SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL DAUN SUKUN

Transkripsi

1 SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL DAUN SUKUN (Artocarpus altilis), NANGKA (Artocarpus heterophyllus) DAN KLUWIH (Artocarpus camansi) TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 SKRIPSI Oleh: PRATIWI WIDOWATI K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2017

2 SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL DAUN SUKUN (Artocarpus altilis), NANGKA (Artocarpus heterophyllus) DAN KLUWIH (Artocarpus camansi) TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakata Oleh: PRATIWI WIDOWATI K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2017 i

3

4

5 KATA PENGANTAR Assalamu alaikum warohmatullahi wabarokatuh Alhamdulillahirrabbil alamin, puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat serta karunianya-nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL DAUN SUKUN (Artocarpus altilis), NANGKA (Artocarpus heterophyllus) DAN KLUWIH (Artocarpus camansi) TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7. Penyusunan skripsi ini dilakukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammdiyah Surakarta. Penyusunan skripsi ini tidak luput dari bantuan berbagai pihak, oleh karena itu perkenankan penulis untuk menyampaikan rasa terimakasih kepada: 1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta dan juga sebagai pembimbing akademik. 2. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc. selaku pembimbing utama. 3. Kedua orangtua dan kakak tercinta, Bapak Rusdiyono, Ibu Sutinah dan kakak Prakoso Widodo yang senantiasa memberikan dukungan dan doa untuk kelancaran dan kesuksesan dalam menyelesaikan tugas akhir ini. 4. Tim penelitian sitotoksik yang selalu memberi semangat dan saling bertukar ilmu pengetahuan, sehingga penelitian ini dapat selesai dengan baik. Wassalamu alaikum warohmatullahi wabarokatuh Surakarta, 27 Desember 2016 Penulis iv

6 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i HALAMAN PENGESAHAN... ii DEKLARASI... iii KATA PENGANTAR... iv DAFTAR ISI...v DAFTAR GAMBAR... vii DAFTAR TABEL... viii DAFTAR LAMPIRAN... ix DAFTAR SINGKATAN...x ABSTRAK... xi BAB I. PENDAHULUAN...1 A. Latar Belakang Masalah...1 B. Rumusan Masalah...2 C. Tujuan Penelitian...3 D. Tinjauan Pustaka Tanaman Sukun (Artocarpus altilis)...3 a. Klasifikasi Tanaman...3 b. Kandungan Kimia...4 c. Aktivitas Farmakologi Tanaman Nangka (Artocarpus heterophyllus)...5 a. Klasifikasi Tanaman...5 b. Kandungan Kimia...5 c. Aktivitas Farmakologi Tanaman Kluwih (Artocarpus camansi)...6 a. Klasifikasi Tanaman...6 b. Kandungan Kimia...6 c. Aktivitas Farmakologi Kanker Sel MCF v

7 6. Uji Sitotoksik...8 E. Landasan Teori...8 F. Hipotesis...9 BAB II. METODE PENELITIAN...10 A. Kategori Penelitian...10 B. Alat dan Bahan...10 BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN...15 BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN...24 A. Kesimpulan...24 B. Saran...24 DAFTAR PUSTAKA...25 LAMPIRAN...29 vi

8 DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Struktur kimia flavonoid...4 Gambar 2. Struktur kimia steroid...4 Gambar 3. Struktur kimia geranil flavonoid...4 Gambar 4. Struktur kimia geranil dihidrokalkon...4 Gambar 5. Struktur kimia β-karoten...5 Gambar 6. Struktur kimia kuersetin...5 Gambar 7. Struktur kimia stigmastrol...6 Gambar 8. Struktur kimia phytol...6 Gambar 9. Struktur kimia flavanon...7 Gambar 10. Struktur kimia β-sitosterol...7 Gambar 11. Profil KLT ekstrak metanol daun sukun Gambar 12. Profil KLT ekstrak metanol daun nangka...16 Gambar 13. Profil KLT ekstrak metanol daun kluwih...16 Gambar 14. Reaksi pembentukan kristal formazan...19 Gambar 15. Morfologi sel MCF-7 dengan berbagai perlakuan...20 Gambar 16. Hubungan konsentrasi ekstrak dengan persentase sel hidup...22 vii

9 DAFTAR TABEL Tabel 1. Reagen deteksi senyawa...12 Tabel 2. Perhitungan hasil rendemen...15 Tabel 3. Visualisasi bercak pada uji KLT...17 Tabel 4. Data uji sitotoksik ekstrak daun sukun, nangka dan kluwih...21 viii

10 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Skema 96-well plate...29 Lampiran 2. Perhitungan sel dan seri konsentrasi ekstrak...30 Lampiran 4. Perhitungan larutan MTT...32 Lampiran 5. Hasil pembacaan absorbansi dengan ELISA reader...33 Lampiran 6. Perhitungan data hasil uji sitotoksik...34 ix

11 DAFTAR SINGKATAN Bax : BCL-2 Associated X Protein Bcl-2 : B-cell lymphoma 2 BRCA : Breast Cancer DMSO : Dimethyl Sulfoxide ELISA : Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay ER : Estrogen Receptor FBS : Fetal Bovine Serum IC 50 : Inhibitory Concentration 50 KLT : Kromatografi Lapis Tipis LAF : Laminar Air Flow MTT : 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium bromida PBS : Phospate Buffered Saline DMEM : Dulbecco s Modified Eagle s Medium SDS : Sodium Dodecyl Sulphate Sub G1 : Sub Growth 1 UV : Ultraviolet x

12 ABSTRAK Kanker payudara merupakan jenis kanker yang mempunyai angka kejadian tinggi dan persentase kematian yang tinggi pula. Penggunaan obat kemoterapi untuk terapi kanker sering menyebabkan kegagalan terapi karena sel kanker menjadi resisten terhadap paparan obat. Penelitian ini dilakukan untuk mengatasi masalah tersebut dengan eksplorasi bahan alam menggunakan daun dari tanaman sukun (Artocarpus altilis), nangka (Artocarpus heterophyllus) dan kluwih (Artocarpus camansi) yang diuji aktivitas sitotoksiknya terhadap sel kanker payudara MCF-7. Pembuatan ekstrak dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut metanol. Uji fitokimia dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis dengan fase diam silika gel GF-254 dan fase gerak etil asetat : n-heksan (2:8). Uji aktivitas antikanker pada sel kanker payudara MCF-7 dilakukan dengan MTT assay dengan konsentrasi sampel ekstrak masing-masing 500, 250, 125, 62,5 dan 31,25 µg/ml. Hasil uji sitotoksik dibaca menggunakan ELISA reader. Hasil uji fitokimia menunjukkan adanya kandungan senyawa golongan flavonoid, tanin dan alkaloid pada ketiga ekstrak. Hasil uji sitotoksik menunjukkan ketiga ekstrak memiliki aktivitas sitotoksik dengan potensi yang lemah pada sel kanker payudara MCF-7 dengan urutan potensi sukun > kluwih > nangka dengan nilai IC 50 berturut-turut sebesar 120,85 ; 339,46 dan 530,88 µg/ml. Kata kunci : ekstrak, KLT, sitotoksik, MTT, MCF-7, IC 50 xi

13 ABSTRACT Breast cancer is one type of cancer which has high incidence rates with a fairly high percentage of deaths. Treatment of cancer is a complex treatment that typically uses chemotherapy drugs as the drug of choice. The use of chemotherapeutic agents often leads to failure in treatment because drugs develop resistance to cancer itself. This research is aimed to evaluate the cytotoxic activity of methanol extract of breadfruit, jackfruit and kluwih leaves against breast cancer cell MCF-7. The extract of breadfruit, jackfruit and kluwih leaves were obtained by maceration method using methanol. Phytochemical test was conducted by Thin Layer Chromatography with stationary phase silica GF-254 and mobile phase of ethyl acetate : n-hexane (2:8). The cytotoxic test was conducted by MTT assay with concentration of each extract 500, 250, 125, 62,5 and 31,25 µg/ml. The result of cytotoxic test was measured by ELISA reader. Tannin and alkaloids were found in phytochemical test for three extracts. Cytotoxic test demonstrate that three extracts had low cytotoxic activity against breast cancer cell MCF-7 with IC ,85 ; 339,46 and 530,88 µg/ml respectively for breadfruit, kluwih and jackfruit. Keywords: extract, TLC, cytotoxic, MTT, MCF-7, IC 50 xii