Aktifitas Kitinase dan Sifat Antijamur Actinomycetes, Serratia marcescens serta Getah Pohon Karet

Transkripsi

1 Aktifitas Kitinase dan Sifat Antijamur Actinomycetes, Serratia marcescens serta Getah Pohon Karet SKRIPSI Deby Trifena PROGRAM STUDI KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2007

2 Aktifitas Kitinase dan Sifat Antijamur Actinomycetes, Serratia marcescens serta Getah Pohon Karet Chitinase Activity and Antifungal Characteristic of Actinomycetes, Serratia marcescens and Rubber Latex SKRIPSI Deby Trifena PROGRAM STUDI KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2007

3 Abstract As time goes, the necessity of medicine will keep increase. One of the most needed medicine is antifungal. Synthesis at laboratory usualy takes very long period and some high cost. Thus, people start considering medicine from organisms. Actinomycetes, Serratia marcescens, and rubber latex are known as antifungal agents. This experiment tried to study antifungal activity of the three agents using paper disc method. Candida Albicans grown in Luria Bertani agar. On top of it was put some paper discs which been dipped into liquid media of Actinomycetes, Serratia marcescens, and rubber latex mixed with toluene. After incubated overnight at 37 0 C some clear zones were seen around the paper discs. This shown antifungal activities. As a potitive control ketoconazole and kalpanax were used. Meanwhile, toluene was used as negative control. Results are diameters of clear zone. 0.7 cm from Actinomycetes paper disc, 0.8 cm from Serratia marcescens paper disc, 0.9 cm from ketoconazole s paper disc, 0.8 cm from rubber latex s paper disc, 1.3 cm from kalpanax s paper disc, 0.6 cm from intracellular Actinomycetes paper disc, 0.9 cm from intracellular Serratia marcescens paper disc, and 1.1 cm from fractionated Actinomycetes media in 20%ammonium sulphate. This paper disc method shown that the hightest antifungal activity was given by fractionated Actinomycetes media in 20%ammonium sulphate. While the lowest activity was given by Actinomycetes paper disc. For further information other research is needed. That would be specific research about chitinase produced by each organism and it s molecular reaction. ii

4 Abstrak Kebutuhan akan obat-obatan semakin meningkat seiring berjalannya waktu. Salah satu obat yang banyak digunakan adalah antijamur. Sintesis obat di laboratorium umumnya memakan waktu panjang dan biaya produksi tinggi. Oleh karena itu mulai dilakukan penelitian terhadap organisme yang berpotensi menghasilkan obat antijamur. Actinomycetes, Serratia marcescens, dan getah pohon karet diketahui memiliki aktivitas antijamur. Penelitian ini mencoba mempelajari aktivitas antijamur ketiga organisme tersebut digunakan metode paper disc. Jamur Candida Albicans ditumbuhkan pada media padat dan di atasnya diletakkan paper disc yang telah dicelupkan pada kultur cair Actinomycetes, Serratia marcescens, dan larutan getah pohon karet dalam pelarut toluen. Setelah diinkubasi semalam pada 37 0 C ditemukan adanya zona bening di sekeliling paper disc yang menandakan aktivitas antijamur. Sebagai kontrol positif digunakan obat antijamur ketoconazole dan kalpanax, sedangkan toluen sebagai kontrol negatif. Hasil yang diperoleh menunjukkan zona bening sebesar 0,7 cm dari paper disc Actinomycetes, 0,8 cm dari Serratia marcescens, 0,9 cm dari ketoconazole, 0,8 cm dari getah pohon karet dan 1,3 cm dari kalpanax. Sedangkan untuk paper disc yang dicelupkan pada intrasel Actinomycetes dan Serratia marcescens diperoleh zona bening 0,6 cm dan 0,9 cm. Hasil fraksinasi ekstrasel Actinomycetes menggunakan ammonium sulfat 20% menunjukan zona bening 1,1 cm. Uji aktivitas antijamur getah karet memberikan hasil zona bening sebesar 0,8 cm. Metode paper disc menunjukan bahwa urutan aktivitas antijamur dari yang tertinggi sebagai berikut: Actinomycetes fraksi 20% ammonium sulfat, Serratia marcescens, Getah karet, dan Actinomycetes. Untuk mengetahui secara pasti agen antijamur mana yang memiliki aktivitas tertinggi, perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai kitinase yang dihasilkan masing-masing serta reaksi molekulernya. iii

5 Program Studi Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Teknologi Bandung Menerangkan bahwa Skripsi yang disusun oleh: Nama : Deby Trifena NIM : Telah disetujui sebagai persyaratan untuk mendapat gelar Sarjana Kimia Bandung, Pembimbing Dr. Enny Ratnaningsih NIP : v

6 Untuk Mbah Utik dan Mbah Kakung: You can be proud of me now... Hope deferred maketh the heart sick; But when the desire cometh, It is a tree of life

7 UCAPAN TERIMAKASIH Penulis mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada: Dosen pembimbing, Ibu Enny Ratnaningsih Kedua orang tua, keluarga, sahabat, dan teman-teman yang telah sangat mendukung Seluruh dosen dan staff prodi kimia ITB Bandung, Juni 2007 Penulis iii

8 Daftar Isi ABSTRACT ii ABSTRAK iii UCAPAN TERIMAKASIH iv DAFTAR ISI vii DAFTAR GAMBAR viii DAFTAR LAMPIRAN ix 1 PENDAHULUAN Latar Belakang Penelitian Tujuan Penelitian Metodologi Penelitian 3 2 TINJAUAN PUSTAKA Jamur Berbagai Penyakit Akibat Jamur Candida albicans Bakteri Serratia marcescens Actinomycetes Senyawa Antijamur Kitin Kitinase Tanaman Karet 18 3 METODE PENELITIAN Alat-alat Bahan-bahan Metode Penelitian Pembiakan Mikroorganisme Identifikasi Aktivitas Antijamur Actinomycetes dan Serratia marcescens Identifikasi Aktivitas Antijamur Cairan Intrasel dari Actinomycetes dan Serratia marcescens Isolasi Kitin dari Kulit Udang Jerbun Identifikasi Aktivitas Kitinase Actinomycetes dan Serratia marcescens Identifikasi Aktivitas Antijamur Getah Pohon Karet 22

9 3.3.7 Fraksinasi Kitinase yang Dihasilkan Actinomycetes dan Identifikasi Aktivitas Antijamurnya 22 4 HASIL DAN PEMBAHASAN Pembiakan Mikroorganisme Identifikasi Aktivitas Antijamur Actinomycetes dan Serratia marcescens Identifikasi Aktivitas Antijamur Cairan Intrasel dari Actinomycetes dan Serratia marcescens Isolasi Kitin dari Kulit Udang Jerbun Identifikasi Aktivitas Kitinase Actinomycetes dan Serratia marcescens Identifikasi Aktivitas Antijamur Getah Pohon Karet Fraksinasi Kitinase yang Dihasilkan Actinomycetes dan Identifikasi Aktivitas Antijamurnya 29 5 KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran 31 DAFTAR PUSTAKA 32 LAMPIRAN 33

10 Daftar Gambar Gambar 2.1 Serratia marcescens 9 Gambar 2.2 Actinomycetes 11 Gambar 2.3 Terbinafine 11 Gambar 2.4 Flucytosine 12 Gambar 2.5 Fluconazole 12 Gambar 2.6 Ketoconazole 12 Gambar 2.7 Ravuconazole 13 Gambar 2.8 Posaconazole 13 Gambar 2.9 Voriconazole 13 Gambar 2.10 Caspofungin 14 Gambar 2.11 Micafungin 14 Gambar 2.12 Anidulafungin 15 Gambar 2.13 Nystatin 15 Gambar 2.14 Amphotericin B 16 Gambar 2.15 Griseofulvin 16 Gambar 2.16 Kitin 17 Gambar 2.17 Tanaman Karet 18 Gambar 4.1 Hasil pembiakan Actinomycetes dalam media LB padat 24 Gambar 4.2 Hasil pembiakan koloni tunggal Actinomycetes dalam media NB cair 24 Gambar 4.3 Hasil pembiakan Serratia marcescens dalam media LB padat 25 Gambar 4.4 Hasil pembiakan koloni tunggal Serratia marcescens dalam media NB Cair 25 Gambar 4.5 Hasil pembiakan Candida albicans dalam media LB padat 26 Gambar 4.6 Hasil pembiakan koloni tunggal Candida albicans dalam madia LB cair 26 Gambar 4.7 Aktivitas antijamur Actinomycetes, Serratia marcescens, dan Ketoconazole 27 Gambar 4.8 Aktivitas antijamur cairan intrasel Actinomycetes, Serratia marcescens dan ketoconazole 27 Gambar 4.9 Aktivitas kitinase Actinomycetes dan Serratia marcescens 28 Gambar 4.10 Aktivitas antijamur getah tanaman karet dan kontrol negatif toluen p.a. 29 Gambar 4.11 Aktifitas antijamur fraksi 1 Actinomycetes dan kontrol positif kalpanax 29

11 Daftar Lampiran Lampiran A Pembuatan Media Padat Luria Bertani 33 Lampiran B Pembuatan Media Cair Nutrient Broth 34 Lampiran C Perbandingan Besar Zona Bening 35