Lampiran 1 Bagan alir penelitian. Simplisia jahe merah. Penotolan ekstrak maserasi, pengujian dengan 12 pelarut tunggal, dan deteksi komponen

Transkripsi

1 LAMPIRAN 16

2 17 Lampiran 1 Bagan alir penelitian Simplisia jahe merah Penotolan ekstrak maserasi, pengujian dengan 12 pelarut tunggal, dan deteksi komponen (anisaldehida) Ekstraksi Sonikasi dengan Variasi, bobot sampel, volume pelarut, dan waktu ekstraksi dengan rancangan central composite design Tiga pelarut tunggal dengan pemisahan terbaik Penentuan 10 komposisi fase gerak dengan rancangan simplex centroid design Penotolan ekstrak menggunakan komposisi fase gerak optimum (titik optimum) (2), deteksi komponen Jumlah pita (3) dan keterpisahan terbaik Penotolan ekstrak, pengujian dengan 10 komposisi fase gerak, dan deteksi komponen (anisaldehida) Jumlah pita (1) dan keterpisahan terbaik Analisis statistik Komposisi fase gerak optimum (titik optimum) (2) Jumlah pita (1) dan pita (3) dibandingkan Pemilihan cara ekstraksi dengan jumlahpita dan keterpisahan terbaik Validasi Metode Uji ekstrak jahe merah dari 6 lokasi berbeda dengan standard/senyawa penciri (gingerol)

3 18 Lampiran 2 Penggolongan pelarut oleh Snyder s Golongan Pelarut Kekuatan pelarut - n-heksana* 0 I n-butil eter 2.1 Diisopropil eter 2.4 Metil-t-butil eter 2.7 Dietil eter* 2.8 II i-pentanol 3.7 n-butanol* 3.9 i-propanol 3.9 n-propanol 4.0 Etanol* 4.3 Metanol* 5.1 III Tetrahidrofuran* 4.0 Piridin 5.3 Metoksietanol 5.5 Metilformamida 6.0 Dimetilformamida 6.4 Dimetilsulfoksida 7.2 IV Asam asetat* 6.0 Formamida 9.6 V Diklorometana* 3.1 1,1-dikloroetana 3.5 Benzilalkohol 5.7 VI Etil asetat* 4.4 Metil etil keton 4.7 Dioksana 4.8 Aseton* 5.1 Asetonitril* 5.8 VII Toluena 2.4 Benzena 2.7 Nitrobenzena 4.4 Nikrometana 6.0 VIII Kloroform* 4.1 Dodekafloroheptanol 8.8 Air 10.2 Keterangan: * menunjukkan pelarut tunggal yang dipilih.

4 19 Lampiran 3 Variasi ekstraksi sonikasi dengan rancangan central composite design Perlakuan Kode level x 1 x 2 x 3 Keterangan: x 1 = bobot sampel, x 2 = volume pelarut, dan x 3 = waktu ekstraksi x 1 (g) Nilai level x 2 (ml) x 3 (menit) Lampiran 4 jumlah pita pada saat elusi dengan 12 pelarut tunggal Fase gerak Jumlah pita dengan deteksi UV 254 nm UV 366 nm Anisaldehida Tetrahidrofuran Kloroform Etil asetat Diklorometana Dietil eter Asetonitril Methanol Aseton n-heksana Asam asetat Etanol n-butanol 1 1 1

5 20 Lampiran 5 Hasil elusi dengan 12 pelarut tunggal dengan visualisasi UV 254 nm Keterangan 1. tetrahidrofuran, 2. kloroform, 3. etil asetat, 4. diklorometana, 5. dietil eter, 6. asetonitril, 7. methanol, 8. aseton, 9. n-heksana, 10. asam asetat, 11. etanol, 12. n-butanol.

6 21 Lampiran 6 Hasil elusi dengan 12 pelarut tunggal dengan visualisasi UV 366 nm Keterangan 1. tetrahidrofuran, 2. kloroform, 3. etil asetat, 4. diklorometana, 5. dietil eter, 6. asetonitril, 7. methanol, 8. aseton, 9. n-heksana, 10. asam asetat, 11. etanol, 12. n-butanol.

7 22 Lampiran 7 Hasil elusi komposisi rancangan simplex centroid design pelarut kloroform, etil asetat, dan n-heksana dengan visualisasi UV 366 nm Keterangan eluen yang digunakan : A = kloroform, B = etil asetat, C = n-heksana 1 (5mL A), 2 (5mL C), 3 (5mL B), 4 (2.5mL A:2.5mL C), 5 (2.5mL B:2.5mLC), 6(2.5mL A:2.5mL B), 7 (1.7mL A:1.7 ml B:1.7mL C), 8 (0.8mL A:3.3mL B: 0.8mL C), 9 (0.8mL A:0.8mL B:3.3mL C), dan 10 (3.3mL A:0.8mL B:0.8mL C).

8 23 Lampiran 8 Hasil elusi komposisi rancangan simplex centroid design pelarut kloroform, etil asetat, dan n-heksana dengan deteksi anisaldehida Keterangan eluen yang digunakan: A = kloroform, B = etil asetat, C = n-heksana 1(5mL A), 2 (5mL C), 3 (5mL B), 4 (2.5mL A:2.5mL C), 5 (2.5mL B:2.5mLC), 6(2.5mL A:2.5mL B), 7 (1.7mL A:1.7 ml B:1.7mL C), 8 (0.8mL A:3.3mL B: 0.8mL C), 9 (0.8mL A:0.8mL B:3.3mL C), dan 10 (3.3mL A:0.8mL B:0.8mL C).

9 24 Lampiran 9 Jumlah pita hasil elusi dengan 10 macam komposisi fase gerak dari rancangan simplex centroid Fase gerak Kloroform (A) Komposisi Etil asetat (B) n-heksana (C) UV 366 nm Jumlah pita Anisaldehida /2 0 1/ /2 1/ /2 1/ /3 1/3 1/ /6 2/3 1/ /6 1/6 2/ /3 1/6 1/6 3 6 Lampiran 10 Data hasil pengolahan statistik dengan minitab 14 untuk deteksi UV 366 nm rancangan simplex centroid design. Simplex Centroid Design Components: 3 Design points: 10 Process variables: 0 Design degree: 3 Mixture total: Number of Boundaries for Each Dimension Point Type Dimension Number Number of Design Points for Each Type Point Type Distinct Replicates Total number Bounds of Mixture Components Amount Proportion Pseudocomponent Comp Lower Upper Lower Upper Lower Upper A B C Regression for Mixtures: jumlah pita 366 nm versus A, B, C Estimated Regression Coefficients for jumlah pita 366 nm (component proportions) Term Coef SE Coef T P VIF A * * B * * C * * A*B A*C B*C S = PRESS = R-Sq = 48.50% R-Sq(pred) = 0.00% R-Sq(adj) = 0.00%

10 25 Lanjutan Lampiran 10 Analysis of Variance for jumlah pita 366 nm (component proportions) Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression Linear Quadratic Residual Error Total Response Optimization Parameters Goal Lower Target Upper Weight Import jumlah pita Target Global Solution Components A = B = C = Predicted Responses jumlah pita = , desirability = Composite Desirability = Lampiran 11 Data hasil pengolahan statistic dengan minitab 14 untuk deteksi anisaldehida rancangan simplex centroid design. Simplex Centroid Design Components: 3 Design points: 10 Process variables: 0 Design degree: 3 Mixture total: Number of Boundaries for Each Dimension Point Type Dimension Number Number of Design Points for Each Type Point Type Distinct Replicates Total number Bounds of Mixture Components Amount Proportion Pseudocomponent Comp Lower Upper Lower Upper Lower Upper A B C Regression for Mixtures: pita anisaldehida versus A, B, C Estimated Regression Coefficients for pita anisaldehida (component proportions) Term Coef SE Coef T P VIF A * * B * * C * * A*B A*C B*C S = PRESS = R-Sq = 95.07% R-Sq(pred) = 67.40% R-Sq(adj) = 88.90%

11 26 Lanjutan Lampiran 11 Analysis of Variance for pita anisaldehida (component proportions) Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression Linear Quadratic Residual Error Total Response Optimization Parameters Goal Lower Target Upper Weight Import pita anisald Target Global Solution Components A = B = C = Predicted Responses pita anisald = , desirability = Composite Desirability = Lampiran 12 Hasil 20 perlakuan ekstraksi sonikasi menggunakan rancangan central composite design untuk deteksi dengan anisaldehida Keterangan: nomor 1-20 adalah hasil elusi KLT dari 20 perlakuan variasi ekstraksi sonikasi dengan variasi bobot, volume dan waktu ekstraksi yang ditunjukkan pada lampiran 13.

12 27 Lampiran 13 Jumlah pita hasil elusi dari ekstraksi sonikasi dengan deteksi UV 366 nm dan anisaldehida. Bobot Waktu Jumlah pita Jumlah Pita No (g) Volume (ml) (menit) 366 nm anisladehida Lampiran 14 Data hasil pengolahan minitab 14 untuk ekstraksi sonikasi dengan deteksi UV 366 dengan rancangan central composite design. Central Composite Design Factors: 3 Replicates: 1 Base runs: 20 Total runs: 20 Base blocks: 1 Total blocks: 1 Two-level factorial: Full factorial Cube points: 8 Center points in cube: 6 Axial points: 6 Center points in axial: 0 Alpha: Response Surface Regression: pita 366 nm versus A, B, C The analysis was done using coded units. Estimated Regression Coefficients for pita 366 nm Term Coef SE Coef T P Constant A B C A*A B*B C*C A*B A*C B*C S = R-Sq = 65.7% R-Sq(adj) = 34.9% Analysis of Variance for pita 366 nm

13 28 Lanjutan Lampiran 14 Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression Linear Square Interaction Residual Error Lack-of-Fit Pure Error Total Estimated Regression Coefficients for pita 366 nm using data in uncoded units Term Coef Constant A B C E-17 A*A B*B C*C A*B E-17 A*C E-17 B*C E-17 Response Optimization Parameters Goal Lower Target Upper Weight Import pita 366 nm Target Global Solution A = B = C = Predicted Responses pita 366 nm = , desirability = Composite Desirability = Response Surface Regression: pita 366 nm versus A The analysis was done using coded units. Estimated Regression Coefficients for pita 366 nm Term Coef SE Coef T P Constant A A*A S = R-Sq = 52.0% R-Sq(adj) = 46.3% Analysis of Variance for pita 366 nm Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression Linear Square Residual Error Lack-of-Fit Pure Error Total Unusual Observations for pita 366 nm pita 366 Obs StdOrder nm Fit SE Fit Residual St Resid X RX X denotes an observation whose X value gives it large influence. R denotes an observation with a large standardized residual. Estimated Regression Coefficients for pita 366 nm using data in uncoded units Term Coef Constant A A*A Response Optimization Parameters Goal Lower Target Upper Weight Import pita 366 nm Target Global Solution A = Predicted Responses pita 366 nm = , desirability = Composite Desirability =

14 29 Lampiran 15 Data hasil pengolahan minitab 14 untuk ekstraksi sonikasi dengan deteksi anisaldehida dengan rancangan central composite design. Central Composite Design Factors: 3 Replicates: 1 Base runs: 20 Total runs: 20 Base blocks: 1 Total blocks: 1 Two-level factorial: Full factorial Cube points: 8 Center points in cube: 6 Axial points: 6 Center points in axial: 0 Alpha: Response Surface Regression: pita white versus A, B, C The analysis was done using coded units. Estimated Regression Coefficients for pita white Term Coef SE Coef T P Constant A B C A*A B*B C*C A*B A*C B*C S = R-Sq = 76.4% R-Sq(adj) = 55.1% Analysis of Variance for pita white Source DF Seq SS Adj SS Adj MS F P Regression Linear Square Interaction Residual Error Lack-of-Fit Pure Error Total Estimated Regression Coefficients for pita white using data in uncoded units Term Coef Constant A B C E-18 A*A B*B C*C A*B A*C E-16 B*C E-16 Response Optimization Parameters Goal Lower Target Upper Weight Import pita white Target Global Solution A = B = C = Predicted Responses pita white = , desirability = Composite Desirability = 1.00

15 30 Lampiran 16 Hasil elusi jahe merah dari berbagai daerah untuk deteksi UV 254 nm. Standar JM1 JM2 JM3 JM4 JM5 JM6 JM7 JM8 JM9 Standar JM10 JM11 JM12 JM13 JM14 JM15 JM16 JM17 JM18 Keterangan: STD JM1 JM2, JM 3 JM4, JM5, JM6, JM15 JM7, JM8 JM9, JM10, JM11 JM12, JM13, JM14, JM16 JM17, JM18 : Senyawa standar 6-gingerol : Bogor : Purwekerto : Pacitan : Kulonprogo : Ponorogo : Wonogiri : Semarang

16 31 Lampiran 17 Nilai resolusi masing-masing pita dan rata-rata nilai Rf pada presisi menengah dengan deteksi UV 366 nm. Nilai Rf Nilai resolusi (cm) Ratarata Hari Standar Larutan 1 Larutan 2 Larutan 3 Larutan 1 Larutan 2 Larutan 3 Rf (cm) Lampiran 18 Nilai resolusi masing-masing pita dan rata-rata Rf pada keterulangan dengan deteksi UV 366 nm. Nilai Rf (cm) Nilai resolusi (cm) Ratarata Pelat Standar Larutan 1 Larutan 2 Larutan 3 Larutan 1 Larutan 2 Larutan 3 Rf (cm)

17 32 Lampiran 19 Nilai Rf pada stabilitas analat dengan deteksi UV 366 nm Nilai R f masing-masing pita pada stabilitas analat selama kromatografi Nilai Rf Pita ke- Elusi 1 Elusi Nilai R f masing-masing pita pada stabilitas dalam larutan Nilai Rf Pita ke- a b c d e Keterangan : (a) Stabilitas sampel pada pelat 3 jam sebelum kromatografi, (b & c) sampel segar diaplikasikan segera sebelum kromatografi, (d) sampel setelah 3 jam sebelum kromatografi (dalam larutan), dan (e) standar 6-gingerol. Nilai R f masing-masing pita pada stabilitas analat selama visualisasi UV 366 nm Nilai Rf Pita ke- 2 menit 5 menit 10 menit 20 menit 30 menit 60 menit

18 33 Lampiran 20 Nilai Rf masing-masing pita pada ketangguhan dengan Twin Trough Chamber dan Flat Bottom Chamber. Nilai Rf Twin Trough Chamber Nilai Rf Flat Bottom Chamber Standar 6-gingerol Larutan 1 Larutan 2 Standar 6-gingerol Larutan 1 Larutan Lampiran 21 Nilai Rf masing-masing pita pada jahe merah, jahe gajah, jaheemprit, dan lengkuas.. Standar 6- gingerol Nilai Rf Jahe Merah Jahe Gajah Jahe Emprit Lengkuas