1 Jurnal Kesehatan Ilmiah Nasuwakes Vol.8 No.1, April 2015, 1-7

Transkripsi

1 1 Jurnal Kesehatan Ilmiah Nasuwakes Vol.8 No.1, April 2015, 1-7 UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL ALGA MERAH (Eucheuma cottonii) SEBAGAI ANTI JAMUR TERHADAP Candida albicans THE EFFECTIVENESS TEST OF RED ALGAE EXTRACT ETHANOL (Eucheuma cottonii) as ANTI FUNGI on Candida albicans Munira*, Rasidah**, Marfina*** Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Aceh Abstrak: Candida albicans merupakan jamur opportunistik yang bersifat patogen dan menjadi penyebab utama kandidiasis. Pengobatan penyakit yang disebabkan oleh Candida albicans umumnya menggunakan antibiotik sintetik. Meningkatnya resistensi Candida albicans terhadap antibiotik yang digunakan menjadi suatu masalah baru bagi kesehatan. Hal ini perlu dicari alternatif lain untuk mendapatkan antifungi yang mampu menghambat atau membunuh fungi tersebut. Salah satunya adalah penggunaan bahanbahan alami yang memiliki bahan aktif baik yang berasal dari hewan maupun dari tumbuh-tumbuhan. Eucheuma cottonii diketahui sebagai alga merah memiliki kandungan kimia karagenan dan senyawa fenol, terutama flavonoid yang memiliki sifat antimikroba. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak etanol alga merah ( Eucheuma cottonii) dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans. Penelitian ini dilakukan dengan metode difusi cakram Kirby Bauer yang terdiri dari lima pelakuan yaitu aquadest (kontrol), ekstrak etanol Eucheuma cottonii 80 %, 40 %, 20 % dan 10 % dengan masing-masing empat ulangan. Berdasarkan hasil penelitian diperoleh untuk perlakuan ekstrak etanol 80 %, 40 %, 20 % dan 10 % masing-masing memiliki rata-rata diameter zona hambat sebesar 11,80 mm, 9,90 mm, 8,73 mm dan 7,73 mm. Hasil uji Anova menunjukkan bahwa ekstrak etanol Eucheuma cottonii sangat berpengaruh dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans (P=0.000). Hasi l uji Duncan diperoleh bahwa antar konsentrasi ekstrak etanol Eucheuma cottonii terdapat perbedaan yang nyata (P<0,05). Semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol Eucheuma cottonii semakin besar rata-rata diameter zona hambat terhadap pertumbuhan Candida albicans. Kata kunci : Eucheuma cottonii, Zona hambat, Candida albicans Abstract: This study aimed to determine the effect of ethanol extract of red algae (Eucheuma cottonii) in inhibiting the growth of Candida albicans. This research was conducted by Kirby Bauer disc diffusion method which consists of five, namely the commission of distilled water (control), Eucheuma cottonii ethanol extract 80%, 40%, 20% and 10% respectively with four replications. Based on the results obtained for the treatment of ethanol extract 80%, 40%, 20% and 10% respectively had an average diameter of inhibition zone of mm, 9.90 mm, 8.73 mm and 7.73 mm. Anova test showed that the ethanol extract of Eucheuma cottonii very influential in inhibiting the growth of Candida albicans (P= 0.000). Duncan test results showed that between the concentration of the ethanol extract of Eucheuma cottonii there are significant differences (P <0.05). The higher the concentration of ethanol extract Eucheuma cottonii greater average diameter of inhibition zone against the growth of Candida albicans. Keywords: Eucheuma cottonii, inhibitory zone, Candida albicans 1

2 Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Alga Merah.. 2 PENDAHULUAN Berbagai penyakit akibat infeksi terus menjadi masalah utama dalam bidang kesehatan. Infeksi tersebut umumnya disebabkan oleh berbagai mikroorganisme, seperti virus, protozoa, jamur, dan bakteri. 1 Diantara mikroorganisme tersebut, jamur merupakan salah satu penyebab penyakit infeksi terutama di negara-negara tropis. Iklim tropis dengan kelembaban udara yang tinggi di Indonesia sangat mendukung pertumbuhan jamur. Salah satu jamur (fungi) patogen yang menyebabkan penyakit pada manusia adalah Candida albicans. Candida albicans adalah antibiotik dalam jangka waktu lama, akan berdampak negatif yaitu fungi akan menjadi resisten atau kebal terhadap antibiotika yang diberikan. Meningkatnya resistensi Candida albicans terhadap antibiotikantibiotik yang digunakan menjadi suatu masalah baru bagi kesehatan. Hal ini perlu dicari alternatif lain untuk mendapatkan antifungi yang mampu menghambat atau membunuh fungi tersebut. Salah satunya adalah penggunaan bahan-bahan alami yang memiliki bahan aktif baik yang berasal dari hewan maupun dari tumbuh-tumbuhan. Pemanfaatan alga laut dalam bidang farmasi selama ini masih terbatas, mikroorganisme yang termasuk dalam sedangkan potensi alga laut di Indonesia kelompok yeast dari golongan sangat besar. Potensi alga laut (makroalga) deuteromycota, berkembangbiak dengan Indonesia sangat besar untuk dikembangkan cara aseksual, dan merupakan fungi sebagai bahan baku obat. Eucheuma dimorfik. cottonii diketahui sebagai alga merah Candida albicans merupakan jamur opportunistik penyebab sariawan, lesi pada kulit, vulvavaginistis, candida pada urin (kandiduria), gastrointestinal kandidiasis yang dapat menyebabkan gastric ulcer, atau bahkan dapat menjadi komplikasi kanker. 2 dan 3 menambahkan bahwa jamur Candida albicans dianggap sebagai spesies patogen (Rhodophyceae) yang ditemukan di bawah air surut rata-rata. Alga ini mempunyai talus yang keras, silindris dan berdaging. 4 Sejak 2700 SM Eucheuma cottonii telah digunakan oleh bangsa Cina sebagai bahan sayuran, obat-obatan dan kosmetik, sedangkan di Indonesia digunakan sebagai bahan sayuran, kue, manisan dan obatobatan. dan menjadi penyebab utama kandidiasis. 5 Eucheuma cottonii memiliki Pengobatan penyakit Candida kandungan kimia karagenan dan senyawa albicans umumnya menggunakan antibiotik sintetik. Antibiotik yang digunakan seperti fenol, terutama flavonoid 6. Karagenan, senyawa polisakarida yang dihasilkan dari Tolnaftate, Benzoic acid dan beberapa jenis alga merah memiliki sifat Sodiumtiosulfat. Namun penggunaan antimikroba, antiinflamasi, antipiretik,

3 3 Jurnal Kesehatan Ilmiah Nasuwakes Vol.8 No.1, April 2015, 1-7 antikoagulan dan aktivitas biologis lainnya. Selain karegenan yang merupakan senyawa metabolit primer rumput laut tersebut, senyawa metabolit sekundernya diperkirakan juga dapat menghasilkan aktivitas antibakteri. 7 Aktivitas Eucheuma cottonii sebagai antibakteri telah diteliti, salah satu penelitian yang dilakukan oleh 8 bahwa Eucheuma cottonii dapat menghambat Staphylococcus aureus, namun penelitian tentang aktivitas Eucheuma cottonii sebagai antijamur khususnya terhadap Candida albican belum pernah dilakukan. Oleh sebab itu perlu dilakukan penelitian tentang uji efektivitas ekstrak etanol alga merah (Eucheuma cottonii) sebagai antijamur terhadap Candida albicans. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak etanol alga merah ( Eucheuma cottonii) dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans. METODE PENELITIAN Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorium yaitu menguji efektivitas ekstrak etanol alga merah ( Eucheuma cottonii) dalam menghambat Candida albicans dengan menggunakan metode difusi cakram pada media Potato Dextrose Agar (PDA). Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Jurusan Farmasi Poltekkes Kemenkes Aceh pada bulan Agustus Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan yaitu aquades (kontrol), ekstrak etanol Eucheuma cottonii 80 %, 40 %, 20 % dan 10 %. Masing-masing perlakuan terdiri dari 4 ulangan. Total terdapat 20 satuan percobaan. Data yang diperoleh dari penelitian ini dianalisis secara statistik dengan menggunakan uji ANOVA dan dilakukan uji lanjut Duncan. Data berupa diameter zona hambat didapatkan dengan cara mengukur diameter zona hambat yaitu zona bening yang terdapat di sekitar cakram dengan menggunakan mistar/rol. Penyiapan Simplisia Alga merah diperoleh dari pasar Aceh kemudian dicuci bersih lalu dirajang dan dikering anginkan selanjutnya diserbuk kasar dengan menggunakan blender. Ekstraksi Serbuk alga merah ditimbang sebanyak 100 gram dimasukkan ke dalam wadah kaca bertutup/toples. Kemudian direndam dengan etanol 70% sebanyak 500 ml, lalu ditutup dan disimpan selama 5 hari terlindung dari cahaya dengan sesekali diaduk. Hasil rendaman setelah 5 hari disaring melalui corong kaca yang dilapisi kertas saring, sehingga ampas dan sari terpisah. Ampas ditambahkan etanol 70%, diaduk dan diserkai hingga diperoleh sari sebanyak 1000 ml. Sari alga merah

4 Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Alga Merah.. 4 kemudian disimpan dalam wadah tertutup dan terlindung dari cahaya selama 2 hari. Setelah 2 hari, sari disaring dan kemudian diuapkan dengan cara dipanaskan di atas kompor hingga diperoleh ekstrak kental. Selanjutnya dilakukan pengenceran (b/v) untuk memperoleh konsentrasi 80%, 40%, 20% dan 10%. Pembuatan Media Serbuk media PDA ditimbang sebanyak 9,75 gram dan dimasukkan ke dalam erlenmeyer. Ditambahkan aquadest sebanyak 250 ml dan dipanaskan sampai larut. Dilakukan pemeriksaan ph dan kemudian disterilkan di dalam autoklaf dengan menggunakan batang bengkok. Cakram yang sudah steril direndam dalam aquadest dan dalam masing-masing konsentrasi ekstrak alga merah. Masingmasing kertas cakram ditempelkan di atas permukaan media. Semua petri disk kemudian diinkubasi pada suhu 25 C selama 2 5 hari. Diukur diameter zona hambat yang terbentuk dengan menggunakan mistar. HASIL DAN PEMBAHASAN Penelitian ini menggunakan simplisia alga merah spesies Eucheuma cottonii yang terlebih dahulu dilakukan pengeringan. pada suhu 121 C selama 15 menit. Setelah steril dibiarkan temperaturnya turun hingga Pengeringan bertujuan agar simplisia awet dan dapat digunakan dalam jangka waktu ± 45 C. Media siap dituangkan dalam petri yang lama. Selanjutnya simplisia disk. diserbukkan dengan maksud untuk meningkatkan luas permukaan sehingga Uji Mikrobiologi Masing-masing petri disk dibagi penyari akan lebih mudah menembus dinding sel dan zat aktif yang terdapat di menjadi 5 daerah yaitu perlakuan terdiri dalam sel akan tersari. Dalam penelitian ini, dari P 0, P 1, P 2, P 3 dan P 4. P 0 (aquadest untuk mengekstrak zat aktif dari simplisia sebagai kontrol), P 1 (ekstrak alga merah alga merah menggunakan metode maserasi. konsentrasi 80%), P 2 (ekstrak alga merah konsentrasi 40%), P 3 (ekstrak alga merah Metode maserasi dilakukan dengan cara merendam simplisia selama 5 hari konsentrasi 20%), dan P 4 (ekstrak alga sambil sesekali diaduk. Tujuan dari merah konsentrasi 10%). Media agar PDA pengadukan adalah membasahi sel-sel dituangkan sebanyak ml ke dalam masing-masing petri disk dan ditunggu hingga mengeras. Suspensi jamur Candida albicans diinokulasikan sebanyak 0,2 ml di atas permukaan media, lalu diratakan simplisia, sehingga cairan penyari melewati semua bagian dari sel dan zat aktif dapat tersari dengan sempurna. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat

5 5 Jurnal Kesehatan Ilmiah Nasuwakes Vol.8 No.1, April 2015, 1-7 aktif, zat aktif akan larut karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif yang ada di dalam sel dengan di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak keluar. Peristiwa tersebut terjadi secara berulang sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel. 9 Ekstrak yang diperoleh diuji daya hambatnya terhadap Candida albicans dengan menggunakan metode difusi cakram pada media Potato Dextrose Agar (PDA). Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan menunjukkan bahwa ekstrak etanol Eucheuma cottonii dapat menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans. Hal ini ditandai dengan terbentuknya daerah atau zona bening di sekitar cakram. Setelah dilakukan uji statistik menggunakan Anova menunjukkan bahwa ekstrak etanol alga merah Eucheuma cottonii sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan Candida albicans (P = 0,000). Tabel 1 Hasil analisa data menggunakan Anova dapat dilihat pada Tabel 1. Terbentuknya zona hambat tersebut disebabkan kandungan senyawa kimia yang berperan sebagai antimikroba yang terdapat dalam alga Eucheuma cottonii. Menurut penelitian yang telah dilakukan 6, Eucheuma cottonii memiliki kandungan kimia karagenan dan senyawa fenol, terutama flavonoid. Menurut 10 bahwa senyawa flavonoid merupakan salah satu antimikroba yang bekerja dengan mengganggu fungsi membran sitoplasma. Pada perusakan membran sel ion H + dari senyawa fenol dan turunannya (flavanoid) akan menyerang gugus polar (gugus fosfat) sehingga molekul fosfolipid akan terurai menjadi gliserol, asam karboksilat dan asam fosfat. Hal ini mengakibatkan fosfolipid tidak mampu mempertahankan bentuk membran sel, akibatnya membran akan bocor dan mikroba akan mengalami hambatan pertumbuhan bahkan kematian. Hasil uji Analysis of Variance (Anova) ekstrak etanol alga merah Eucheuma Cottonii terhadap pertumbuhan Candida albicans. Source Model Df Sum of Mean Square Square F Value Between Groups 4 327,867 81, ,896 Within Groups 15 5,395,360 Total ,262 Menurut 7 karagenan merupakan senyawa polisakarida yang dihasilkan dari beberapa jenis alga merah dan memiliki sifat antimikroba, antiinflamasi, antipiretik, antikoagulan dan aktivitas biologis lainnya. Selain karegenan yang merupakan senyawa metabolit primer rumput laut tersebut, senyawa metabolit sekundernya diperkirakan juga dapat menghasilkan aktivitas antimikroba.

6 Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Alga Merah.. 6 Berdasarkan hasil pengukuran ratarata diameter zona hambat ekstrak 80 % menghasilkan rata-rata diameter zona hambat yang paling besar yaitu 11,80 mm, ekstrak 40 % sebesar 9,90 mm, 20 % sebesar 8,73 mm dan 10 % sebesar 7,73 mm. Rata-rata diameter zona hambat dapat dilihat pada Grafik 1. Hal ini menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi semakin besar diameter zona hambat yang terbentuk. Menurut 11 semakin tinggi konsentrasi semakin banyak jumlah zat aktif yang terkandung sehingga semakin besar aktivitas anti mikrobanya. Grafik 1 Rata-rata diameter zona hambat ekstrak etanol alga merah ( Eucheuma cottonii) terhadappertumbuhan Candida albicans Tabel 2 Hasil uji lanjut menggunakan uji Duncan ternyata tidak terdapat perbedaan yang nyata (P<0,05) rata-rata diameter zona hambat antara kontrol (aquades) dengan semua perlakuan yang lain, namun terdapat perbedaan yang nyata (P<0,05) antar masing-masing konsentrasi ekstrak etanol alga merah (Eucheuma cottonii) dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans. Hasil uji lanjut dapat dilihat pada Tabel 2. Hasil uji lanjut rata-rata diameter zona hambat ekstrak etanol alga merah cottonii terhadap pertumbuhan Candida Albicans (Eucheuma cottonii) terhadap pertumbuhan Candida albicans Perlakuan Rata-rata Diameter Zona Hambat ± SD (mm) Aquadest 0,00 a ± 0,00 Konsentrasi 80 % 11,80 e ± 0,99 Konsentrasi 40 % 9,90 d ± 0,20 Konsentrasi 20 % 8,73 c ± 0,72 Konsentrasi 10 % 7,73 b ± 0,51 Diameter Zona Hambat Kontrol 10% 20% 40% 80% Perlakuan Berdasarkan Tabel 2. dapat dilihat bahwa ekstrak etanol alga Eucheuma cottonii konsentrasi 80 % berbeda nyata dengan 40 %, 20 % dan 10 %. Ekstrak 40 % juga berbeda nyata dengan konsentrasi 20 % dan 10 %. Begitu juga halnya dengan konsentrasi 20 % juga berbeda nyata dengan 10 %. KESIMPULAN Ekstrak etanol alga merah Eucheuma cottonii sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan Candida albicans (P= 0,000). Ekstrak etanol alga merah Eucheuma cottonii menghasilkan rata-rata diameter zona hambat yang paling besar yaitu 11,80 mm dan berbeda nyata dengan rata-rata

7 7 Jurnal Kesehatan Ilmiah Nasuwakes Vol.8 No.1, April 2015, 1-7 diameter zona hambat ekstrak alga konsentrasi 40 %, 20 % dan 10 % yang masing- masing memiliki rata-rata diameter zona hambat sebesar 9,90 mm, 8,73 mm dan 7,73 mm. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol alga Eucheuma cottonii semakin besar rata-rata diameter zona hambat yang dihasilkan dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans. SARAN Perlu dilakukan uji kualitatif dan kuantitatif terhadap ekstrak yang diperoleh sebelum dilakukan uji. UCAPAN TERIMA KASIH Penulis mengucapkan terima kasih kepada UPPM dan Jurusan Farmasi Poltekkes Kemenkes Aceh serta semua pihak yang telah membantu kelancaran pelaksanaan penelitian ini. DAFTAR PUSTAKA Madigan, Biology of Microorganism, Ed 8th, Prentice Hall, New Jersey, Kurniawan, J.A., Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Rimpang Binahong ( Anredera cordifolia (Tenore) Steen) Terhadap Jamur Candida albicans serta Skrining Fitokimianya, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Mutschler, E., Dinamika Obat, ITB, Bandung, Romimuhtarto, K., dan Juwana, S., Biologi Laut, Jakarta, Indriani, H. dan Sumiarsih, E., Rumput Laut (Budi Daya, Pengolahan dan Pemasaran), Penebar Swadaya, Jakarta, Suptijah, P., Rumput Laut: Prospek dan Tantangannya. /~ugm2/mti101.htm, 2003, diakses tanggal 10 April Shanmugam, M. dan Mody, K.H., Heparinoid-active Sulphated Polisaccha-rides from Marine Algae as Potential Blood Anticoagulant Agents. Marine Algae & Marine Environment Discipline. Central Salt & Marine Chemicals Research Institute. Bhavnagar, , India pdf, 2000, diakses tanggal 10 April Dwyana, Z, Johannes, E. dan Sareong, W., Uji Efektivitas Ekstrak Kasar Alga Merah ( Eucheuma cottonii) sebagai antibakteri Terhadap Bakteri Patogen. FMIPA Biologi Universitas Hasanuddin, Makassar. handle/ /4282/artikel PUBLIKASI.pdf, 2012, diakses tanggal 17 April Ramadi, L., Pengaruh Ekstrak Metanol Daun Asam Jawa (Tamarindus indica L) terhadap pertumbuhan Escherichia coli secara in vitro, Skripsi, Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh, Volk. W. A and Wheeler, M.F., Mikrobiologi Dasar, Alih Bahasa: Markham. PT. Gelora Aksara Pratama, Jakarta, Brooks, G.F., Butel, J.S., dan Morse, S.A., Mikrobiologi kedokteran, Alih Bahasa oleh Mudihardi, E, Kuntaman, Wasito, E.B et al, Salemba Medika, Jakarta, 2007.