Ekstraksi Minyak Buah Makasar (Brucea javanica (L.) Merr.) selama 1 menit dan didiamkan selama 30 menit. diuapkan dengan evaporator menjadi 1 L.

Transkripsi

1 LAMPIRAN 47

2 Lampiran 1. Prosedur Kerja Ekstraksi Minyak Buah Makasar (Brucea javanica (L.) Merr.),Penetapan Kadar Protein, Penetapan Kadar Lemak, dan Penetapan Kadar Kolesterol Hati Itik Cihateup 48 Ekstraksi Minyak Buah Makasar (Brucea javanica (L.) Merr.) Produksi minyak esensial diperoleh secara ekstraksi sesuai dengan prosedur penelitian Subeki dkk., (2006) 1. Sebanyak 80 kg tepung buah makasar direndam selama 1 minggu dan setiap hari selama 10 menit dilakukan pengadukan. Campuran divorteks selama 1 menit dan didiamkan selama 30 menit. 2. Filtrat disaring dengan menggunakan kain saring dan kemudian diuapkan dengan evaporator menjadi 1 L. 3. Filtrat pekat tersebut kemudian diekstrak dengan etil asetat (EtOAc) hingga diperoleh fraksi air dan EtOAc. 4. Fraksi CHCl ³ diuapkan hingga kering dan kemudian dimasukkan ke dalam silika gel kolom kromatografi dan dielusi dengan clorofom sehingga diperoleh 3 fraksi. 5. Minyak esensial diperoleh dari fraksi 2 (1:2) lalu dievaporasi untuk memperoleh minyak esensial murni. Penetapan Kadar Lemak Hati Itik 1. Timbang 5 g sampel dan dibungkus dengan kertas saring yang bebas lemak, kemudian dipanaskan dalam oven pada suhu 105 o C selama 12 jam untuk menghilangkan air. 2. Sampel kering tersebut ditimbang dan dimasukkan ke dalam alat ekstraksi soxhlet kemudian diberi pelarut lemak dengan perbandingan 1:2

3 49 3. Ekstraksi dilakukan selama 8 jam sampai larutan pelarut lemak dalam ekstraksi soxhlet berwarna jernih. 4. Sampel yang telah terekstraksi lemaknya dikeringkan lagi dalam oven selama 12 jam pada suhu 105 o C. 5. Sampel kemudian dikeluarkan dari oven dan ditimbang 6. Penentuan kadar lemak, selisih antara bobot sampel sebelum dan setelah diekstraksi menunjukkan banyaknya lemak yang terkandung kemudian dinyatakan dalam persentase. Keterangan : Y Z X = bobot sampel kering sebelum diekstraksi = Bobot sampel setelah diekstraksi dan dikeringkan = Bobot sampel awal Penetapan Kadar Kolesterol Hati Itik 1. Cincang hati itik sampai halus 2. Ambil 1 gram hati itik masukkan dalam tabung reaksi, tambahkan etanol atau eter + alcohol dengan perbandingan 1:3 sejumlah 10 ml 3. Didihkan dalam air mendidih (water bath) sambil diaduk-aduk 4. Sampel dicentrifuge (3000 rpm), untuk memisahkan antara lemak dengan bahan kering lain 5. Ambil supernatan (lapisan atas) 6. Masukkan dalam beker glass kecil (50 ml), uapkan supernatan dengan cara dipanaskan dalam penangas air mendidih.

4 50 7. Encerkan dengan kloroform, sample siap dianalisis dengan spectrophotometer dengan panjang gelombang 515 nm Penetapan Kadar Protein Hati Itik Destruksi 1. Timbang sampel kering oven sebanyak ±1 gram (catat sebagai A gram) 2. Masukkan ke dalam labu Kjeldhal dengan hati-hati, dan tambahkan 6 gram katalis campuran 3. Tambah 20 mlasam sulfat pekat 4. Panaskan dalam nyala api kecil di lemari asam. Bila sudah tidak berbuih lagi destruksi diteruskan dengan nyala api yang besar 5. Destruksi sudah dianggap selesai bila larutan sudah berwarna hijau jernih, setelah itu dinginkan. Destilasi 1. Siapkan alat destilasi selengkapnya 2. Pindahkan larutan hasil destruksi ke dalam labu didih, kemudian bilas dengan aquades sebanyak kurang lebih 50 ml 3. Pasangkan erlenmeyer yang telah diisi asam borax 5% sebanyak 15 mluntuk menangkap gas amonia, dan telah diberi indikator campuran sebanyak 2 tetes 4. Basakan larutan bahan dari destruksi dengan menambah mlnaoh 40% melalui corong samping. Tutup kran corong segera setelah larutan tersebut masuk ke labu didih 5. Nyalakan pemanas bunsen dan alirkan air ke dalam kran pendingin tegak

5 51 6. Lakukan destilasi sampai semua N dalam larutan dianggap telah tertangkap oleh asam borax yang ditandai dengan menyusutnya larutan dalam labu didih sebanyak bagian (atau sekurang-kurangnya sudah tertampung dalam erlenmeyer sebanyak 15 ml) Titrasi 1. Erlenmeyer berisi sulingan tadi diambil 2. Kemudian titrasi dengan HCL yang sudah diketagui normalitasnya catat sebagai B, titik titrasi dicapai dengan ditandai dengan perubahan warna hjau ke abu-abu. Catat jumlah larutan HCL yang terpakai sebagai C ml. Keterangan = A = berat sampel B = normalitas HCL C = mililiter HCL yang dipaka

6 52 Lampiran 2. Output Analisis Varians Polinomial orthogonal Pengaruh Pemberian Minyak Buah Makasar terhadap Kadar Protein Hati Itik Cihateup Sum of Squares Df Mean Square Between Groups (Combined) 25, ,398 15,357,000 Linear Term Contrast 21, ,134 38,648,000 Deviation 4, ,030 3,712,043 Within Groups 10, Total 36, F Sig

7 Lampiran 3. Output Analisis Contrast orthogonal Kadar Protein Hati Itik Cihateup dengan Level Pemberian Minyak Buah Makasar yang Berbeda 53 Protein Hati Assume variances equal Does not assume equal variances Contrast Value of Contrast Std. Error T Df Sig. (2- tailed) 1-6,3100 1, ,034 20, ,8500, ,149 20, ,2333, ,889 20, ,3100, ,561 18,532, ,8500, ,004 9,412, ,2333, ,645 10,000,025

8 54 Lampiran 4. Output Analisis Varians Polinomial orthogonal Pengaruh Pemberian Minyak Buah Makasar terhadap Kadar Lemak Hati Itik Cihateup Sum of Squares df Mean Square Between Groups (Combined) 100, , ,23 9,000 Linear Term Contrast 95, , ,97 3,000 Deviation 4, ,462 9,371,001 Within Groups 5,243 20,262 Total 105, F Sig

9 55 Lampiran 5. Output Analisis Contrast orthogonal Kadar Lemak Hati Itik Cihateup dengan Level Pemberian Minyak Buah Makasar yang Berbeda Lemak Hati Assume variances equal Does not assume equal variances Contrast Value of Contrast Std. Error T df Sig. (2- tailed) 1-12,3433, ,046 20, ,7083, ,196 20, ,7583, ,565 20, ,3433, ,552 6,815, ,7083, ,172 7,668, ,7583, ,251 9,558,009

10 56 Lampiran 6. Output Analisis Varians Polinomial orthogonal Pengaruh Pemberian Minyak Buah Makasar terhadap Kadar Kolesterol Hati Itik Cihateup Sum of Squares df Mean Square Between Groups (Combined),152 3,051 1,305,300 Linear Term Contrast,008 1,008,217,647 Deviation,144 2,072 1,849,183 Within Groups,779 20,039 Total, F Sig

11 57 Lampiran 7. Output Analisis Contrast orthogonal Kadar Kolesterol Hati Itik Cihateup dengan Level Pemberian Minyak Buah Makasar yang Berbeda Contrast Value of Contrast Std. Error T Df Sig. (2- tailed) Kolesterol Hati Assume variances Does assume variances equal not equal 1 -,3540, ,268 20,219 2,0135,19735,068 20,946 3,1728, ,517 20, ,3540, ,512 12,000,156 2,0135,18860,072 12,913,944 3,1728, ,290 8,973,229

12 58 Lampiran 8. Foto Penelitian Proses pemotongan itik Cihateup Persiapan pengukuran kadar protein hati itik Cihateup Pengukuran kadar protein hati itik Cihateup

13 59 Sampel yang dididihkan di water bath Alat spektofotometer Proses pengukuran kadar koleterol hati itik Cihateup menggunakan spektofotometer