkan untuk pembentukan varietas unggul, perlu dilakukan karakterisasi dan evaluasi pada kondisi Iingkungan yang sesuai, dengan teknik budidaya yang mampu mendukung munculnya nomor nomor aksesi dengan potensi genetik yang optimal. 1. Studi Keragaman Pegagan (Centella asiatica L. (Urban.) Berdasarkan Karakter Morfologi dan Agronomi Melalui Percobaan Lapang Hasil penelitian Studi Keragaman Pegagan (Centella asiatica L (Urban.) Berdasarkan Karakter Morfologi dan Agronomi Melalui Percobaan Lapang menunjukkan bahwa jenis aksesi nyata mempengaruhi semua peubah pertumbuhan. Artinya aksesi yang ada mempunyai Keragaman pertumbuhan yang berbeda. Dari hasil analisa diperoleh bahwa 8 aksesi memiliki kadar asiatikosida di atas rata-rata, yaitu aksesi Bengkulu, Malaysia, Ciwidey, Smukren, Boyolali, Karanganyar, Cilember, dan ISBN

9 Smugrim (0,72; 0,80; 0,77; 0,67; 0,91; 0,68; 0,77 dan 0,81 %). 2. Studi Keragaman Pegagan (Centella asiatica L. (Urban.) Melalui Pendekatan Molekuler Hasil penelitian Studi Keragaman Pegagan (Centella asiatica L. (Urban.) melalui Pendekatan Molekuler menunjukkan bahwa isolasi DNA untuk pegagan telah berhasil yang ditunjukkan dari hasil elektroforesis. Untuk mendapatkan DNA yang berkualitas sebaiknya ekstraksi diambil dari sampel daun muda, dan waktu pengambilannya sebelum matahari terbit. Dari 22 primer (10-mer) yang digunakan untuk mengamplifikasi DNA bulk terdapat tujuh primer yang mampu menghasilkan produk amplifikasi, yaitu: OPE-15, OPE-19, OPE-20, OPH-05,OPH- 19, OPM-l2 dan OPM-24.Dari 18 aksesi pegagan yang dianalisis berdasarkan penanda RAPD pada tingkat kesamaan 0,73 terdapat 6 kelompok, yaitu (1) Cibodas, Cianjur, Sumedang, Cicurug, Bali, Karanganyar, Smugrim; (2) Cilember, (3) Malaysia; (4) Majalengka, Smukren, Boyalali; (5) Banjaran, Bengkulu, Majalengka, Ungaran, Ciwidey; (6) Manoko. 3. Tanggap Tanaman Pegagan (Centella asiatica L (Urban.) dari Berbagai Ketinggian, Naungan dan Aksesi terhadap Pertumbuhan dan Produksi Triterpenoid dan Asiatikosida Sedangkan pada penelitian Tanggap Tanaman Pegagan (Centella asiatica L (Urban.) dari Berbagai Ketinggian, Naungan dan Aksesi terhadap Pertumbuhan dan Produksi Triterpenoid dan Asiatikosida telah diperoleh 5 aksesi dengan kandungan asiatikosida tinggi (Boyolali, Smugrim, Malaysia, Ciwidey, dan Cilember). 4. Tanggap Tanaman Pegagan (Centella asiatica L. (Urban.) dari Berbagai Ketinggian Tempat dan Pemupukan P, dan Waktu Panen terhadap Pertumbuhan dan Produksi Triterpenoid dan Asiatikosida. Penelitian ini menunjukkan bahwa di dataran tinggi pada umur 2 bulan di tanah Andosol, pemupukan P terhadap pertumbuhan tanaman pegagan hanya nyata mempengaruhi panjang tangkai bunga induk. Pemberian pupuk P menurunkan panjang tangkai bunga induk. Pemupukan P nyata mempengaruhi warna daun. Pemberian pupuk P semakin meningkatkan nilai warna daun Pemupukan P nyata mempengaruhi tangkai daun, sulur daun, bobot panen, dan kandungan asiatikosida. Pemberian pupuk P semakin meningkatkan bobot tangkai daun, sulur daun, bobot panen, dan kandungan asiatikosida. Bobot panen ISBN

10 tertinggi diperoleh pada perlakuan 72 kg P205/ha, tetapi kandungan asiatikosida tertinggi diperoleh pada perlakuan 36 kg P205/ha. Sedangkan di dataran rendah pada umur 2 bulan di tanah Latosol, pemupukan P terhadap pertumbuhan tanaman pegagan hanya nyata mempengaruhi jumlah daun per tanaman, panjang tangkai daun, panjang sulur, dan panjang tangkai bunga induk. Pemberian pupuk P menurunkan jumlah daun, panjang sulur, dan panjang tangkai bunga induk, tetapi meningkatkan panjang tangkai daun. Pemupukan P tidak nyata mempengaruhi warna daun. Pemupukan P nyata memengaruhi sulur daun, bobot panen, dan kandungan asiatiksia tetapi tidak nyata mempengaruhi bobot daun dan tangkai daun. Pemberian pupuk P semakin meningkatkan bobot sulur daun. Bobot panen tertinggi diperoleh pada perlakuan 108 kg P205/ha, tetapi kandungan asiatikosida tertinggi diperoleh pada 36 kg P205/ha. Di dataran tinggi produksi tanaman pegagan lebih rendah, tetapi kandungan asiatikosida lebih tinggi dibandingkan dataran rendah (Ghulamahdi, M., Sandra Arifin Aziz dan Nurliani Bermawie, 2007). Triterpen Saponin pada Pegagan Penggunaan tumbuhan sebagai obat, berkaitan dengan kandungan kimia yang terdapat dalam tumbuhan tersebut terutama zat bioaktif. Tanpa adanya suatu senyawa bioaktif dalam tumbuhan secara umum tumbuhan itu tidak dapat digunakan sebagai obat. Senyawa bioaktif yang terdapat dalam tumbuhan biasanya merupakan senyawa metabolik sekunder seperti alkaloid, flavonoid, steroid, terpenoid, saponin dan lain-lain. Senyawa Terpen Senyawa terpen, pada awalnya merupakan suatu golongan senyawa yang hanya terdiri dari atom C dan H, dengan perbandingan 5 : 8 dengan rumus empiris C5H8 (unit isoprena), yang bergabung secara head to tail (kepala ekor). Oleh sebab itu senyawa terpen lazim disebut isoprenoid. Terpen dapat mengandung dua, tiga atau lebih suatu isoprena. Molekul-molekulnya dapat berupa rantai terbuka atau siklik. Mereka dapat mengandung ikatan rangkap, gugus hidroksil, gugus karbonil atau gugus fungsional lain. Struktur mirip yang mengandung unsur-unsur lain disamping C dan H disebut terpenoid. Dewasa ini baik terpen maupun terpenoid dikelompokkan sebagai senyawa terpenoid (isoprenoid). Biosintesis terpen adalah kondensasi ester secara enzimatik dari porsil-porsil asetil dari asetilkoenzime A. Zat antara dalam pembentukan terpen adalah pirofosfat (difosfat) dari asam mevalonat dan sepasang isopenteril alkohol. Saponin merupakan senyawa glikosida ISBN

11 kompleks yaitu senyawa hasil kondensasi suatu gula dengan suatu senyawa hidroksil organik yang apabila dihidrolisis akan menghasilkan gula (glikon) dan non-gula (aglikon). Saponin ini terdiri dari dua kelompok : saponin triterpenoid dan saponin steroid. Saponin banyak digunakan dalam kehidupan manusia, salah satunya banyak terdapat dalam letak yang dapat digunakan untuk bahan pencuci kain (batik) dan sebagai shampo. Saponin dapat diperoleh dari tumbuhan melalui metoda ekstraksi. Hasil penelitian yang telah dilakukan, disimpulkan tumbuhan pegagan (Centella asiatica) mengandung alkaloid, flavonoid, senyawa terpen dan steroid. Struktur terpenoid yang bermacam ragam itu timbul sebagai akibat dari reaksireaksi sekunder berikutnya seperti hidrolisa, isomerisasi, oksidasi, reduksi dan siklisasi atas geranil-, farnesil -- dan geranil-geranil pirofosfat. Lebih dari 4000 jenis triterpenoid telah diisolasi dengan lebih dari 40 jenis kerangka dasar yang sudah dikenal dan pada prinsipnya merupakan proses siklisasi dari skualen. Biosintesis Centellosida adalah senyawa triterpenoid yang dibiosintesis melalui yang jalur mevalonate dalam sitoplasma, (lihat Gambar 1). Biosintesisnya dapat dibagi dalam tiga tahap: 1. Sintesis prekursor universal dari semua terpenoid, isopentenyl difosfat (IPP). 2. Sintesis pertama triterpene, squalene. 3. Sintesis Centellosida. Keterangan: SQS = squalene synthase, CYS = cycloartenol synthase, βas = β-amyrin synthase Gambar 1. Biosintesis triterpen saponin (Mangas et al., 2008) ISBN

12 Pada Gambar 2 dapat dilihat struktur kimia dari triterpen pentasiklik, R 1 = H (asiatikosida) atau OH (untuk madekasosida), R 2 = glucose-glukose-rhamnose (Aziz et al., 2007). Gambar 2. Hubungan antara sterol dan triterpen saponin pada Centella asiatica Baru-baru ini, Kim et al. (dalam Mangas, et. al, 2009) telah mengkloning beberapa gen yangterlibat dalam jalur biosintesis dari triterpenoid saponin dalam C. asiatica, -amyrin sintase (CabAs), seperti cycloartenol sintase (CaCYS), squalene sintase (CaSQS) dan farnesyl difosfat sintase. Dalam konteks ini, data kuantitatif ekspresi gen ini dapat memberikan wawasan keaktifan dan ketidak aktifan gen serta pengaturan gengen dalam jalur biosintetik C. asiatica. Para penulis ini menunjukkan bahwa tingkat perkembangan mrna CabAS pada daun mencapai puncaknya di usia 2-3 minggu dan menurun setelah 4 minggu. Akan tetapi, meskipun terjadi penurunan tingkat mrna CabAS, kandungan asiatikosida daun meningkat dari waktu ke waktu. Untuk menjelaskan hal ini hubungan terbalik antara tingkat mrna CabAS dan kandungan saponin dalam jaringan, telah diusulkan bahwa triterpene aglycones bertindak sebagai komponen struktural membrane selama pertumbuhan dan perkembangan tanaman. Oleh karena itu, karena jumlah transkrip CabAS meningkat pada awal tahap perkembangan daun C. asiatica, diperkirakan bahwa CabAS mungkin memainkan peran dalam mensintesis komponen struktural membran. Penulis juga telah menentukan bahwa jasmonate metil 0.1mM cukup untuk meningkatkan mrna CabAS dan t CaSQS dan dengan demikian akan kandungan triterpene saponin. Produksi Triterpen Saponin Pegagan Secara In Vitro Media Untuk Mendapatkan Kalus yang Besar dan Remah Sebelum membentuk kultur suspensi sel, perlu untuk mendapatkan biomassa yang baik dari kultur kalus yang remah. Berdasarkan beberapa penelitian, pengaturan pertumbuhan akan berbeda dalam medium MS yang diuji untuk memperoleh kalus-kalus dari eksplan daun dan tangkai daun. Eksplan dari daun muda dan petioles itu disterilisasi dan dikulturkan dalam media MS yang ISBN

13 mengandung kombinasi konsentrasi auksin dan sitokinin yang berbeda (Table2). Media yang diuji untuk induksi kalus ditulis dengan huruf miring dalam Tabel 2. Eksplan diinkubasi dalam gelap pada suhu 25 º C dalam cawan petri. Kalus-kalus mulai tumbuh setelah dua minggu dan telah dikembangkan pada minggu keempat. Induksi persentase kalus-kalus dari daun eksplan pada media diuji seperti yang tertera pada Tabel 2. Tabel 2. Induksi dan morfologi dari eksplan C. asiatica dalam medium MS a. PGR: pengatur pertumbuhan tanaman, IAA: indoleacetic acid; 2,4-D: 2,4-asam asetat dichlorophenoxy; IBA: indole naphtaleneacetic asam; KIN: kinetin; BA: 6-benzyladenine; 4PU-30: N-(2-cloro-4 - asam butirat; NAA: piridil)-n '- fenilurea. b. Data mewakili rata 20 bereplikasi / menengah dalam dua mengulangi eksperimen. Italic: Media diuji untuk induksi kalus (Mangas et al., 2009) Media terbaik untuk induksi kalus dari daun adalah: [MS + IAA (2 mg/l) + Kn (0,2 mg/l); MS + IBA (0,1 mg/l) + BA (2 mg/l) dan MS + NAA (2 mg/l) + BA (2 mg/l)]. Ketiga media digunakan untuk menginduksi kalus-kalus dari eksplan tangkai daun tetapi bahan ini terbukti kurang efektif untuk induksi eksplan dari daun. Pada media [MS + IAA (2 mg/l) + Kn (0,2 mg/l)], induksi kalus baik tetapi pertumbuhannya sedikit. Pada media [MS + IBA (0,1 mg/l) + BA (2 mg/l)] dan [MS + NAA (2 mg/l) + BA (2 mg/l)] diamati pembentukan kalus yang subur. Pada media dengan NAA, IAA dan IBA akan dihasilkan kalus-kalus yang keras dan kompak, yang tidak diinginkan. Sebaliknya, media yang mengandung 2,4-D (1 mg/l) dengan kombinasi Kn (0,1 mg/l) akan dihasilkan kalus-kalus yang remah, tapi pertumbuhan yang signifikan tidak diinduksi, dan ketika digunakan Kn 1 mg/l tidak ada induksi kalus. Induksi jaringan kalus bertujuan untuk mendapatkan kalus-kalus yang besar, putih dan remah. Ketiga media yang dipilih untuk induksi yang diuji adalah [MS + NAA (2 mg/l) + BA (2 mg/l)] dan [MS + IAA (2 mg/l) + Kn (0,2 mg / L)] akan terbentuk Kalus-kalus yang kompak dan tanpa pertumbuhan yang signifikan, bila menggunakan media yang mengandung BA dalam kombinasi dengan NAA. Pada media dengan [MS + IBA (0,1 mg/l) + BA (2 mg/l)] untuk multiplikasi in vitro C. asiatica, kalus- ISBN

14 kalus berwarna putih, besar tapi tidak remah. Peneliti juga menggunakan ketiga media ini dengan 1/2 MS garam, di mana kalus-kalus lebih putih tapi pertumbuhannya tetap sama dan tetap tidak remah. Peneliti mengamati bahwa pertumbuhan yang lebih besar dengan mengunakan IBA dibandingkan dengan auksin (IAA, NAA, 2,4-D), untuk memperoleh kalus-kalus yang remah, dan mengubah sitokinin BA menjadi N-(2- cloro-4-piridil)-n '-phenilurea (4PU-30) pada konsentrasi yang berbeda. Telah dilaporkan bahwa sitokinin yang berasal dari phenylurea merupakan sumplemen yang terbaik untuk mendukung pertumbuhan tajuk pada C. asiatica, dan dalam penelitian sebelumnya dengan kultur kalus tembakau peneliti mengamati bahwa 4PU-30 berkembang menjadi kalus-kalus yang besar dan remah. Dengan pengecualian media [MS + IBA (0,1 mg/l) + 4PU-30 (0,2 mg/l)], konsentrasi 4PU-30 yang lain diuji (1, 2 dan 3 mg/l) dan memberikan pertumbuhan yang baik, walaupun dalam tidak ditembukan induksi kalus yang tidak remah. Sebelumnya diperoleh kalus-kalus yang remah dengan menggunakan 2,4-D (2 mg/l), diputuskan untuk menggunakannya sebagai pengganti auksin IBA, mempertahankan kinetin 4PU-30 (3 mg/l). Hasilnya, medium MS + 2,4-D (2 mg/l) + 4PU-30 (3 mg/l), adalah medium yang optimal untuk mendapatkan kalus-kalus yang besar, putih dan remah (Gambar 3). Saat ini penelitian yang sedang dikembangkan di laboratorium bertujuan untuk meningkatkan produksi triterpen saponin dengan kultur suspensi sel C. asiatica. Gambar 3. Aspek keremahan kalus-kalus yang diperoleh dengan 2,4-D (2 mg / L) + 4PU- 30 (3 mg/l) sebelum pembentukan kultur suspensi sel (Mangas et al., 2009). Pola Centellosida pada Kalus dan Tanaman In Kandungan madekasosida, Vitro asiatikosida, asam asiatik dan asam ISBN

15 madekasik pada kultur kalus dalam medium MS dengan regulator pertumbuhan yang berbeda ditunjukkan pada Gambar 4. Angka ini menunjukkan bahwa centellosides yang terbanyak dalam kultur kalus adalah madekakosida dan asiatikosida. Jika pada media digabungkan NAA dan BA maka kandungan dari kedua centellosides ini sama. Kandungan dalam kalus kira-kira sepuluh kali lebih rendah daripada tanaman in vitro, kandungannya berkisar antara 1,3-2,5 mg/g berat kering setelah elisitasi (Gambar 5). Ini mungkin kelihatannya rendah tetapi, sebagaimana disebutkan sebelumnya, kandungan asiatikosida pada tanaman in vitro dilaporkan sekitar 50% lebih rendah daripada tanaman yang tumbuh di lapangan. Gambar 4. Kandungan triterpen saponin dalam kalus Centella asiatica (mg/g berat kering) M : madekasosida A : asiatikosida MA : asam madekasik AA : asam asiatik (Mangas et al., 2009) Gambar 5. Kandungan centellosida tertinggi dan terendah pada kalus (C), bagian tajuk tanaman (AP) dan akar (R) tanaman C. asiatica in vitro (mg/g berat kering) MeJa = Metil Jasmonat (Mangas et al., 2009) ISBN

16 DAFTAR PUSTAKA Achmad. S.A, 1986, Kimia Organik Bahan Alam, Universitas Terbuka, Jakarta. Ahmad, Fasihuddin dan Hasmah Raji, 1993, Kimia Hasilan Semula Jadi dan Tumbuhan Ubatan, Dewan Bahasa dan Pustaka Kementerian Pendidikan Malaysia, Kuala Lumpur. Aziz,Z.A, M.R. Davey, J.B.Power, P. Anthony, R.M.Smith and K.C.Lowe Production of asiatikosida and madekasosida in Centella asitica in vitro and in vivo. Plant Sciences Division, School of Biosciences, University of Nottingham,UK. Biologia Plantarum 51(1): Darwis.D. 2001, Teknik Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Metabolit Sekunder, Workshop Peningkatan Sumber Daya Manusia Untuk Pemanfaatan Sumber Daya Alam Hayati dan Rekayasa Bioteknologi, FMIPA Universitas Andalas Padang. Duke.J, 2005, Phytochemical and Etnobotanical Databases, Maryland, Beltsuille Agricultural Researah Center. Fessenden & fessenden Kimia Organik Jilid II. Jakarta : Erlangga. Ghulamahdi, M., Sandra Arifin Aziz dan Nurliani Bermawie Evaluasi Karakter Morfologi Fisiologi dan Genetik Pegagan Mendukung Standarisasi Mutu Pegagan. Lab Balai Besar dan Pengembangan Pasca Panen, Lab PSPT IPB, Lab Pusat Studi Biofarmaka IPB Lab Tanah IPB. Hart, Harold Kimia Organik. Jakarta : Erlangga Harborne.J.B, 1987, Metode Fitokimia, Penuntun Modern Menganalisa Tumbuhan, terbitan ke-2, Terjemahan Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro, ITB Bandung. Januwati, Mariam dan M. Yusron. Budidaya Tanaman Pegagan. Balai penelitian dan Pengembangan Pertanian. Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatika. Koesniobari, Soendoro Apotik Hijau. Surabaya : Fakultas Kedokteran Universitas Air Langga Makin. H.L, 1977, Biochemistry of Steroids Hormones, London, Nlack Well Scientific Oxford Ikan. R, 1991, Natural Products to Laboratory Guide, 2 nd edition, University of Jerusalem. Mannito.P, 1981, Biosynthesis of Natural Products, Terjemahan PG Sammes, Chicster Ellis Horwood Ltd. Mangas, S., Merce, Bonfill, Lidia Osuna, Elisabeth Moyano, Jaime Tortoriello, Rosa M. Cusido, M. Teresa Pin ol, Javier Palazo n The efect of methyl jasmonate on triterpene and sterol metabolisms of Centella asiatica, Ruscus aculeatus and Galphimia glauca cultured plants. Phytochemistry 67 (2006) Mangas, S., Elisabeth Moyano, Lidia Osuna, Rosa M. Cusido, Mercedes Bonfill, Javier Palazo Triterpenoid Saponin Content and The Expression Level of Some Related Genes In Calli of Centella asiatica. Lett 30: Mangas S., Moyano E., Hernandez-Vazquez L. and Bonfill M Centella asiatica (L) Urban: An Updated Approach Terpenoids. Editors: Javier Palazón and Rosa M. Cusidó 1 Laboratorio de Fisiología Vegetal, Facultad de Farmacia, Universidad de Barcelona, Barcelona, Spain. Departament de Ciencies Experimentals. ISBN