A = log P dengan A = absorbans P 0 = % transmitans pada garis dasar, dan P = % transmitans pada puncak minimum

Transkripsi

1 LAMPIRAN

2 12 Lampiran 1 Prosedur pencirian kitosan Penelitian Pendahuluan 1) Penentuan kadar air (AOAC 1999) Kadar air kitosan ditentukan dengan metode gravimetri. Sebanyak kira-kira g kitosan dimasukkan ke dalam cawan porselen yang telah diketahui bobotnya, kemudian cawan beserta isinya dimasukkan ke dalam oven pada suhu 105 C selama 3 jam. Setelah itu, dimasukkan ke dalam desikator dan ditimbang. Pengeringan dan penimbangan diulangi setiap jam sampai diperoleh bobot konstan. Kadar air kitosan dihitung dengan persamaan Bobot sampel awal - bobot sampel kering Kadar air = 100% Bobot sampel awal 2) Penentuan kadar abu (AOAC 1999) Kadar abu kitosan juga ditentukan secara gravimetri. Cawan porselen dibersihkan dan dipanaskan dalam tanur untuk menghilangkan sisa kotoran yang menempel pada cawan, kemudian didinginkan dalam eksikator dan ditimbang. Sebanyak kira-kira g kitosan dimasukkan ke dalam cawan tersebut dan dipanaskan sampai tidak berasap, kemudian dibakar dalam tanur pengabuan dengan suhu 600 ºC sampai diperoleh abu berwarna putih. Setelah itu, cawan beserta isinya didinginkan dalam eksikator dan ditimbang. Kadar abu kitosan dihitung dengan persamaan bobot abu Kadar abu = 100% bobot sampel 3) Penentuan DD (Domszy & Robert 1985 dalam Khan et al. 2002) Derajat deasetilasi kitosan ditentukan dengan metode garis dasar menggunakan FTIR. Kitosan dibuat pelet dengan KBr 1%, kemudian dilakukan penyusuran pada daerah frekuensi cm -1. Derajat deasetilasi ditentukan dengan rumus P0 A = log P dengan A = absorbans P 0 = % transmitans pada garis dasar, dan P = % transmitans pada puncak minimum A % DD = % A dengan A 1655 = absorbans pada bilangan gelombang 1655 cm -1 (serapan pita amida) A 3450 = absorbans pada bilangan gelombang 3450 cm -1 (serapan gugus hidroksil), dan 1.33 = A1655 untuk kitin yang terdeasetilasi sempurna (100%) 4) Penentuan bobot molekul kitosan (Tarbojevich & Cosani 1996) Bobot molekul kitosan ditentukan dengan menggunakan metode viskometri. Sebanyak kira-kira g kitosan dilarutkan dalam 100 ml asam asetat 0.5 M, kemudian diambil sebanyak 5 ml dan dimasukkan ke dalam viskometer Ostwald-Cannon-Fenske untuk ditentukan waktu alirnya. Pengukuran

3 13 juga dilakukan untuk beberapa konsentrasi kitosan lainnya dan waktu alir dibaca sebanyak tiga kali ulangan. Bobot molekul kitosan dihitung dengan menggunakan persamaan Mark- Houwink: Viskositas relatif η r = η/η o t/t o Viskositas spesifik η sp = η r -1 Viskositas intrinsik [η] = (η sp /c) c η = KM α dengan K = 3.5 x 10-4 ml/g α = 0.76 T = waktu alir zat t 0 = waktu alir pelarut η = viskositas zat η 0 = viskositas pelarut M = bobot molekul zat Seluruh pencirian di atas dilakukan dengan mengambil sampel secara acak pada 3 titik dengan 3 kali ulangan.

4 14 Lampiran 2 Diagram alir penelitian utama Penelitian Utama: Pembuatan dan Uji Difusi Membran Gel Kitosan-CMC Pembuatan gel kitosan-cmc: kitosan 3% (b/v) dalam asam asetat 1% (v/v) + CMC 1% (b/v) + glutaraldehida 6% (v/v) Pencirian membran (SEM) Uji difusi: Sel 1: ketoprofen 25, 50, atau 75 mg/l dalam etanol-air (1:1) Sel 2: pelarut dalam penangas air suhu 37 atau 42 C; alikuot diambil setiap 30 menit sampai tercapai konsentrasi kesetimbangan (C s ); [ketoprofen] diukur dengan spektrofotometer UV/Vis pada λ 258 nm Pemodelan C s, D dan J dengan metode RSM untuk mempelajari pengaruh h, A, dan T.

5 15 Lampiran 3 Hasil pencirian kitosan 1) Kadar air dan abu Ulangan ke- Sampel Kadar air (%) Kadar abu (%) 1 Kitosan Kitosan Kitosan Rerata ) Derajat deasetilasi A 1655 = log = A 3450 = log = % DD = 1 100% = %

6 16 3) Bobot molekul Waktu alir larutan kitosan Konsentrasi Sampel 1 Sampel 2 Sampel 3 t (det) Rerata t (det) Rerata t (det) Rerata Contoh perhitungan untuk sampel 1: Dibuat kurva hubungan antara lnη sp /c dan c, sesuai dengan persamaan: lnη sp /c =ln [η] + k [η] 2 c y a b x Kurva penentuan bobot molekul sampel ln (nsp/c) y = x R 2 = konsentrasi Diperoleh [η] = yang jika dimasukkan dalam persamaan [η] = KM α menghasilkan M = g/mol Kisaran bobot molekul kitosan adalah ( x ) g/mol

7 17 Lampiran 4 Hasil uji difusi No h (µm) A (mg/l) T ( C) C s (mg/l) t (jam) D (cm 2 /det) 10-8 J(g/cm 2 det)

8 18 Lampiran 5 Analisis keragaman C s, D, dan J Analysis of Variance for Cs Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression Linear Square Interaction Residual Error Lack-of-Fit Pure Error Total Analysis of Variance for D Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression 9 643, , , ,21 0,000 Linear 3 626,174 2, , ,79 0,093 Square 3 14,407 3, , ,93 0,059 Interaction 3 3,176 3, , ,35 0,074 Residual Error 5 1,216 1, ,24312 Total ,972 Analysis of Variance for J Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression Linear Square Interaction Residual Error Lack-of-Fit Pure Error Total