PENGARUH SEA PADA KULTUR LIMFOSIT KERA EKOR PANJANG (Macaca fascicularis) YANG DIIRADIASI SINAR GAMMA SECARA IN VITRO. Abdul Wa'id dad Yanti Lusiyanti

Transkripsi

1 Prosiding Presentasi llmiah Keselamatan Radiasi dan Lingkungan Vul, 3-4 Agustus Puslitbang Keselamadiasi dan Biomedika Nuklir- BATAN PENGARUH SEA PADA KULTUR LIMFOSIT KERA EKOR PANJANG (Macaca fascicularis) YANG DIIRADIASI SINAR GAMMA SECARA IN VITRO Abdul Wa'id dad Yanti Lusiyanti Puslitbang KeselaII1aWl Radiasi dan Biomedika Nuklir -BATAN b3 ABSTRAK b'z PENGARUH SEA PADA KULTUR LIMFOSIT KERA EKOR PANJANG (Macaca fascicularis) YANG DIIRADIASI SINAR GAMMA SECARA IN VITRO. Staphylococal enteroksin A (SEA) adalah salah satu dati toksin yang dihasilkan oleh bakteri Staphylococcus aure;us. Pada biakan SEA telah terbukti potensial sebagai stiinulator limfosit manusia bahkan dengan konsentrasi fg/ml. Penelitian ini akan mempelajari penggunaan SEA dibandingkan dengan Phytohaemaglot.inin (PHA) pada biakan sellirnfosit perifer kera ekor panjang. Sekitar 5 In! darah perifer diambil dari 5 ekor kera dan diiradiasi padapesawat Gamtna Cell- P311R dengan variasi dosis (Kontro1); 1,;,; 3, dan 4, Gy. Sampel dat.ah dikultur dalam media pertumbuhan yang sesuai dengan prosedur baku dan ditambah dengan,1 ml (,5 g/ml) SEA atau,15 ml PHA. Kultur kemudian diinkubasi selama 96 jam dan dilakukan pembuatan preparat. Hasil pengatnautn menunjukkan bahwa pada sellitnfosit kera yang tidak diiradiasi indek mitosis yang diperoleh dengan menggunakan SEA dan PHA relatif Satna. Pada sellimfosit yang diiradiasi dosis 1-3 Gy, indeks lnitosis menggunakan SEA relatif lebih tinggi dati indeks mitosis menggunakan PHA.Respon dosis disentrik, ring dan fragmen asentrik pada PHA dan SEA adalah relatif sarna. ABSTRACT THE EFFECT OF SEA ON LONG TAIL MONKEYS (Macaca fascicujaris) LYMPHOCYTE CULTURE GAMMA RAY -IRRADJ A TED IN VITRO. Staphyloco<:us enteroxine A (SEA) is one of toxins produced by the bacterium Staphylococu.v oureu.v. In the culture, SEA has proven as a potent stimulator of lymphocytes in man even at fg/ml concentrations. This research studied the effect of SEA compared to Phytohaemagglutinine (PHA) on the peripheral blood lymphocytes culture of the long-tail monkeys. About 5 rnl blood was collected from 5 monkeys and irradiated using Gaxmna Cell- P31"IR with doses of (control); 1.;.; 3. and 4. Gy. The blood samples were cultured in the appropriate growth medium based on standard procedure and added with.1 ml (.5 g/rnl ) SEA or.15 ml PHA. The cultures were then inl,ubated for 96 hours and prepared the slides. The results showed that on the unirradiated peripheral blood lytnphocytes of long-tail monkeys the mitotic indices obtained using PHA and SEA are relatively siinilar. On the adiated lytnphocytes with doses of 1-3 Gy, the mitotic indices using SEA are relatively higher than that of PHA. Dose respons of dicentric, ring and acentric fragment of both PHA and SEA are relatively the same. PENDAHULUAN fascicularis Di all tara hewail primala, kera Macaca adalah hewan YaIlg seling digwlakail dalaill penelitiail di laboratoriwll- Selain karena kemiripan sistem reproduksinya, penelilian dengan hewan ini juga didasarkan atas beberapa parameter biologis YaIlg renting terutama masa hidupnya cllkup pailjailg (5-3 talllw), sehingga resus Macaca ini juga populer dijaclikiul sebagai model penelitiail biologi terhadap mailusia [1]. Selain pada kera, hewan percobaail YaIlg se11ng digwlakail dalam penelitiail biologi adalah tikus d(1ll kelinci. I PertimbaIlgaIl penggunaail kedua jeni f, hewan ini juga didasal-kail alas kemiriijiul sifat biologisnya, sehingga memudahkail untuk proses extl'apolasi terhadap manusia. Oleh karena itu, dengan perkembailgan teknologi sitogenetik dewasa ini sangat dimungkinkan untuk mengarnati efek radiasi tertunda pada kromosom resus kera ini. Umur kera yang relatif panjang ini juga memberikan keuntungan untuk penelitian sitologik, terutarna wltuk mengetahui teljadinya trailslokasi pada kromosom kera yang timbul setelah perioda tertentu pasca paparail radiasi [, 3, 4]. Dalarn kasus asimtomatik akibat kecelakaan p,aparan radiasi ekstema hat.mg sangat venting a{lal!.m menentukan dosis radiasi yang diterima oleh pasien YaIlg terpajail radiasi dalarn usaha untuk memperkirakall kemwlgkinallteljadinya 64

2 Presentasi Ilmimatan Radiasi dad Lingkungan VIII, 3-4 Agustus etek tertlulda pasca pajailan [5]. Ulltuk keperluan ini, evaluasi aberasi kromosom dalam darah perifer mail usia YaIlg terpajan radsiasi Oikellal sebagai illclikator biologi l'wllulatif yallgcul'up baik Wltuk pajailail radiasi YaIlg berlebill. Masalalulya adalah ballwa setelall telpajan radiasi, kemampuaillimfosit dalam melakukail mitosis secara in vivo akail berkurang, sehingga aberasi. )'ang terbeutuk akan bertahail untuk waktu YaIlg relatif lama. Oleh sebab itu maka secai.a in vitro kemaiupuail limfosit dalam melakukail mitosis ilu dalaiu media biakail dipicu dllgail membel-ikail stimulail Wlluk mellghasilkan sl pada stadiwu metafase dal,llu jumlall YaIlg bllilyak, sehingga memud.ulk,ul pelaksanaan pllgllinatail aberasi kl.omosom YaIlg teljadi di dalaiu sel lilnt.osit dai-ah periier terse but. Untuk keperluail ini maka maka kill.va respon dosis-aberasi kl.omosom sebagai salah satu pellgujiail hubwlgail alltai.a dosis radiasi dengml b,ulyakjlya aberasi kl"omosom telah bailyak diteliti [6,7,8]. KeberhasilaIl suatu biakan dapat dilihat dllgllil mengetallui banyaknya sel metafase YaIlg teraiuati di dalaiu preparat. Timbulnya sel metafase ini SaIlgat bergailtilllg dai-i stimulall yang digilllakail. Phytohaemagglutinin (PHA) tlah lama diketahui sebagai stunulml YaIlg baik dalam proses pembelallail sel illltuk menghasilkan sel metat"ase pada lilnfosit mmlusia.namwl demikiail ketika kollselltrasi YaIlg sarna dari PHA illi digunakan pada biakaillilnfosit kera teruyata tidak lnenghasilkan sel metat'ase ymlg bailyak seperti pada limfosit mllilusia. Mellill-ut DEVRIS et ai, dalam [I], penelitillil aberasi kl-omosom YaIlg membutuhkail jumlah sel metafase )'llilg bmlyak akan lebih sulit dai1 memakllil waktu skorillg ymlg lebih lmua, Oleh karena ill WILSON et al [9] dail USAF [1] telah mencoba ellggunakml Concovalin A (Con A) Ulltuk mellstimulasi limfosit Macaca mulata dail Macaca spi.iosa_dail menghasilkan indek mitosis (jmnlall sel metafase dibagi 1 sel blast) yang lebih bailyak dibllilding dengan PHA, yaitu.1 -,6 % Wltuk PHA dail 1,7-6,6 % illltuk Con A. Namun demikillil sel metafase YaIlg dihasilkan uli temyata juga belum bisa dikatakllil berhasil dengail baik karena kenaikan jumlall sel metafase ini pull masih beluln cul--up unluk memudallkail pengamatail ribuail kl-omosom \ YaIlf"dibutullkaIl dalaiu penelitiail c!osuueter biologi, I! Stafilokokus enteroksul A (SEA) adalah Staphylococcus aureus"- Konsentiasi SEA yang tinggi dapat bersifat racun dalam makanan [11]. Pada media biakan temyata SEA telah terbukti potensial sebagai stimulator limfosit manusia hanya dengall konsentrasi fg/rnl, bahkall kemampuannya dalam menghasilkan set metafase limfosit kern yang diiradiasi juga telah dicoba oleh HILL [1]. karena itu Oleh dalam penelitian ini elain dipelajari resljoi1 dosis aberasi kromosom, penggunaan stimulall SEA dan PHA dalaill memghasilkan sel metafase li.nfosit darah perifer kera ekor panjang Yllilg diiradiasi sinal" ganuna akan dibalidingkan. TATA KERJA.Rewan percobaan Kera ekor pailjailg (Macaca Fascicularis) YaIlg digullakail dalam penelitian ini dipero.leh dari lembaga Penelitiml Primata -IPB Bogor. Hewan ini telall dikarailtina di laboratoriurn tersebut dan sebelulll digwlakail dipelihai-a terlebih dahulu uutuk menyesuaikail kondisi lingkwlgail setempat. Untuk menjaga kesehatail setiap hall diberi makan 15 - gram pakan khusus berupa relet kering yang juga dil>eroleh dm-i lembaga YaIlg sarna. lradiasi Limfosit dad Pembiakkan Limfosit darah perifer diambil dengan menggwlakajl syling disposible sebanyak 5 ml setiap ekomya. Sebanyak,5 ml darah dimasukkan kedalam flask yang telah berisi : 1 ml RPMI 164 (Sigma), 1 ml Fetal Bouvin Serum (FRS),,1 ml L- Giutamul clan,1 rnl penstrep. Iradiasi dilakukan pada pesawat Gamma Cell- -P3TIR BATAN dengatl laju dosis 13,78647 krad/jam, masingmsing dengan dosis, 1,, 3 clan 4 Gy. Kedalam setiap flask yang berisi sampel darah ini kemudian di tambahkatl, 15 ml PHA (all Gibco BRL) atau,1 ml Staphylococus enteroksul A (SEA) sebagai stimulator dati diinkubasi selama 96 jam. Empat Jam sebelwn proses pemanenati, setiap biakkan dalam flask ditatnbahkan,1 In! colchisin untnk menghentikatl proses pembelahatl. sal.ul satu dai-i toksin yang dihasilkail oleh bakteri 3!\I{BiN-BATAN

3 Presentasi Ilmiah Keselamatan Radiasi dad Lingkungan VIII, 3-3. Pemanenan dad pembuatan preparat 4. Penghitungan Indek Mitosis dad Analisis Satnpel dalatn biakkatl masing-masing dipindahkatl kedalatn tabung senu-ifns datl kemudian diputat- selama 1 menit dengatl kecepatan 1 l1)m. SupematatI dibuatig clan relet set ditambahkan KCl,56 %, dikocok dengatl menggunakan pipet pasteur YatIg bersih. Sampel dibiarkati di dalam wolenjoth dengatl ternperatllr 37 C, kemudiail ditamballkatl 8-1 tetes larutan kaniy (3 bagiail metanol : 1 bagiatl asam asetat glasial) dati diputar Aberasi kromosom Setiap preparat pacta masing-masing dosis diamati di bawah mikroskop. lndek mitosis dihitung dengail CaI.a membagi jwnlall gel metafase per 1 gel bias yang diamati dibawah mikroskup dengan perbesara 4 kali. Untuk memperkecil kesalahan dalam pengarnatan dilakukan 6 kali pengulangan pengainatail. Pengamatan ki.omosom dilakukan di bawah perbesaran 1 x yang meliputi fcpiial «(;y) 1 (Gy ) (Gy) 3 (GY) 4 (Gy) Dosis (Gy) Gambar 1. lndck mitosis basil biakan sellimfosit dengan PHA dan SEA dengail kecepatail 1 rpm selama 1 menit. SupernataIl dibuailg dail relet ditambahakil 8 ml lanltail kai11y dail diputar kembali selaina 1 menit dengail kecepatail 1 rpm. Dengan CaI.a YaIlg sarna proses ini diulailg kembali sainpai didapatkan relet sel YaIlg jenlih dail siap untuk dibuat preparat. Preparat dibuat dengail CaI"a meneteskail sel relet di atas gelas slide yang bersih dengaii jarak daii dibiarkaii kering dalam suhu rnangan. Preparat kemudiaii diwarllai dengan giemsa 5% dibilas dengaii akuades daii dibiarkan kering pada suhu l1iangan. PrepaI"at YaIlg teiall kering ini kemudiaii ditutup dengaii penutup gelas daij dibiarkan kering dalarn suhu l1iangaij W1UIlc pengamatan di bawah rnikroskop. penghitungan kj.omosom noll1lal, aberasi disentrik, aberasi bentuk cincin (ring) clan asentrik fragmen. Penghitungall sel stadium metafase untuk setiap dosis masulg-masing sel HA..IL DAN PEMBAHASAN lildek mitosis adalah basil perbandi..gan antara sel mitosis dengan sel blast, maka indek mitosis ini dijadikan sebagai indikator keberhasilan suatu kultur. Artinya semakin besar indek mitosis maka semakin tulggi tulgkat keberhasilan kultllr tersebut. DengaIl demikiail bahwa besarnya indek lnitosis dati basil suatu kultur berbanding lurns dengail besanlya sel metafase YaIlg teramati. Data indek mitosis dari kedua stimulan YaIlg digllllakatl dalam penelitian ini disajikatl pada 66 P3KI{BiN-BATAN

4 Tabell. Presentasi Ilmiah Keselamatan Radiasi dad Lingkungan VIII, 3-4 Agustus GaInbar 1. Untuk perlakuail darah yang tidak diiradiasi ( Gy) stirnu1an PHA menunjukkan indek mitosis 16,1 % sedangkan stimulan SEA 14,8 %. Perbedaan ini tidak terlalu berarti sehingga dapat dikatakail bahwa dalam keadarolnolmal kemampuail PHA clan SEA dalam menstimulasi sel limfosit untuk menghasilkan sel metaf'ase pada Maeaca fascicularis _menghasilkail indek mitosis yang relatif' SaIna. Data aberasi kromosom limfosit perifeir kera ekor panjang yangdiiradiasi dad dibiakkan dengan PHA dad SEA sinar gamma Jenis Perlakuan Dosis Jumlah sel mctafase PHA SEA <.) 431 Jumlah kromosom disentrik/sel.q;];!:q.58,879 Jumlah kromosom ring/set M!:!. l!!..q.ql!!!!; J umlah asentrik fragmen/sel Untuk sel lilnfosit yang iliiradiasi 1-3 Gy YaJlg distimulasi dengajl PHA menmljukkajl indek mitosis yang lebill rendah dibajlding dengajl sel linuosit YaJlg distimulasi dengan SEA yaitu masingmasing 9,3 % dengajl 13,4 % untuk dosis 1 Gy, 6,5 % dengajl 1,5 % untuk dosis Gy dan 4,1 % dengajl 6, % untuk dosis 3 Gy. SedaJlgkaJl indeks mitosis pada dosis 4 Gy terliliat tidak menulljukkajl perbedaail yang yaitu masing 1,6 % dengajl 1,4 %. Hal tersebut menmljukkaj1 bahwa penggunaan SEA sebagai stimulan untuk menghasilkan sel metafase pada kultm- darah yang diiradiasi relatif lebih baik dibandulg dengajl penggunaajl r->ha. Sesuai dengajl tingkat kelllsakajl set linu'osit YaJlg ditrima, maka kemajnpuajl SEA maupun PHA dalam menghasilkan set metafase ternyata semalin menurun sesuai dengall besall1ya dosis YaJlg ditel-ima. Pada Gambar 1 diperlihatkajl ballwa semakin besal- dosis Yallg ditel-ima, semakin menullul llldek mitosinya, yang berarti pula semakin menullul daya stimulasinya. Hal ini dapat dilihat disamping hai"gailya sangat mahal dibandingkan dengail PHA juga dari segi pengadaan barang sangat rumit karena haills melewati pemeriksaml Departemaen pertahanan dan Keamanan. Sebagai data tambahan, dalam penclitianini diamati juga" aberasi kromosom yang meliputi aberasi jenis disentrik, ring dan fragmen a..c;eritrik. KetergaIltungaIl tingkat kerusakail kromosom dengail besanlya dosis radiasi yang ditandai dengan banyakllya aberasi kromosom disentrik. Dapat dilihat pada Tabel I bahwa jumlah aberasi kromosom per gel limfosit perifer stadium metafase kera ekor panjailg untuk kedua stimulan menulljukkail semakiil besai" dosis yang diterima semakiil baiiyak aberasi disenuik rlllg maupu11 fragmen asentrik. SedaIlgkaIl perbedaan jumlah Ulltuk ketiga jellls aberasi tersebut tidak menunjukkan perbedaan yang berarti sehingga dapat diindikasikail bahwa SEA sebagai stimulan tidak berpengaruh terhadap kenaikkail jumlah aberasi ki"omosom. P3KI{BiN-BATAN 67

5 Presentasi llmiah Keselarnatan Radiasi dad Lingkungan VIII, 3-4 Agustus --- 1, 1,8 yl =.8x -.4x R =.9896 E...c -<,6,4, I -, A y3 =.63x x +.18 R y =.OO6x -o. =8.<169 ro'fx R = Dosis (Gy) Gambar. Kurva respon dosis aberasi kromosom disentrk ("'), ring (8) dan fragmen asentrik(o)limfosit kera ekor panjang (Macaca fascicujari!;') yang diiradiasi gamma dengan dosis 1-4 Gy dad dibiakan dengan PHA Gambar 3. Kurva respon dosis aberasi kromosom disentrik ('" ), sentrik ring (.) dan fragmen asentrik () limfosit kera panjang (Mac.aca fasciculari!;') yang diiradiasi gamma dengan doss_) -4 Gy dan dibiakan dengan SEA. Hublmgan respon fl-ekuensi aberasi kromosom (disentrik, ring dall asenu.ik fragmen) terhadap dosis diatlalisa dengatl regresi liiuer model persanlaatl lillier kuadratik Y = C + D +. Untuk kurva aberasi disentlik dan ring dan asentrik tragmen menunjukkatl vola linier quadratik baik Wltuk stimulan PHA mapwi SEA yang ditwljukkan pada Gatnbat. dati P3KRBiN-BA T AN

6 Presentasi Ilmiah Keselamatan Radiasi dad Lingkungan VIII, 3-4 Agustus SedangkaIl nilai koetisien korelasi (R1 disenu-ik, rulg dan masing-masing adalah,9896,9454, dad,9454 Ulltuk PHA dail,988,,9969 dano,8415 Ulltuk SEA. Hal llii menulljukkail bahwa antara dosis dengail disentrik maupull ring pada kedua stimulan mempullyai korelasi YaIlg SaIlgat nyata. KESIMPULAN Dari hasil penelitian ini dapat disimpulk3l1 ballwa untuk biakan sel limfosit darah periter kera ekor panj3l1g (Macaca fasciculclrisl yang tidak diiradiasi baik SEA maupwl PHA sebagai stimult3l1 menghasilk3l1 sel metafase deng3l1 uldek mitosis Y3l1g relatif S3lna- Sedangkall ulltuk sel lilnfosit Y3l1g diiradiasi stiinul3l1 SEA temyata mellunjukk3l1 indek mitosis yang lebih tinggi dibanding dengan PHA khususnya pada dosis 1-3 Gy. KemarnpU3l1 kedua stunul3l1 dalarn menghasilkan sel metafase semakin berkw-ang seiring dellg3l1 bes3l11ya dosis Y3l1g diterima. Sed3l1gk3l1 ullulk respon aberasi kromosom baik jenis disenu-ik ling maupwl asenu-ik fragmen d3l-i l-ultur Y3l1g distiumlasi deng3l1 PHA maupwl SEA ul1uk masu1g-masing dosis menulljukk3l1 jumlah Y3l1g relatif sarna. UCAPAN TERIMA KASm Diucapkatl terima kasih kepada sdr. Prayiulo (tekiiisi pesawat Gatnma CeU- Co-6) Pusilitbatlg TekIIologi Isotop Dan ladiasi- BAT AN, sdi". Masnelly Lubis dati Emil Lazuat'di stat Bidang Biomedika Nuklir Puslitbatlg KJ{BiN yatlg telah membatitu pelaksatiatl penelitian ini. DAFTARPUSTAKA. HILL, F.S.,COX, A.B., SALMON, Y.L., CONTU, A.O dan LU<;::AS, J.N. Metaphase Yield from Staphylococcal Enteroxin A Stimulated Pelipheral Blood Lymphocytes of Unirradiated alld Irradiated Aged Rhesus Moltkeys. Int. J. Radial. Bioi., No.4 (1994) LUCAS, J.N.; AWA, A., STRAUME, T., POGGENSEE, M., KODAMA, Y., NAKANO, M., OHTAKI, K., PINKEL,D., GRAY. J alld LITTLEFIELD, G.; l{apid trallslocatioll ti.equency analysis in human decades after exposure to ionizing radiation. Int. J. Radiat. BioI, No. 6, (199a) LUCAS, J.N., COX, A.B aild McLEAN, J., Hwnan chromosome painting probes used to measure cliromosome translocation in uonhumail primates: extrapolation from monkey to mail. Radiation Protection Dosimetry No. 46 ( 1993) MANGKOEWIDJA Y A, S. Pemeliharaan, pembiakaildan penggwlaail hewan percobaan di daerah tropis. Penerbit Ul (UI -Press) (1988) GUEDENERY, G.,GRUNDWLD, D., MALARBET, J.L., AND DOLOY, T. Time dependence of Chromosomal Abeuations lllduced ill HwnaIl aild MolIkey Lymphocytes by Acute aild Fractionated Exposure to Co-6. Radiation Research NO. 116 (1988) BAUCffiNGER,., SCHMID, E., And DRESP, J. Calculation of the dose rate dose dependence of Dicentric Yield after Co l' Iuadiation of Human Lymphocytes. Int. J. Radiat.Biol. 35 (1979) LLOYD, D.C., PURROTT, R.J., DOLPHIN. G. W., BOLTON, D., aild EDWARDS, A.A., TIle Relationship between Chromosome Abeuation LOW LET Radiation Dose to Human Lymphocytes. Int. J. Radiat.BioI.8 (1975) A, Waid.,Kurva Respon Dosis Aberasi Kt.omosom Lirnfosit MatlUSia Yang Diinduksi Sinar X 5 kvp, Presentasi Ilrniah PIKRL Jakarta, September1998 ISSN WILSON,B.J.,PORTER,G.,KOCV ARA,H.And LEO,.G.,1978,Rhesus Monkey micro mixed lymphocyte aild mitogen reactivity:optimal Conditions aild Normal Vatiavility. Primates, 19, USAF, United States Ail. Force School of aerospace Medicine, Human systems Division, KAPPLER,.J.,KO1IN,B.,HERRON,L.,GELF AND,E., W.,BIGLERR.D.,BOYLSTO N,A.,CARREL,S.,POSNETT.D.N.,CHOI, Y.and MARRACK,P., Vf)-Spesific Stimnlation of Human T cells by Staphylococca', toxins. Science,4, I I P3KRBiN-BA TAN 69

7 Presentasi llmiah Keselarnatan Radiasi dad Lingkungan VIII, 3-4 Agustus --- DISKUSI B. Jeanne T Seperti telah Bapak katakail, pellelitiail illi merupakail dasai. dai.i pellelitiall selanjuulya. Apakah sebellamya tujuail pellelitian selall.iutnya U)ellelitiall utaina ) Bapak.? Pada bagiall apa dai.i sel blast pengai"uh SEA bekelja selungga menyebabkail SEA dapat bertindak sebagai stimulator Uluuk menghasilkail sel metafase '? Abdul Wa'id, P3KRBiN-BATAN Tujuan dat"i penelitian ini adalah untuk meningkatkatl j umlall sel metata.-;e pada kultur darah kat"ena dalatll studi biodosimeu"i sebagai kelatljutatl dati penelitiatl ilu adalah membuttlhkatl jumlall sel metafase Yatlg batlyak, sepelti diketallui bahwa radiasi pengion dapat menui"ullkatl sel metosis selungga sel metafase yatlg (lihasilkatl akatl berkuratlg. Maria Lina 1. Alasall digullakall SEA? Mengapa tidak digunakall species bakteri laul?. Pada Case pel1umbu1lall apa (logaritlunic fohase/ stationery fohase dll ) Abdul Wa'id, P3KRBiN-BA TAN 1. Dalam studi literatm' telail diketahui bahwa SEA yang paling besar pengaruh1lya dalam menghasilkansel metafase.. Tidak dilakukail studi rase peltumbuhail konsentrasi SEA YaIlg digunakan adalah O.5g/ml. Nur Rohmah, P3KRBiN-BA TAN Apa sebabnya Imengapa kematnpuatl stnnulator (SEA dati PHA) menurun dengan kenaikan dosis? Apa faktor-faktor yatlg mempengat-uhinya? Semakin tulggi radiasi yang diterima akan mempengaruhi tingkat kerusakan sel (kromosom) sehingga9aya reco"ery atau penyembuhan diri sel akibat.adiasi semaklll menullld waiaupun set tersebut distimulasi wltuk melak'"ukan pembelahan. M. Soleh Kosim, PEN-BATAN Oari absu-ak daii kesimpulan yang disampaik1ui tidak tarnpak tujuaii dari penelitian iui, moho penjelasail apa SaSaraII akhir dari penelitian dimaksud '? Abdlu Wa'id, P3KRBiN-BATAN TUjUCUl peneliticul ini untuk membculdingkcul kemcunpucul SEA dan PHA terhadap melillasilkcul set metafase di dalam l'llltur darah perifer. Karena untuk keperluan evaluasi aberasi kromosom sebagai dosimeter biologi dibutuhkcul jumlah set metafase yangbanyak. M. Yazid, P3TM-BATAN a. Mengapa yang dironbil sebagai cuplikan darah perifer. Bukrolkall sel darallllya sedah pada stadiwn dewasa sehulgga tidak bersifat meristematis lagi. b. Apakall tidak lebih baik diambil di sel induk darah pada sumsum tulrolg? Abdul Wa'id, P3KRBiN-BATAN a. Dalmn gel darah perifer (whole blood) masih terdapat gel-gel yang masih mampu melal.'ukan pembelahan (limfosit) sehlllgga dengan bantuan mediuln' liinfosit tersebut masih mampu membelah. b. Bisa juga dilal.'ukml dengml kultur dengan sumsum, tapi secara teknis lebih susah. DisampiIlg peneltiml ini tujuan akhimya untuk mengevaluasi efek radiasi tertunda pada paska paparml. Anonim Abdul Wa'id, 7 P3KRBiN-BATAN I lara YaIlg menyebabkail indej)_s mitosis dari stimulru; SEA (dosis 1-3 Gy) lebih tinggi dail indeks mitosis drul stimulail PHA '? P3K'{BiN-BAT.-\l'i

8 PreseDtasi llmiah KeselamataD Radiasi dad LingkuDgaD VIII, 3-4 Agustus Abdul Wa'id, P3KRBiN-BATAN stimulail PHA. NamWl demikian masih perlu Dalam peneltiall memlg ditemukall bahwa llldeks mitosis dati l--ultur yang distimulasi SEA (dosis 1-3 Gy) lebih tinggi dai-i indeks lnitosis dati pembuktian lebih lailjut melalui studi individu. karena pada Gy temyata stimulan PHA memberikail indeks mitosis lebih tinggi dari pada SEA. P3KRBiN-BA TAN 71