EFEK SITOTOKSIK DAN KINETIKA PROLIFERASI FRAKSI ETIL ASETAT EKSTRAK ETANOLIK TANAMAN CEPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP SEL MYELOMA

Transkripsi

1 EFEK SITOTOKSIK DAN KINETIKA PROLIFERASI FRAKSI ETIL ASETAT EKSTRAK ETANOLIK TANAMAN CEPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP SEL MYELOMA SKRIPSI Oleh: DEWI NUR ROHIM K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2007

2 EFEK SITOTOKSIK DAN KINETIKA PROLIFERASI FRAKSI ETIL ASETAT EKSTRAK ETANOLIK TANAMAN CEPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP SEL MYELOMA SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah di Surakarta Oleh : DEWI NUR ROHIM K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2006 ii

3 PENGESAHAN SKRIPSI Berjudul : EFEK SITOTOKSIK DAN KINETIKA PROLIFERASI FRAKSI ETIL ASETAT EKSTRAK ETANOLIK TANAMAN CEPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP SEL MYELOMA Oleh : DEWI NUR ROHIM K Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Pada tanggal : 17 Januari 2007 Mengetahui, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Dekan, Dra. Nurul Muthmainah, M.Si, Apt. Pembimbing I Pembimbing II Maryati, M. Si, Apt dr. EM. Sutrisna, M. Kes Penguji : 1. DR. Pudjono, SU, Apt (... ) 2. Dedi Hanwar, M.Si, Apt (... ) 3. Maryati, M. Si, Apt (... ) 4. dr. EM Sutrisna, M. Kes (... ) iii

4 MOTTO Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka, apabila kamu sudah selesai (dari suatu urusan), kerjakanlah dengan sungguh-sungguh (urusan) yang lain (Al Insyirah : 6-7) Kebimbangan kita adalah pengkhianatan kita yang sering kali membuat kita kehilangan peluang menang karena takut mencobanya (One) Nothing smart without slip, nothing wise without experience (Penulis) Sebuah persembahan terindah buat Ibu dan Bapak, sebagai tanda cinta bhaktiku Khusna Akbari, saudaraku tercinta Dan Mas Syaiful yang tercinta iv

5 DEKLARASI Saya menyatakan bahwa penelitian/karya ilmiah/skripsi ini adalah hasil pekerjaan saya sendiri dan sepanjang pengetahuan saya tidak berisi materi yang dipublikasikan atau ditulis orang lain atau telah dipergunakan dan diterima sebagai persyaratan penyelesaian studi pada bagian-bagian tertentu yang telah dinyatakan dalam teks. Apabila penelitian/ karya ilmiah/ skripsi ini merupakan jiplakan dari penelitian/ karya ilmiah/ skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi baik secara akademik maupun hukum. Surakarta, 3 Januari 2007 Peneliti Dewi Nur Rohim v

6 KATA PENGANTAR Assalamu alaikum Wr. Wb Puji syukur ke hadirat ALLAH SWT yang telah melimpahkan rahmat serta hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul EFEK SITOTOKSIK DAN KINETIKA PROLIFERASI FRAKSI ETIL ASETAT EKSTRAK ETANOLIK TANAMAN CEPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP SEL MYELOMA yang disusun sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi UMS. Dalam penulisan skripsi ini tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak dan pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih yang tak terhingga kepada: 1. Ibu Dra. Nurul Muthmainah, M. Si, Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi UMS. 2. DIKTI Program Hibah Kompetensi A2 yang telah membiayai penelitian 3. Ibu Maryati, M. Si, Apt selaku dosen pembimbing utama yang telah banyak memberikan bimbingan, pengarahan, waktu dan pengertiannya dari awal hingga terwujudnya skripsi ini. 4. Bapak dr. EM Sutrisna, M. Kes selaku dosen pembimbing pendamping yang telah banyak memberikan bimbingan, pengarahan, waktu dan pengertiannya dari awal hingga terwujudnya skripsi ini. 5. Bapak DR. Pudjono, SU, Apt selaku penguji yang telah banyak memberikan waktu dan arahan. vi

7 6. Bapak Dedi Hanwar, M.Si, Apt selaku penguji yang telah banyak memberikan waktu dan arahan. 7. Mbak Rumbiwati atas kerjasamanya selama penelitian. 8. Bapak Ibu dosen serta staf karyawan Fakultas Farmasi UMS, termasuk laboran atas bantuan selama penelitian. 9. Bapak Suripto dan Ibu Marsiyati, kedua orang tuaku, terima kasih atas segala do a, kasih sayang, pengertian, dan dukungannya selama ini. 10. Syaifullah, Khusna Akbari, dan seluruh saudara kerabatku yang selalu memberikan semangat dan inspirasi. 11. Rina, Itsna, dan Marsini, teman seperjuangan dalam penelitian skripsi, terima kasih atas segala keceriaan, persaudaraan, tawa, dan tangis. 12. Ferry, Ratih, Anik, Zaenab, Laila, Eva, Dewi, Dian, Dyas, Nia, dan sahabatku yang telah memberikan dukungan, bantuan, dan motivasi. 13. Seluruh teman-temanku Farmasi 2003 dan adik-adik angkatan. Akhir kata penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih banyak kekurangan dan jauh dari sempurna. Penulis selalu terbuka untuk menerima kritik dan saran. Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis khususnya dan pembaca pada umumnya. Wassalamu alaikum. Wr. 3 Januari 2007 Penulis vii

8 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN SAMPUL... HALAMAN PENGESAHAN... HALAMAN PERSEMBAHAN DAN MOTTO... HALAMAN DEKLARASI... KATA PENGANTAR... ii ii iii iv v DAFTAR ISI... viii DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... xi xii DAFTAR SINGKATAN... xiii INTISARI... xiv BAB I. PENDAHULUAN... 1 A. LATAR BELAKANG MASALAH... 1 B. PERUMUSAN MASALAH... 4 C. TUJUAN PENELITIAN... 4 D. TINJAUAN PUSTAKA Kanker Karsinogenesis, Mutagenesis, dan Teratogenesis Siklus Sel Kanker Regulator Daur Sel viii

9 5. Sel Myeloma Pengobatan Kanker Tanaman Ceplukan (Physalis angulata L.) a. Klasifikasi Tanaman b. Nama Daerah c. Kandungan Kimia d. Manfaat Tanaman e. Tanaman Ceplukan Kaitannya dengan Kanker Ekstraksi dan Fraksinasi a. Metode Maserasi b. Metode Perkolasi c. Soxhletasi Uji Sitotoksik E. HIPOTESIS BAB II. METODE PENELITIAN A. Kategori Penelitian B. Variabel Penelitian C. Bahan dan Alat D. Cara Penelitian Determinasi Tanaman Pengumpulan Bahan, Pengeringan, dan Pembuatan Serbuk Ekstraksi dan Fraksinasi Uji Sitotoksik ix

10 a. Preparasi Sel b. Panen Sel c. Pembuatan Larutan Uji d. Uji Sitotoksisitas e. Uji Pengamatan Kinetika Proliferasi Cara Analisis Uji Sitotoksik Uji Pengamatan Kinetika Proliferasi BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Determinasi Tanaman B. Ekstraksi dan Fraksinasi C. Uji Sitotoksik dengan Metode MTT Assay D. Uji Pengamatan Kinetika Prolifarasi BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan B. Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN x

11 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Data Hasil Fraksinasi Bertingkat dari Ekstrak Etanol 96% 41 Tabel 2. Hasil Uji Sitotoksik Sel Myeloma Akibat Perlakuan Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Tanaman Ceplukan (Physalis angulata L.) terhadap Sel Myeloma Tabel 3. Hasil Uji Dobling Time Sel Myeloma Akibat Perlakuan Fraksi etil Asetat Ekstrak Etanolik Tanaman Ceplukan (Physalis angulata L.) dengan Metode MTT Tabel 4. Persamaan Kurva Baku Absorbansi Versus Waktu Inkubasi terhadap Sel Myeloma xi

12 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Siklus Sel Gambar 2. Cell Cycle Progression and Regulator-Regulatornya Gambar 3. Reaksi Reduksi MTT Menjadi Formazan Gambar 4. Skema Kerja Penelitian Gambar 5. Grafik Hubungan Konsentrasi Versus Persen Sel Hidup Akibat Perlakuan fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanolik Tanaman Ceplukan (Physalis angulata L.) terhadap Sel Myeloma Gambar 6. Grafik Hubungan Log Konsentrasi Versus Probit pada Uji Sitotoksik Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanol Tanaman Ceplukan (Physalis angulata L.) terhadap Sel Myeloma dengan Metode MTT Gambar 7. Morfologi Sel Myeloma Gambar 8. Kurva Doubling Time Hubungan Waktu Inkubasi dengan Absorbansi Akibat Perlakuan Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanolik P. angulata L. terhadap Sel Myeloma xii

13 DAFTAR SINGKATAN IC DNA RNA RSV prb Cyn Cdk MTT SDS = Inhibitory Concentration = Deoxyribonucleic Acid = Ribonucleic Acid = Rous Sarcoma Virus = Protein Retinoblastoma = Cyclin = Cyclin Dependent Kinase = 3-(4,5-dimethylthiazol 1,2 il)-2,5-diphenyl tetrazoleum bromide = Sodium Dodecyl Sulphat DMSO = Dimethyl Sulfoxyde CCS = Cell Cycle Spesific CCNS = Cell Cycle Nonspesific FBS PBS HCL = Fetal Bovine Serum = Phosphat Buffer Saline = Asam Klorida MAPK = Mitogen Activated Protein Kinase PKC = Protein Kinase C RPMI = Rosewell Park Memorial Institute xiii

14 INTISARI Kanker termasuk penyakit yang sangat ditakuti karena sulit disembuhkan, bahkan tidak jarang menyebabkan kematian. Dari spesies tumbuhan yang ada, sekitar 1250 spesies dapat dimanfaatkan sebagai obat, salah satunya adalah tanaman ceplukan (Physalis angulata L.). Tanaman ini diduga mempunyai aktivitas kuat melawan beberapa tipe sel kanker pada manusia dan hewan. Dan setelah diuji praklinis, ternyata tanaman ini mempunyai efek antitumor. Adapun tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui efek sitotoksik dan kinetika proliferasi fraksi etil asetat ekstrak etanolik tanaman ceplukan terhadap sel myeloma. Serbuk tanaman ceplukan disari dengan alat Soxhlet dan difraksinasi dengan pelarut petroleum eter, kloroform, dan etil asetat. Pada uji sitotoksik, sampel diujikan pada sel myeloma dengan kepadatan sel 2x10 4. Setelah diinkubasi selama 24 jam dan diberi pereaksi MTT, dibaca absorbansinya dengan ELISA reader pada panjang gelombang 550 nm. Dan digunakan analisis probit untuk mengetahui nilai IC 50. Sedangkan pada uji kinetika proliferasi, digunakan sel myeloma dengan kepadatan sel 10 4 dengan dua konsentrasi di bawah nilai IC 50, kemudian diinkubasi selama 24, 48, dan 72 jam. Setelah diberi pereaksi MTT, kemudian dibaca pada jam-jam tersebut dengan ELISA reader untuk mengetahui waktu kinetika proliferasi dari sel myeloma. Kemudian dibuat grafik hubungan waktu inkubasi versus absorbansi untuk mengetahui nilai slopenya. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi etil asetat ekstrak etanolik tanaman ceplukan mempunyai efek sitotoksik dengan nilai IC 50 sebesar 273,22 µg/ml. Uji kinetika proliferasi, membuktikan bahwa fraksi etil asetat ekstrak etanolik tanaman ceplukan dapat memperpanjang waktu kinetika proliferasi sel myeloma. Kata kunci: Physalis angulata L., Sitotoksik, Kinetika proliferasi. xiv