BAHAN DAN METODE. Bahan dan Alat

Transkripsi

1 BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian dilakukan di berbagai lahan pertanian, kehutanan dan pekarangan di Kecamatan Dramaga yang meliputi sepuluh desa yaitu Desa Dramaga, Babakan, Cikarawang, Ciherang, Sukawening, Sukadamai, Petir, Purwasari, Neglasari dan Sinarsari. Daerah lain yang juga di survei yaitu kabupaten Karawang, Cianjur, Subang, Indramayu, Garut, Pandeglang, Sukabumi dan Bandung Barat. Identifikasi dilakukan di Laboratorium Biosistematika Serangga, Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor. Penelitian dimulai dari September 2009 sampai Juli Bahan dan Alat Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah alkohol % yang berfungsi melarutkan lapisan lilin pada tubuh kutukebul, larutan KOH 10% untuk mengeluarkan cairan tubuh, asam fuchsin dan asam asetik glacial berfungsi untuk pewarnaan, carbol xylene, minyak cengkeh, Canada balsam berfungsi sebagai media dalam preparat, dan sampel kutukebul dari tanaman inang. Alat yang digunakan adalah mikroskop cahaya dan stereo, GPS (Global Positioning System) Megellan tipe 315 berfungsi untuk mengetahui posisi lintang dan bujur dari suatu lokasi, kantung plastik transparan, alat tulis, tabung reaksi, cawan syracus untuk perendaman, kaca penutup preparat dan kaca objek. Metode Penelitian Pengumpulan Sampel Kutukebul dan Tanaman Inang Penelitian dilakukan dengan mengambil sampel pada bagian daun tanaman inang beserta kutukebulnya untuk diidentifikasi di laboratorium. Kutukebul yang ditemukan pada daun tanaman inang, baik dalam bentuk pupa maupun kantung pupa, diambil kemudian dimasukkan ke dalam kantung plastik. Sampel kutukebul tersebut di bawa ke Laboratorium Biosistematika Serangga, Departemen Proteksi Tanaman IPB. Dengan bantuan mikroskop puparium dilepaskan secara perlahanlahan dari jaringan daun menggunakan jarum. Selanjutnya puparium disimpan di

2 20 dalam alkohol 70% atau di dalam freezer hingga siap untuk diawetkan dalam bentuk preparat mikroskop. Survei lokasi untuk pengambilan inang beserta kutukebulnya dilakukan pada sepuluh desa yang berada di Kecamatan Dramaga yaitu Desa Dramaga, Babakan, Cikarawang, Ciherang, Sukawening, Sukadamai, Petir, Purwasari, Neglasari, Sinarsari, dan di luar daerah Kecamatan Dramaga. Survey tanaman inang dilakukan pada berbagai tanaman yang meliputi kelompok tanaman hias di pekarangan, tanaman budidaya di lahan pertanian, tanaman buah-buahan serta berbagai tanaman yang ditemukan terserang oleh ketiga jenis kutukebul tersebut. Pengamatan sampel tanaman inang beserta kutukebulnya di Kecamatan Dramaga dilakukan secara menyeluruh pada lahan pertanian, pekarangan dan kehutanan atau semak belukar pada setiap desa (Gambar 4). Masing-masing lahan dilakukan pengulangan pengambilan sampel inang beserta kutukebulnya selama satu kali untuk kemungkinan penemuan inang yang lain. Pengumpulan sampel tanaman inang beserta kutukebul dilakukan pada lahan yang sama sebanyak dua kali. Pengambilan sampel inang di luar Kecamatan Dramaga dilakukan untuk memperbanyak kemungkinan tanaman inang yang terserang. Pengamatan inang dan kutukebul dilakukan secara acak dan tidak terstruktur. Pengumpulan sampel inang beserta kutukebul hanya dilakukan pada lahan pertanian atau pekarangan saja yang dijadikan daerah pengumpulan sampel dan tidak dilakukan pengulangan. GPS digunakan untuk mengetahui ketinggian dan kordinat lokasi pengambilan sampel. Identifikasi dilakukan dengan mengamati morfologi pupa kutukebul pada preparat slide.

3 21 Desa Cikarawang Desa Babakan Desa Dramaga Desa Neglasari Desa Sinarsari Desa Ciherang Desa Petir Desa Sukawening Desa Purwasari Lahan Pertanian Lahan Pekarangan Semak Belukar Gambar 4 Lokasi survei inang dan pengumpulan sampel kutukebul di Kecamatan Dramaga

4 22 Pembuatan Preparat Kutukebul Spesimen kutukebul yang diperoleh dari lapang dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang di dalamnya telah terdapat larutan alkohol 80%, selanjutnya tabung reaksi tersebut dimasukkan ke dalam gelas ukur untuk dipanaskan pada suhu ºC selama 10 menit. Setelah itu, spesimen dan larutan alkohol 80% dituangkan ke dalam cawan Syracus. Kemudian spesimen di masukkan ke dalam tabung reaksi yang telah terisi KOH 10% dan dipanaskan. Spesimen dimasukkan ke dalam larutan KOH 10% untuk mengeluarkan cairan tubuh. Langkah berikutnya adalah isi dari tubuh kutukebul dikeluarkan dengan menekan terus-menerus secara perlahan bagian lingkar dorsal posterior spesimen hingga cairan tubuhnya keluar. Larutan KOH 10% dibuang dengan pipet hingga tidak ada sisa. Selanjutnya aquades dimasukkan untuk mencuci sisa larutan KOH 10%. Tahap berikutnya adalah proses pewarnaan. Pewarnan pupa menggunakan campuran asam fuchsin dengan asam asetik glacial dengan perbandingan 1:1 pada cawan syracus selama menit. Setelah melalui tahap ini, pupa akan berwarna merah pekat. Pupa direndam dalam alkohol 80% sampai warnanya agak memudar. Hal ini bertujuan untuk mengurangi efek pewarnaan. Alkohol 80% dibuang dan diganti dengan larutan Carbol xylene kemudian direndam selama satu menit. Larutan Carbol xylene dibuang dan diganti dengan alkohol absolut dan dipindahkan ke dalam cawan syracus yang berisi minyak cengkeh selama 10 menit. Selanjutnya pupa diambil dan diletakkan di tengah kaca objek. Setelah pupa ditata lurus, diteteskan Canada balsam secara merata dan ditutup dengan kaca penutup, kemudian preparat dikeringkan ke dalam elemen pengering selama 4-7 hari.

5 23 Identifikasi Kutukebul dan Tanaman Inang Pengamatan morfologi dan identifikasi kutukebul dilakukan di bawah mikroskop cahaya dengan perbesaran 4x10, 10x10, dan 40x10. Buku kunci identifikasi yang digunakan untuk membantu dalam mengidentifikasi spesies kutukebul yaitu An Identification Guide to Common Whitefly Pest Species of the World (Homoptera, Aleyrodidae) (Martin 1987) dan Identification of Whiteflies (Hemiptera, Aleyrodidae) (Watson 2007). Buku yang digunakan untuk mengidentifikasi tanaman inang adalah Mountain Flora of Java (Van Steenis 2007).