LAMPIRAN 1. Pembuatan Reagen Bradford dan Larutan Standar Protein

Transkripsi

1 49 7. LAMPIRAN LAMPIRAN 1. Pembuatan Reagen Bradford dan Larutan Standar Protein 1.1. Pembuatan Reagen Bradford Commasive Blue sebanyak 0,01 gram dilarutkan ke dalam 5 ml etanol 95% kemudain ditambah asam fosfor 85% sebanyak 10 ml, kemudian di saring dengan menggunakan kertas saringdan disimpan dalam botol gelap pada suhu rendah. Saat hendak akan digunakan maka harus dilakukan pengenceran sebanyak lima kali. (Bradford, 1976) 1.2. Pembuatan Larutan Standar Protein Bovine Serum Albumin (BSA) sebanyak 25 mg dilarutkan ke dalam 10 ml aquadest dan hasil pencampuran dinamakan larutan stock BSA 2500 ppm. Setelah itu diambil 4ml dan diencerkan hingga 100 ml dengan menggunakan aquadest. Setelah itu membuat pengukuran terhadap standar protein terlarut dengan konsentrasi 0,10, 20,30, 40, 50, 60, 70, 80, 90,dan 100. Setelah itu diambil masing masing 0,1ml larutan standar dari masing masing konsentrasi kemudian ditambahkan dengan 5ml larutan Bradford dan didiamkan 5 menit,dan dispektrofotometri dengan menggunakan panjang gelombang 595 nm. 49

2 50 LAMPIRAN 2. Komposisi Larutan Kerja dalam Elektroforesis SDS-Page Nama Larutan Larutan A (Acrylamide Stock Solution), 100 ml 30% acrylamide, 0,8% bisacrylamide Larutan B (4x Separating Gel Buffer), 100 ml Komposisi 29,2 gram acrylamide 0,8 gram bis-acrylamide 75 ml 2M Tris-HCl (ph 8,8) --- 1,5 M 4 ml 10% SDS --- 0,4 % 21 ml ddh2o Larutan C 50 ml 1M Tris-HCl (ph 6,8) --- 0,5 M (4x Stacking Gel Buffer), 100 ml 4 ml 10% SDS --- 0,4 % 46 ml ddh2o 10% Ammonium Persulphate 0,5 gram APS (APS) 5 ml DDH2O Buffer Elektroforesis 3 gr Tris Mm 14,4 gram glycine Mm 1 gram SDS --- 0,1% ddh2o sampai 1 liter Sampel Buffer 3,028 gram Tris 0,25 ml larutan C 0,4 ml 10% SDS 25 ml gliserol 0,2 mg bromophenol blue 0,031 gram Dithiothreitol (DTT) Sumber : (Bollag et al., 1991 dengan modifikasi)

3 51 LAMPIRAN 3. Kurva Standar BSA (Bovine Serum Albumin) Berat Molekular Weight 3.1. Kurva Standar untuk Mie jahe konsentrasi 0% dan 1% y = x R² = Series1 Linear (Series1) Kurva Standar untuk Mie Jahe konsentrasi 2%

4 52 LAMPIRAN 4. Analisis SPSS 4.1. Pengujian SPSS untuk Warna L a b Statistic df Statistic df * * * * * * * L a b N

5 Pengujian SPSS untuk Kelentingan Tingkat Kelentingan pada Mie Jahe Formulasi A Statistic df Statistic df * * * Tingkat Kelentingan pada Mie Jahe Formulasi B Statistic df Statistic df * * *

6 Pengujian SPSS untuk Aktivitas Antioksidan Aktivitas Antioksidan pada Mie Jahe Mentah Statistic df Statistic df * * * Aktivitas Antioksidan pada Mie Jahe Matang Statistic df Statistic df * * *