LAMPIRAN. Persiapan alat dan bahan. Sterilisasi alat. Pembuatan media. Inisiasi kalus. Pengamatan. Penimbangan dan subkultur.

Transkripsi

1 LAMPIRAN Lampiran 1 Skema Penelitian Persiapan alat dan bahan Sterilisasi alat Pembuatan media Inisiasi kalus Pengamatan Penimbangan dan subkultur Hasil 80

2 81 Lampiran 2 Skema Kerja Sterilisasi Alat Direndam alat (botol kultur, glassware, alat diseksi) dengan teepol selam 24 jam Dicuci dengan menggunakan deterjen, dibilas dengan air mengalir dan aquades steril dan dikeringkan di dalam oven Ditutup botol dengan plastik dan dibungkus cawan petri dengan kertas kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilisasi selama 60 menit dengan suhu C Dibungkus alat-alat diseksi dengan alumunium foil dan disterilisasi dalam oven selama 3 jam pada suhu C Disimpan dalam ruang steril

3 82 Lampiran 3 Perhitungan Pembuatan Media 1. Media MS a. Media MS untuk 1 L dari Universitas Muhammadiyah Malang diencerkan sampai 600 ml. b. Media MS 600 ml dibagi untuk media, masing-masing 150 ml. c. Selanjutnya media MS 150 ml ditambahkan ZPT 2,4-D dan air kelapa sampai 250 ml. d. Pembagian media ini untuk pembuatan 4 macam media. 2. ZPT 2,4-D a. Larutan stok 2,4-D 100 ppm 2,4-D = 10 mg 2,4-D ml aquades b. Pengambilan larutan stok 2,4-D 1) 1 mg/l V 1 M 1 = V 2 M 2 V 1 (100) = (250)(1) V 1 = 2,5 ml 2) 2 mg/l V 1 M 1 = V 2 M 2 V 1 (100) = (250)(2) V 1 = 5 ml 3) 3 mg/l V 1 M 1 = V 2 M 2 V 1 (100) = (250)(3) V 1 = 7,5 ml 3. Air kelapa (AK) a. 10% 10% x 250 ml = 25 ml b. 15% 15% x 250 ml = 37 ml c. 20% 20% x 250 ml = 50 ml 4. Media a. Media 1 MS + ZPT+ AK+ Aquades = = 250 ml b. Media 2 MS + ZPT+ AK+ Aquades = = 250 ml c. Media 3 MS + ZPT+ AK+ Aquades = = 250 ml

4 d. Media 4 MS + ZPT+ AK+ Aquades = , ,5 = 250 ml e. Media 5 MS + ZPT+ AK+ Aquades = , ,5 = 250 ml f. Media 6 MS + ZPT+ AK+ Aquades = , ,5 = 250 ml g. Media 7 MS + ZPT+ AK+ Aquades = = 250 ml h. Media 8 MS + ZPT+ AK+ Aquades = = 250 ml i. Media 9 MS + ZPT+ AK+ Aquades = = 250 ml j. Media 10 MS + ZPT+ AK+ Aquades = , ,5 = 250 ml k. Media 11 MS + ZPT+ AK+ Aquades = , ,5 = 250 ml l. Media 12 MS + ZPT+ AK+ Aquades = , ,5 = 250 ml 83

5 84 Lampiran 4 Hasil Penelitian 1. Munculnya eksplan berkalus Media 2,4-D (mg/l) Ulangan (Hari) + Air Kelapa (%) I II III Total Rata-Rata Keterangan ,33 Hidup ,33 Hidup ,33 Hidup ,00 Hidup ,67 Hidup ,33 Hidup ,00 Tidak tumbuh kalus ,00 Tidak tumbuh kalus ,33 Hidup ,00 Hidup ,33 Hidup ,33 Hidup Total Persentase kalus Media 2,4-D (mg/l) Ulangan (%) + Air Kelapa (%) I II III Total Rata-Rata ,33 0,00 0,00 33,33 11, ,00 66,67 0,00 166,67 55, ,33 66,67 0,00 100,00 33, ,67 100,00 100,00 266,67 88, ,67 100,00 100,00 266,67 88, ,33 33,33 0,00 66,67 22, ,00 0,00 0,00 0,00 0, ,00 0,00 0,00 0,00 0, ,67 100,00 0,00 166,67 55, ,00 100,00 100,00 300,00 100, ,33 33,33 33,33 100,00 33, ,33 66,67 66,67 166,67 55,56 Total 566,67 666,67 400, ,33

6 85 3. Berat basah kalus Media 2,4-D (mg/l) Ulangan (gr) + Air Kelapa (%) I II III Total Rata-Rata ,0234 0,0000 0,0000 0,0234 0, ,0373 0,0077 0,0000 0,0450 0, ,0347 0,0255 0,0000 0,0602 0, ,1198 0,1707 0,1733 0,4638 0, ,0158 0,0131 0,0103 0,0392 0, ,0172 0,0209 0,0000 0,0381 0, ,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0, ,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0, ,0235 0,0149 0,0000 0,0384 0, ,0606 0,0725 0,0526 0,1857 0, ,032 0,0068 0,008 0,0468 0, ,0510 0,0326 0,0562 0,1398 0,0466 Total 0,4151 0,3646 0,3005 1, Gambar morfologi kalus Media 2,4-D (mg/l) + Air Kelapa (%) Ulangan I II III Keterangan Hijau kecokelatan, kompak Putih kekuningan, kompak Hijau kecokelatan, kompak

7 Kekuningan, kompak Putih kehijauan, kompak Kuning kehijauan, kompak Tidak tumbuh kalus Tidak tumbuh kalus Putih kekuningan, kompak Putih kekuningan, intermediet

8 Hijau kecokelatan, kompak Putih kekuningan, remah

9 88 Lampiran 5 ANAVA 1. Munculnya eksplan berkalus

10 2. Persentase kalus 89

11 3. Berat basah kalus 90

12 91

13 92

14 93 Lampiran 6 Komposisi Media MS 1000 ml Garam Mineral Kebutuhan Stok Yang Diambil Makro KNO mg/100 ml 10 ml MgSO 4. 7H 2 O mg/100 ml 10 ml CaCl 2. 2H 2 O mg/100 ml 10 ml KH 2 PO mg/100 ml 10 ml NH 4 NO mg/100 ml 10 ml Mikro FeSO 4. 7H 2 O 27, mg/100 ml 1 ml Na 2 EDTA 37, mg/100 ml 1 ml ZnSO 4. 7H 2 O 8,6 860 mg/100 ml 1 ml H 3 BO 3 6,2 62 mg/50 ml 5 ml Kl 0,83 83 mg/50 ml 0,5 ml Na 2 MoO 4. 2H 2 O 0,25 25 mg/50 ml 0,5 ml CoCl 2. 6H 2 O 0, mg/100 ml 0,1 ml CuSO 4. 5H 2 O 0, mg/100 ml 0,1 ml MnSO 4. 4H 2 O 22, mg/100 ml 1 ml Vitamin Myo-inositol mg/50 ml 2 ml Niasin 0,5 50 mg/50 ml 0,5 ml Piridoksin-HCl 0,5 50 mg/50 ml 0,5 ml Tiamin 0,1 50 mg/100 ml 0,2 ml

15 94 Lampiran 7 Alat, Bahan dan Kegiatan Penelitian 1. Alat Alat-Alat Gelas Hot Plate Autoklaf Oven LAF Timbangan Analitik Cawan Petri Dan Alat Diseksi Steril Ruang Inkubator Freezer Timbangan Analitik ph Meter 2. Bahan Media Karet, Plastik dan Label Bahan-Bahan Sterilisasi Eksplan

16 95 Media Sterilisasi Ruang dan Alat-Alat Bahan Untuk Inisiasi Spiritus dan Formalin Pegagan 3. Kegiatan penelitian Sterilisasi Kering Alat Pembuatan Media Inisiasi Sterilisasi Eksplan Penimbangan Bahan Pencucian Alat-Alat Perendaman Alat dengan Tipol Sterilisasi Media Mengukur ph Pengamatan

17 96

18 97

19 98 Lampiran 10 Daftar Riwayat Hidup DAFTAR RIWAYAT HIDUP Nama Tempat, Tanggal Lahir Jenis Kelamin Kewarganegaraan Agama / Status Yusria Nazza Malang, 15 Juni 1991 Perempuan Indonesia Islam / Belum Menikah No. Identitas SIM Alamat Jalan Tirto RT. 04 RW. 05 Desa Pagedangan Kecamatan Turen Kabupaten Malang No. HP RIWAYAT PENDIDIKAN Tingkat Tahun Lembaga Lokasi Keterangan Sekolah Dasar MI. Hidayatul Falah Jl. Suko 03 Pagedangan Turen Lulus Sekolah Mengah Pertama MTs.Negeri Turen Jl. Kenongosari 16 Turen Lulus Sekolah Menengah Akhir MAN Malang I Jl. Baiduri Bulan 40 Malang Lulus Malang, 07 September 2013 Yusria Nazza