KARAKTERISASI SIMPLISIA, SKRINING FITOKIMIA, ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI HERBA TUMBUHAN PATIKAN KEBO (Euphorbia hirta L.

Transkripsi

1 KARAKTERISASI SIMPLISIA, SKRINING FITOKIMIA, ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI HERBA TUMBUHAN PATIKAN KEBO (Euphorbia hirta L.) SKRIPSI Oleh: YULIA NANDA PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2010

2 KARAKTERISASI SIMPLISIA, SKRINING FITOKIMIA, ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI HERBA TUMBUHAN PATIKAN KEBO (Euphorbia hirta L.) SKRIPSI Diajukan untuk Melengkapi Salah Satu Syarat untuk Mencapai Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Oleh: YULIA NANDA PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2010

3 Pengesahan Skripsi KARAKTERISASI SIMPLISIA, SKRINING FITOKIMIA, ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI HERBA TUMBUHAN PATIKAN KEBO (Euphorbiae hirtae Herba) Oleh: YULIA NANDA NIM Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Fakultas Farmasi Pada Tanggal: April 2010 Pembimbing I, Panitia Penguji, Dra. Misra Gaffar, MS., Apt. NIP Dra. Herawati Ginting, M.Si., Apt. NIP Pembimbing II, Dra. Misra Gafar, MS., Apt. NIP Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. NIP Drs. Syafruddin, MS., Apt. NIP Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. NIP Dekan Fakultas Farmasi Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP

4 KATA PENGANTAR Puji dan syukur kehadirat Allah SWT atas segala nikmat yang tak terhingga sehingga penulis bisa menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultsa Farmasi. Shalawat dan salam kepada Rasulullah SAW. Terima kasih yang sebenar-benarnya penulis sampaikan kepada ayahanda Almarhum H. Zakaria Ali dan Ibunda Zubaidah Ismail atas dukungan yang begitu luar biasa yang telah diberikan kepada ananda, serta kepada kakak dan abang, Azhari Fahrizal, ST dan Ainul Riza Nova, SP. Penulis juga mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Ibu Dra. Misra Gaffar M.S., Apt., dan Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis MSi, Apt., selaku dosen pembimbing yang telah membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan keikhlasan selama penelitian hingga selesainya penulisan skripsi ini. 2. Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah mensahkan dan memberikan pengarahan dalam penyusunan skripsi ini. 3. Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc, Apt., selaku dosen wali yang selama ini telah banyak membina dan membimbing penulis selama masa pendidikan. 4. Ibu Herawaty Ginting, M.Si., Apt., Bapak Drs. Syafruddin, MS., Apt., dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dan saran kepada penulis hingga selesainya penulisan skripsi ini 5. Bapak Drs. Panal Sitorus, Apt., selaku kepala Lab.Farmakognosi dan Ibu Dra. Marline Nainggolan, M.Si., Apt selaku kepala Lab. Fitokimia. 6. Bapak/Ibu dosen Fakultas Farmasi USU yang telah memberikan didikan dan bimbingan selama penulis menuntut ilmu di Fakultas Farmasi USU 7. kepada teman-teman farmasi ekstensi 07 yang langsung maupun tidak langsung membantu dalam penyeleseaian skripsi ini. Serta buat semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah banyak membantu dalam penyelesaian skripsi ini. Kiranya Allah SWT memberikan balasan yang berlipat ganda atas segala kebaikan dan bantuan yang telah diberikan kepada penulis.

5 Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, sehingga penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun. Akhir kata semoga tulisan ini dapat menjadi sumbangan yang berarti bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang Farmasi. Medan, April 2010 Penulis Yulia Nanda NIM

6 KARAKTERISASI SIMPLISIA, SKRINING FITOKIMIA ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI HERBA PATIKAN KEBO (Euphorbiae hirtae Herba) ABSTRAK Pemanfaatan sebagian besar tumbuhan telah dilakukan sejak dahulu untuk mengobati berbagai penyakit. Tumbuhan patikan kebo merupakan tumbuhan terna yang banyak digunakan untuk pengobatan mata, asma, batuk dan sakit tengorokan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakterisasi simplisia dan isolasi senyawa flavonoida secara spektrofotometri ultraviolet dengan menggunakan pereaksi geser (Shift reagen). Ekstraksi dilakukan secara perkolasi dengan menggunakan pelarut etanol, kemudian pemisahan senyawa flavonoida dilakukan secara ekstraksi cair-cair dengan menggunakan pelarut n-heksana, kloroform dan etil asetat. Fraksi etil asetat kemudian dikromatografi kertas dengan berbagai fase gerak dan perbandingan untuk mencari pengembang yang terbaik. Selanjutnya fraksi etil asetat dipisahkan dengan kromatografi kertas preparatif dengan menggunakan pengembang asam asetat 50%, dari hasil preparatif didapat dua isolat F1 dan F2. Selanjutnya isolat ini dikromatografi dua arah, dari hasil diketahui bahwa isolat F1 sudah murni sedangkan isolat F2 belum murni. Salah satu isolat yang diperoleh dianalisis secara spektrofotometri ultraviolet dengan penambahan pereaksi geser. Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia diperoleh kadar air 6,654%, kadar sari yang larut dalam air 22,06%, kadar sari yang larut dalam etanol 18,36%, kadar abu total 1,074% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,12%. Hasil skrining fitokimia menunjukkan adanya senyawa golongan alkaloid, flavonoida, tanin, glikosida, glikosida antrakuinon, steroida, saponin. Hasil analisis spektrofotometri ultraviolet dengan spektrofotometer, absorbsi maksimum terdapat pada panjang gelombang 381 nm yang menunjukkan bahwa isolat tersebut golongan flavonoida. Penafsiran spektrum ultraviolet dengan penambahan pereaksi geser menunjukkan adanya gugus hidroksil pada posisi 3,5. Hasil karakterisasi isolat setelah dianalisis secara spektrofotometri ultraviolet dapat disimpulkan sebagai flavonol. Kata kunci: patikan kebo, flavonoida, spektrofotometri ultraviolet

7 CHARACTERIZATION SIMPLEX, PHYTOCHEMICAL SCREENING ISOLATION AND IDENTIFICATION COMPOUND FLAVONOIDA FROM PATIKAN KEBO HERB (Euphorbiae hirtae Herba) ABSTRACT Utilization a large part of floras had been conducted since former to cure various of diseases. Flora patikan kebo is flora terna that most used for asthma medication, cough and red lane pain. This Research main to know characterization of simplex and compound isolation flavonoida by spektrofotometri ultraviolet by using shift reagent. Extraction are conducted in percolation by using ethanol solvent, then compound dissociation flavonoida is conducted in liquid-liquid extraction by using n- heksana solvent, chloroform and acetate ethyl. Fraction of acetate ethyl then paper chromatography with various of motion phase and comparisons to look for the best developer. Furthermore fraction of acetate ethyl is dissociated with preparatif paper chromatography by using developer of acetate acid 50%, from result preparatif is got two isolat F1s and F2. Furthermore this isolat was chromatography two directions, from result known that isolat F1 has been pure whereas isolat F2 not pure. One of isolat that got analysed in spektrofotometri ultraviolet with addition shifts reagent. The Result characterization of simplex gave the water conten value 6,654%, the water soluble extract value 22,06%, the etanol soluble extract value 18,36%, the total ash value 1,074% and the acid insoluble ash value 0,12%. The result phytochemical screening shows there is alkaloid compound, flavonoida, tanin, glikosida, glikosida antrakuinon, steroida, saponin. Analysis Result spektrofotometri ultraviolet with spektrofotometer, maximum absorption exist on wavelength 381 nm that indicate that isolat are flavonoida group. Interpretation of ultraviolet spectrum with addition shifts reagent show existence of hydroxyl bunch on course 3,5. Result characterization of isolat after analysed with spektrofotometri ultraviolet can be concluded as flavonol. Keyword: patikan kebo, flavonoida, ultraviolet spectrophotometric

8 DAFTAR ISI Halaman JUDUL. LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR LAMPIRAN... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR TABEL... i iii iv vi vii viii xii xv xviii BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Perumusan Masalah Hipotesa Tujuan Penelitan Manfaat Penelitian... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Uraian Tumbuhan Habitat (Daerah Tumbuh) Sistematika Tumbuhan Nama Asing Nama Daerah Morfologi Tumbuhan Kandungan Kimia Penggunaan Tumbuhan Senyawa Flavonoida... 7

9 2.3 Ekstraksi Kromatografi Kromatografi Kertas Spektrofotometri Ultraviolet BAB III METODOLOGI PENELITIAN Alat-Alat Bahan-Bahan Pengumpulan dan Pengolahan Bahan Tumbuhan Pengambilan Bahan Tumbuhan Identifikasi Tumbuhan Pembuatan Larutan Pereaksi Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N Pereaksi Asam Klorida 6 N Pereaksi Aluminium Klorida 5% b/v Pereaksi Dragendorff Pereaksi Bouchardat Pereaksi Mayer Pereaksi Molish Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M Pereaksi Kloralhidrat jenuh Pereaksi Asam Klorida 2N Pereaksi Floroglusinol HCl Pereaksi Besi (III) Klorida Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia Pemeriksaan Makroskopik Pemeriksaan Mikroskopik Penetapan Kadar Air... 24

10 3.5.4 Penetapan Kadar Abu Total Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut dalam Asam Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Air Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Etanol Skrining Fitokimia Pemeriksaan Alkaloida Pemeriksaan Flavonoida Pemeriksaan Saponin Pemeriksaan Glikosida Pemeriksaan Tanin Pemeriksaan Steroida dan Triterpenoida Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon Pembuatan Ekstrak Ekstraksi Cair-Cair Senyawa Flavonoida Analisis Senyawa Flavonoida dari Ekstrak Hasil Fraksinasi Dengan Cara Kromatografi Kertas Pemisahan Senyawa Flavonoida dari Fraksi Etil Asetat Dengan Cara Kromatografi Kertas Preparatif Uji Kemurnian terhadap Senyawa Flavonoida Hasil Kromatografi Kertas Preparatif Karakterisasi Hasil Isolasi Krakterisasi Isolat dengan Spektrofotometri Ultraviolet Dengan Penambahan Pereaksi Geser (Shift reagen) BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN BAB V KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran

11 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN... 40

12 DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tanaman Gambar Tumbuhan Patikan Kebo Gambar Simplisia Herba Patikan Kebo Bagan Penelitian Gambar Pemeriksaan Mikroskopik Sayatan Melintang Daun Tumbuhan Patikan Kebo Gambar Pemeriksaan Mikroskopik Sayatan Membujur Atas Daun Tumbuhan Patikan Kebo Gambar Pemeriksaan Mikroskopik Sayatan Membujur Bawah Daun Tumbuhan Patikan Kebo Gambar Pemeriksaan Mikroskopik Serbuk Simplisia Herba Patikan Kebo Perhitungan Hasil Karakterisasi Pemeriksaan Simplisia Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Hasil Karakterisasi Serbuk Simplisia Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Hasil Penapisan Fitokimia Serbuk Simplisia Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Bagan Pembuatan Ekstrak Serbuk Simplisia Herba Patikan Kebo Secara Perkolasi Bagan Ektraksi Cair-Cair Senyawa Flavonoida dari Ekstrak Etanol Bagan Isolasi Senyawa Flavonoida dari Fraksi Etil Asetat Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak BAA Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak Forestal Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak Asam Asetat 50% Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak Asam Asetat 15%.. 59

13 19. Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak HCl 1% Kromatogram Hasil KKt Ekstrak Etanol Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi n-heksana Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi Kloroform Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi Etil Asetat Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi Air Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Penggambaran Kromatogram dari KKt Preparatif Fraksi Etil Asetat Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil Uji Kemurnian Isolat F1 dengan KKt dua Arah... 77

14 37. Spektrum Ultraviolet dari Isolat F1 dalam Metanol Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol dan Setelah Penambahan NaOH Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol dengan Penambahan NaOH dan Penambahan NaOH setelah 5 menit Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan AlCl 3 /HCl Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan AlCl 3 /HCl dan Spektrum Larutan Isolat dengan Penambahan AlCl Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan Natrium Asetat Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan Natrium Asetat dan setelah Penambahan Natrium Asetat/ Asam Borat... 84

15 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Kerangka Flavonoida Struktur Dasar Flavonida Struktur Flavanon Struktur Flavanonol Struktur Flavon Struktur Flavonol Struktur Isoflavon Struktur Antosianin Struktur Auron Struktur Kalkon , 5 dihirdoksil flavonol Tumbuhan Patikan Kebo (Euphorbia hirta L.) Simplisia Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Bagan Penelitian Pemeriksaan Mikroskopik Sayatan Melintang Daun Tumbuhan Patikan Kebo Pemeriksaan Mikroskopik Sayatan Membujur Atas Daun Tumbuhan Patikan Kebo Pemeriksaan Mikroskopik Sayatan Membujur Bawah Daun Tumbuhan Patikan Kebo Pemeriksaan Mikroskopik Serbuk Simplisia Herba Patikan Kebo Bagan Pembuatan Ekstrak... 53

16 20. Bagan Ekstraksi Cair-Cair Senyawa Flavonoida dari Ekstrak Etanol Bagan Isolasi Senyawa dari Fraksi Etil Asetat Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak BAA Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak Forestal Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak Asam Asetat 50% Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak Asam Asetat 15% Kromatogram Hasil Fraksinasi Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) dengan KKt dengan Fase Gerak HCl 1% Kromatogram Hasil KKt Ekstrak Etanol Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi n-heksana Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi Kloroform Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi Etil Asetat Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil KKt Fraksi Air Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Penggambaran Kromatogram dari KKt Preparatif Fraksi Etil Asetat Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F1 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba)... 71

17 38. Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram F2 dengan KKt Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Kromatogram Hasil Uji Kemurnian Isolat F1 dengan KKt Dua Arah Spektrum Ultraviolet dari Isolat F1 dalam Metanol Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol dan Setelah Penambahan NaOH Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol dengan Penambahan NaOH dan Penambahan NaOH setelah 5 menit Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan AlCl 3 /HCl Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan AlCl 3 /HCl dan Spektrum Larutan Isolat dengan Penambahan AlCl Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan Natrium Asetat Spektrum Ultraviolet Larutan Isolat F1 dalam Metanol setelah Penambahan Natrium Asetat dan setelah Penambahan Natrium Asetat/ Asam Borat... 84

18 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Karakteristik Serbuk Simplisia Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba) Hasil Penapisan Fitokimia Serbuk Simplisia Herba Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae herba)... 52