LAMPIRAN. r Pengambilan sampel. Pengolahan sampel. Kandimgan substrat 25%, 50%, 75% dan 100% (w/v) Berat starter 15,25, 35, 45 dan 55 gram

Transkripsi

1 LAMPIRAN Lampiran 1. Bagan rancangan penelitian r Pengambilan sampel Tahap I (Penetan kandungangula pereduksi) Pengolahan sampel Tahap II (Penetapan kandungan substrat optimal) Kandimgan substrat 25%, 50%, 75% dan 100% (w/v) alkohol substrat optimal r Tahap III (Penetan Berat starter optimal) Berat starter 15,25, 35, 45 dan 55 gram alkohol r Berat starter optimal TahapIV (Menentukan waktu fermentasi optimal untuk asam asetat) Variabel waktu fermentasi 3,4, 5, 6, 7, 8,9,10, dan 11 hari asam asetat Waktu fermentasi optimal

2 Lampiran 2. Pembuatan larutan 1. Larutan reagen Nelson-Somogyi - Reagen A : 1,5 gram K-Na-Tartarat, 3 g NaaCOa anhidrat, 18 g Na2S04 anhidrat dilarutkan ke dalam 100 ml akuades dengan pemanasan. - Reagen B : 1 gram CUSO4.5H2O dan 9 g Na2S04 anhidrat ke dalam 50 ml akuades, diaduk hingga semuanya larut dan diteteskan 1-2 tetes H2SO4 pekat. - Reagen Nelson-somogyi: Larutan reagen A dan Reagen B dicampurkan dengan perbandingan 4:1. 2. Larutan arseno molibdat 12,50 g ammonium molibdat tetrahidrat dilarutkan dalam 200 ml akuades. 10,5 ml H2SO4 pekat dan 1,5 g disodium hidrogen arsenat dilarutkan dalam 12,5 ml akuades. Larutan ini dituangkan ke dalam larutan molibdat, lalu diencerkan hingga 250 ml. Setelah bercampur baik, larutan ini dituangkan ke dalam botol coklat yang telah dibimgkus dengan aluminium foil (larutan tidak boleh terkena sixm tampak). Jika ada inkubator, larutan ini diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam sampai 48 jam. Bila tidak ada inkubator, disimpan pada suhu kamar sampai 72 jam. Setelah itu, larutan ini disimpan ke dalam lemari es tanpa memindahkaimya dari dari botol coklat. Dalam keadaan ini arsenomolibdat dapat disimpan untuk waktu yang lama. 3. Indikator fenol ftalein (pp) Sebanyak 0,5 gram bubuk fenol ftalein dilarutkan dengan 50 ml alkohol (etanol). Kemudian ditambahkan 50 ml aquades dan aduk sampai homogen, kemudian simpandalam botol dan beri label. 35

3 Lampiran 3. Kurva Icestabilan wama penentuan gula pereduksi I i j ' 1 i ' i i j i 1 1 I i i U i M 1 \ 1 i ; 1 j j j I! i i 1 ] 1 j 1! i i ': \ ]! i 1 i waktu (menit) J t Lampiran 4. Kurva panjang gelombang optimum penentuan gula pereduksi Panjang gelombang Lampiran 5. Kurva standar penentuan gula pereduksi 36

4 Lampiran 6. Contoh perhitungan kandungan gula pereduksi Absorban sampel = 0,42 (Limbah daging nenas) Persamaan linier y = 0,022x y = 0,022x 0,42 = 0,022x X = 0,42 0,022 X = 19,0909 ppm (kandungan yang terukur) X = 19,0909 ppm x 4000 (pengenceran) X = 76363,64 ppm Lampiran 7. Hasil penetapan asam asetat dengan metode titrimetri Lama fermentasi Volume titrimetri Rata-rata (fp 250x) % 3 0,3 0,4 0,35 0,35 0,35 2,48 4 0,45 0,35 0,45 0,35 0,4 2,83 5 0,5 0,6 0,5 0,6 0,55 3,89 6 0,6 0,5 0,6 0,6 0,575 4,07 7 0,6 0,5 0,55 0,6 0,55 3,89 8 0,55 0,55 0,5 0,6 0,55 3,89 9 0,6 0,6 o;6 0,6 0,6 4, ,6 0,6 0,6 0,6 0,6 4, ,6 0,6 0,6 0,6 0,6 4,248 Contoh perhitimgan: NaOH = 0,0944 N Volume sampel ==10mL Faktor pengenceran = 250 Volume NaOH titrimetri =0,6mL asam adalah : Vsampel. Nsampel ~ VNaOH.NNaOH loml.nsampei = 0,6mL. 0,0944 N Nsampel = 0,1416 N (tcrukur) 37

5 Berat asam total terukur = 0,1416 x 10 x 60 = 84,69 mg Kadar asam total dalam sampel = (0,08469 gram x 250) x 100% 500 gram sampel = 4,248% Lampiran 8. Kurva standar pengukuran asam asetat dengan metode HPLC g % _y = ,384x ,732^ 2: 0.20% 0.40% 0.60% 0.80% 1.00% 1.20% Konsentrasi standar Lampiran 9. Contoh perhitungan penetapan kandungan asam asetat dengan metode HPLC Persamaan linier : y = ,3684x ,7315 Luas area = y = ,3684x , = ,3684x ,7315 x= , ,3684 x = 0,42238 % X 10 (faktor pengenceran) x = 4,2238 %

6 Lampiran 10. Contoii kromatogram Uji kesesuaian sistim HPLC 6/16Q01010;52;451 /1 Acquired by Sample Name Sample ID Injection Volume Data File Name Method File Name Batch File Name Report File Name Data Acquired Data Processed Admin pangan Llmt>ah Nenas 20 ul UKSeicd PK.As.Asetat.lcm Default Icr 6/11/2010 2:17:36 PM 6/11/2010 2:24:41 PM <Chromatogram> mv 1«C \Ui>SoluHom\[M«li>n)iKl1\ta*m IMM vwndryuks fi.lcd i ^ ttwachl/jmnm <Results> mm PeakTable Detector A Chi 214nm Peak# Ret. Time Area Height S Total \ Name C:\LabSolutlons\Data\Project1\Asam asetat wendry\uks 6.lcd

7 Lampiran IL Contoh kromatogram pengukuran standar asam asetat 6/16/ :47:38 1 /1 Acquired by Sampte Name Sample ID Injection Volume Data File Name Method File Name Batch File Name Report File Name Data Acquired Data Processed Admin pangan Limbah Nenas 20 ul baku 0 8%.lcd PKAsAsetatlcm Default Icr 6/11/ :35:04 PM 6/11/ :57:39 PM <Chromatograin> CALabSolutii>nsVData\Proiecl1\Asam asetal wendry\bal<u 0 lc<j DMA CM S a 1Cl«*Chl/2l*»n <Results> PeakTable Elector A Chi 2l4nm Peak# Ret. Time Area Height Name j ^ Total C:U.abSolutions\Data\Proiect1\Asam asetat wendry\baku 0 8% ted 40