Susunan Penelitian. Peneliti 1. Nama lengkap : Melvin Pascamotan Togatorop 2. Fakultas : Kedokteran 3. Perguruan Tinggi : Universitas Sumatera Utara

Transkripsi

1 Lampiran 1 Susunan Penelitian Peneliti 1. Nama lengkap : Melvin Pascamotan Togatorop 2. Fakultas : Kedokteran 3. Perguruan Tinggi : Pembimbing I 1. Nama lengkap : dr. Kamal Basri Siregar, Sp.B (K) Onk 2. NIP : Jabatan Fungsional : Staf Bedah Onkologi 4. Fakultas : Kedokteran 5. Perguruan Tinggi : 6. Bidang Keahlian : Bedah Onkologi Pembimbing II 1. Nama lengkap : dr. Suyatno, Sp.B (K) Onk 2. NIP : Jabatan Fungsional : Staf Bedah Onkologi 4. Fakultas : Kedokteran 5. Perguruan Tinggi : 6. Bidang Keahlian : Bedah Onkologi

2 Lampiran 2 Status Pasien Kanker Payudara Tahun : 2011 s/d 2013 (Data diambil dari Divisi Patologi Anatomi) No UMUR PEKERJAAN SUKU T N M STADIUM Ki-67 CUTT OFF Ki-67 = 14% 1 43 th Wiraswasta Batak Karo II A 5% Low 2 47 th IRT Batak Toba III A 35% Over 3 47 th PNS Mandailing 4b 1 0 III B 10% Low 4 54 th PNS Batak Toba 4b 2 1 IV 16% Over 5 58 th PNS Batak Toba 4b 1 0 III B 18% Over 6 51 th IRT Jawa 4b 2 0 III B 12% Low 7 50 th IRT Jawa III B 29% Over 8 52 th Peg. Swasta Jawa II A 8% Low 9 31 th IRT Batak Toba 4b 1 1 IV 25% Over th PNS Melayu II A 23% Over th PNS Batak Toba II A 4% Low th PNS Mandailing III A 30% Over th PNS Aceh II A 20% Over th PNS Batak Toba III A 25% Over th IRT Batak Toba 4c 1 0 III B 7% Low th IRT Aceh 4c 3 1 IV 8% Low th IRT Aceh 4b 1 0 III B 45% Over th IRT Jawa II B 25% Over th IRT Batak Karo 4b 1 0 III B 30% Over th IRT Batak Toba 4b 1 0 III B 25% Over th PNS Batak Toba IV 40% Over th IRT Jawa 4b 1 0 III B 6% Low th IRT Batak Karo III A 22% Over th IRT Jawa 4b 1 0 III B 20% Over th IRT Jawa II B 18% Over th IRT Aceh II A 18% Over th IRT Aceh 4b 1 0 III B 7% Low th IRT Batak Toba III A 40% Over th PNS Batak Toba 4b 2 0 III B 8% Low th PNS Batak Toba 4b 2 0 III B 18% Over th IRT Jawa III A 38% Over th PNS Aceh 4b 1 0 III B 20% Over th IRT Jawa 2 0 x II A 5% Low th PNS Batak Toba 3 2 x III A 23% Over th PNS Batak Toba III B 27% Over th PNS Karo III A 40% Over

3 37 60 th PNS Batak Toba III A 27% Over th IRT Batak Karo 4c 2 1 IV 18% Over th IRT Aceh II A 24% Over th PNS Aceh 4b 1 0 IIIB 12% Low

4 Lampiran 3 Anggaran Penelitian No Uraian Jumlah 1. Pengumpulan data & honorarium Rp ,- 2. Pembuatan Proposal dan Laporan Penelitian Rp , - 3. Penggandaan Proposal dan Laporan Rp ,- Penelitian 4. Pemeriksaan penunjang imunohistokimia Rp ,- Protein Rp x 40 T O T A L : Rp ,- Sumber dana diharapkan dari donatur yang bersifat tidak mengikat.

5 Lampiran 4 Jadwal Penelitian APRIL 2014 MEI 2014 JUNI 2014 JULI 2014 PERSIAPAN PELAKSANAAN PENYUSUNAN LAPORAN PENGGANDAAN LAPORAN

6 Lampiran 5 Prosedur Tehnik Pulasan Imunohistokimia Ki-67 Melakukan pulasan imunohistokimia Ki-67 dengan prosedur : 1. Potong block parafine menggunakan mikrotom Leica 2125 RM dengan ketebalan 3 μm, kemudian direkatkan pada gelas obyek yang telah dilapisi dengan poly-l-lysine, merk Sigma, dengan ukuran lebar 1 inchi, panjang 3 inchi dan tebal 1,2 mm. 2. Inkubasi dalam inkubator dengan suhu 37 o C selama 1 malam. 3. Deparafineisasi dengan xilol, preparat dicelupkan ke dalam xilol sebanyak 3 kali, masing-masing celupan selama 3 menit. 4. Rehidrasi dengan alkohol bertingkat terdiri dari alkohol absolute 2 kali, alkohol 95%, alkohol 80%, dan alkohol 70%, masing-masing selama 3 menit. 5. Cuci dengan aquadest selama 10 menit. 6. Teteskan H2O2 dalam methanol 3% sampai menutupi seluruh permukaan jaringan selama 15 menit. 7. Cuci dengan aquadest selama 10 menit. 8. Cuci dengan PBS (phosphate buffer saline) sebanyak 2 kali, masing-masing selama 10 menit. 9. Rendam dengan buffer sitrat 0,01 M, ph 6,0. Kemudian panaskan di dalam oven microwave selama 15 menit, mula-mula dengan pemanasan tinggi (80 o C) sampai tepat mendidih kemudian dengan pemanasan sedang (50 o C) selama 5 menit. 10. Dinginkan pada suhu kamar. 11. Cuci dengan PBS sebanyak 2 kali, masing-masing selama 10 menit. 12. Teteskan 100 μl (blocking) dengan ultra V block atau sniper block selama 10 menit. 13. Teteskan 100 μl antibody primer menggunakan antibody monoclonal Ki-67 dari Dako yang telah diencerkan (pengenceran 1:100) selama 30 menit pada suhu kamar atau semalam pada suhu 40 o C. 14. Cuci dengan PBS sebanyak 2 kali, masing-masing selama 10 menit. 15. Teteskan Biotinylated Anti Polyvalent selama 10 menit. 16. Cuci dengan PBS sebanyak 2 kali, masing-masing 10 menit. 17. Teteskan Streptavidin Peroxidase selama 10 menit. 18. Cuci dengan PBS sebanyak 2 kali, masing-masing selama 10 menit. 19. Teteskan dengan reagen DAB selama 10 menit.

7 20. Cuci dengan air mengalir. 21. Counterstain dengan Mayer Hematoksilin selama 2 menit. 22. Cuci dengan air mengalir. 23. Dehidrasi dengan alkohol bertingkat terdiri dari alkohol 70%, alkohol 80%, alkohol 95%, dan alkohol absolut 2 kali, masing-masing selama 3 menit. 24. Celupkan ke dalam xilol sebanyak 3 kali, masing-masing selama 3 menit. 25. Tutup dengan cover glass. Interpretasi dan penghitungan persentase pulasan Ki-67 dilakukan oleh peneliti dan seorang ahli Patologi Anatomi di laboratorium Patologi Anatomi Rumah Sakit H. Adam Malik, Medan, dengan menggunakan mikroskop olympus CX 21. Penghitungan dilakukan dengan pembesaran lensa okuler 10x dan lensa obyektif 10x. Kemudian dihitung 100 sel pada area yang terpulas paling padat. Setelah itu dihitung persentase sel yang terpulas berwarna coklat dari 100 sel yang dievaluasi.